水稻耐镉基因的验证

镉(Cd)是对人和动植物毒性最大的重金属元素之一,易在植物体中积累,这不仅会影响作物的质量和产量,还会对人类健康造成巨大的威胁。耐镉基因的克隆为从遗传水平上提高水稻品种耐镉性打下了基础。本课题以日本晴水稻为材料,围绕验证水稻中参与镉诱导的胁迫的基因这一主题,利用酵母异源互补实验,验证已从水稻cDNA文库中筛选出的耐镉基因是否确实具有耐镉性。本实验通过镉敏感酵母突变株?ycf1对水稻cDNA文库进行耐镉性筛选,得到了一个编码12-氧-植物二烯酸还原酶(Oxo-phytodienoic acid reduct

茉莉酸信号调控水稻缺铁响应的初步研究

茉莉酸作为植物重要的内源激素,在植物响应生物胁迫和非生物胁迫中发挥重要作用,但对于茉莉酸在矿质元素缺乏中的作用鲜有报道。本研究中,我们初步探究了茉莉酸在水稻缺铁响应中的作用。对10天苗龄水稻在四种不同营养条件(1)正常铁浓度(2μM,下同)加茉莉酸(0.1μM,下同)(+Fe+JA);(2)正常铁浓度不加茉莉酸(+Fe-JA);(3)缺铁加茉莉酸(-Fe+JA);(4)缺铁不加茉莉酸(-Fe-JA)下培养7天,并对水稻生长表型,叶绿素含量,全铁含量和根部缺铁响应基因表达情况进行分析。结果表明:在缺铁条件下

邻苯二甲酸双加氧酶基因克隆表达及其粗酶酶学特性的研究

邻苯二甲酸双加氧酶(phthalate dioxygenase,PDO)是邻苯二甲酸酯生物降解过程中的一个关键酶。邻苯二甲酸酯降解的中间产物邻苯二甲酸能在PDO的作用下开环,通过一系列的反应进入三羧酸循环,最终实现完全降解。本实验通过特定的扩增引物,从邻苯二甲酸二丁酯降解菌株Pseudomonas sp.strain QY-1中克隆得到编码邻苯二甲酸双加氧酶的基因pdy,大小约为950bp。利用扩增载体和表达载体实现pdy在大肠杆菌BL21(DE3)中的异源表达,然后纯化表达产物,获得纯酶,大小约为36

铜胁迫对大灰藓光合特性和叶绿素荧光的影响

以大灰藓为研究对象,分析了不同浓度铜胁迫处理5d后,大灰藓生长生理、光合特性和叶绿素荧光的变化以及细胞形态变化,并探讨大灰藓对于铜胁迫的适应机制。结果表明,整个铜离子处理范围内,大灰藓的干重没有显著变化,表现出较强的抵抗能力;但当铜离子浓度达到100 μmol/L时,大灰藓Fv/Fm显著降低,表明大灰藓光系统受到了损伤。大灰藓的叶片开始出现大量氧化斑,并且叶绿素含量开始发生显著降低,同时,光合作用中激发能分配的平衡被打破,叶片单位面积吸收捕获的光能减少,单位面积电子传递的量子产额降低;此外,反应中心吸收光

高效产草酸菌株的筛选和鉴定

草酸可以保留住土壤中的钙,以达到减缓土壤pH下降的目的,有着巨大的土壤改良潜力。目前为止,草酸应用于土壤改良的研究还十分少见,利用微生物产草酸来固定土壤中的钙更是鲜有研究。本实验以筛选高效产草酸菌株为目标,筛选得到Y2和Y40两株细菌,在实验室培养条件下,两株菌能在40小时内将培养液中草酸浓度提高至850ppm左右。同时,实验用传统鉴定方法发现Y2菌株的菌落扁平湿润,呈黄褐色,为革兰氏阴性杆菌,有鞭毛,能在有氧条件下分解葡萄糖产酸,但不产生乙酰甲基甲醇,不能水解淀粉,能液化明胶,具有氧化酶和接触酶,对青霉

crisprcas9构建mir210基因敲除hepg2细胞

目的 应用CRISPR/Cas9构建microRNA基因敲除HepG2肝癌细胞系。 方法 设计针对人miR-210基因序列(NC_000011.10)的sgRNA引物,构建sgRNAs表达质粒载体。借助Lipofectamin 2000转染表达载体后,利用Blasticidin抗性筛选的方法得到miR-210敲除细胞。结果 基因测序和凝胶电泳表明,sgRNA重组质粒构建成功。有效地转染了Cas9表达载体,经多轮药物筛选得到耐药生长的癌细胞。 结论 成功构建重组表达载体pU6-sgmiR-210;获得成

edds螯合诱导植物提取污染土壤过程中铜的淋溶

土壤重金属被螯合剂作用后其在土壤中的可溶性和移动性增加,使螯合诱导植物修复技术存在一定的淋溶风险。本文通过盆钵和盆钵叠放试验,研究了5 mmol·kg-1 EDDS螯合诱导小麦提取铜污染土壤中Cu的淋溶及动态变化。在施加5 mmol·kg-1 EDDS到种植小麦和无植物的土壤后的第7天,进行模拟降水处理,并将淋溶液施加到下层土壤中以研究下层土壤中Cu的淋溶及动态变化。结果表明,EDDS处理显著提高了污染土壤Cu的淋溶,与无植物相比,种植小麦会通过植物根系作用,降低污染土壤中Cu的淋溶。土壤淋溶液中的DOC

mrmr原则和优化svm的拟南芥磷酸化网络的链路预测

本文以支持向量机的方法为核心,首先将拟南芥蛋白质的序列转换成可以用计算机处理的数字矩阵形式,即以潜在的磷酸化位点为中心向两边各自延伸25个氨基酸形成一个序列窗口,作为SVM训练的样本数据。本实验选取阴阳性数据各2000例,用三种特征选取方法建立特征矩阵,再通过mRMR和PCA的方法对特征进行降维处理,我们使用libSVM工具箱对拟南芥阴阳性数据进行分类。最后我们分析出,使用氨基酸组成加上残基偶联的特征分类效果最好,而经过PCA处理后,虽然准确率略微下降,但是计算复杂度大大减小。最后,本实验还提取了蛋白质互

osspik的功能初探以及亚细胞定位研究

钾离子是植物生长和发育不可缺少的条件,是必需的大量元素之一。K+在花粉萌发和花粉管生长过程中发挥非常重要的作用, K+参与调节花粉管的胞内膨压、膜电势和离子的电荷平衡等,同时K+离子的跨膜运动是由花粉粒和花粉管质膜上的钾通道和转运体介导的。对花粉质膜内向K+通道分子水平的鉴定为研究K+在花粉萌发和花粉管生长过程中的作用提供了重要依据。本研究主要通过克隆水稻基因OsSPIK,连接载体后,利用农杆菌侵染烟草的方法确定其亚细胞定位,同时证明OsSPIK基因的表达有助于提高钾吸收缺陷型酵母的K+吸收能力。本研究初

oswak基因突变对水稻生长及细胞壁铜结合能力的影响

植物细胞壁关联蛋白激酶(Wall-associated kinases , WAKs)是一类特殊的类受体蛋白激酶(Receptor-like kinases , RLKs), 不但具有跨膜结构域,且与细胞壁紧密相联。因其能够直接连接细胞壁与细胞质的特性以及可能的具备受体功能,WAK能够作为研究细胞壁信号分子到细胞质的跨膜传递很好的模型,同时在植物体的生长发育等方面也起到了重要的作用。本文采用不同浓度铜处理分别处理水稻野生型及WAK基因沉默株系,对其根系伸长量、生物量、气孔发育、细胞壁各组分糖醛酸含量及其对

sir基因在不同崇明拟异小杆线虫处理组中的差异表达

为了解Sir基因在线虫新种崇明拟异小杆线虫中的表达情况以及其与线虫共生菌之间的共生关系,进一步阐释Sir-2.1的作用机理,开发昆虫病原线虫及其共生细菌资源,本次建立了4种线虫细菌共生体系。提取4种不同细菌共生体系线虫组的RNA,反转录后选取9322(Sir)基因做实时定量QRT-PCR验证。9322(Sir)基因在4组崇明拟异小杆线虫中表达量不同,与共生菌s1共生的线虫组表达量明显下调,而与具有致病性的沙雷氏菌共生的线虫组表达量也较无毒性大肠杆菌共生组线虫低。这种表达量的明显差异可能与共生细菌分泌的活性

好棒文