超声波酶法联合提取绞股蓝总黄酮的工艺研究
摘 要以绞股蓝总黄酮含量为主要考察指标，本文采用超声波-酶法联合提取绞股蓝总黄酮，进行正交设计，根据单因子酶水解时间，酶水解pH，酶水解温度和超声时间测试结果，综合考虑各因素对提取效果的影响，确定绞股蓝的最佳提取工艺条件。绞股蓝。为开发利用提供理论依据。采用了正交试验的方法来优选化得出最适当的工艺。酶解的时间是35分钟，酶水解温度为40℃，超声波处理时间为30分钟。酶水解pH为5.5，
目 录
目 录 IV
1 绪论 1
1.1 绞股蓝的简介 1
1.2绞股蓝的化学成分 1
1.2.1 皂苷类 1
1.2.2 黄酮类 1
1.2.3 氨基酸 1
1.3 绞股蓝的药理作用 2
1.3.1 抗肿瘤 2
1.3.2 降血糖 2
1.3.3 免疫调节作用 2
2研究方法 3
2.1 实验药材、药品及仪器 3
2.2 实验方法 3
2.2.1 标准曲线制备 3
2.2.2 总黄酮得率的测定 3
2.2.3 单因素试验 4
2.2.4 正交试验设计 4
3结果分析 5
3.1标准曲线 5
3.2单因素试验结果 5
3.2.1 酶解时间对总黄酮提取率的影响 5
3.2.2酶解PH对总黄酮提取率的影响 6
3.2.3酶解温度对总黄酮提取率的影响 6
3.2.4超声时间对总黄酮提取率的影响 7
3.3正交试验因素与水平设计 8
3.4正交试验结果与分析 8
4结论 10
5参考文献 11
6致 谢 12
1 绪论
1.1 绞股蓝的简介
绞股蓝为绞股蓝属草质攀援植物，具有分枝以及纵棱槽，绞股蓝适宜阴湿以及较为温和的气候条件，茎呈现细弱状，在林下以及小溪边等的荫蔽处生长的数量较多，无毛或者疏被短柔毛状，
主要是分在东南亚还有长江以南的大部分地区，拥有很多的的黄酮类化合物[1]，在促进新陈代 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
谢、治疗气管炎等方面具有良好疗效，还有临床的抗疲劳、传染性肝炎等方面的作用[2]。日本称作甘蔓茶。
1.2绞股蓝的化学成分
1.2.1 皂苷类
绞股蓝皂苷是绞股蓝植物中比重很大的物质，绞股蓝皂苷中一些成分分别具有与人参皂苷相同的结构。部位不同其含量也有所不同，存在于植物营养器官一些组织中还有韧皮部薄壁细胞，而在叶子中的含有量是最高的[3]。随着色谱分离方法和光谱技术的不断发展，从绞股蓝中分离出140多种绞股蓝皂苷 [4]。
1.2.2 黄酮类
绞股蓝中黄酮类化合物的含量为2％~5％。它们的主要功能是调节生长素的运输。而现在多数都是关于其含量测定和制备工艺的研究[5]。现今所记载的关于绞股蓝其中所含有的黄酮类化合物的一些文献比较少。
1.2.3 氨基酸
绞股蓝中氨基酸的含量与种类很多，其中有很多的氨基酸都拥有着药理活性。含量为6.5824μg/ g。例如，亮氨酸对皮肤和伤口愈合有作用。促进腺体分泌，过敏性疾病组氨酸的作用较为明显，还可以对消化性溃疡、心绞痛等进行做用[6]。
1.3 绞股蓝的药理作用
1.3.1 抗肿瘤
绞股蓝中有一种很重要的成分被叫做绞股蓝皂苷，通过调查各种期刊以及文献发现它对于一些癌症的治疗具有明显的作用 [7]。并且能使其快速其凋亡，这一作用也得到了多方学者的验证 [8]。从各项调查中显示出在细胞增殖方面也有很大作用[9]。
1.3.2 降血糖
糖尿病在当今社会变得越来越普遍。已经成为心脑血管疾病和恶性肿瘤之后的第三大持续性疾病。严重影响人们的健康生活。绞股蓝对此方面的疾病还有并发症丢有很明显的效果[10]。通过对实验性糖尿病小鼠运用股蓝皂苷来实施实验性治疗，发现小鼠的血糖降低，显现出绞股蓝皂苷对于肝糖原合成有一定对效果[11]。绞股蓝的一些衍生物以及分离出来的物质。可以起到降低蛋白酪氨酸磷脂酶的活性的状态，从最终结果可以看出，促进胰岛素的分泌然后降低血糖的含量。还发现，绞股蓝的乙醇提取物可以通过改变葡萄糖代谢酶活性从而起到降低血糖浓度的效果[12]。
1.3.3 免疫调节作用
从增强非特异性免疫力的方面可以看出绞股蓝的活性，对体外和体内细胞因子的分泌显著影响;细胞免疫;;。绞股蓝脂质体（GPSL）的体外免疫活性试验可以看出，绞股蓝具具有免疫调节作用并能够影响淋巴细胞转化和白细胞介素2的分泌[13]。
2研究方法
2.1 实验药材、药品及仪器
药材：绞股蓝在西安的药材市场购买。经过陕西国际商贸学院中药学教研室的雷国莲教授鉴定是葫芦科、绞股蓝属草质攀援植物绞股蓝。
药品：芦丁对照品（批号1000872200885）从药品生物制品检定所购买（质量分数≥98%）；
纤维素酶（2000U/g，批号200795）从湖南有特儿有限公司购买；
其他试剂均为分析纯。
仪器：V2450紫外可见分光光度计 长沙湘平科技发展有限公司
HH2数显恒温水浴锅 昆山市科学仪器总厂
精密pH计 国华电器有限公司
Es10K电子天平 日本岛津出品
FA2004型电子天平 广州市实验仪器总厂
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1 绪论 1
1.1 绞股蓝的简介 1
1.2绞股蓝的化学成分 1
1.2.1 皂苷类 1
1.2.2 黄酮类 1
1.2.3 氨基酸 1
1.3 绞股蓝的药理作用 2
1.3.1 抗肿瘤 2
1.3.2 降血糖 2
1.3.3 免疫调节作用 2
2研究方法 3
2.1 实验药材、药品及仪器 3
2.2 实验方法 3
2.2.1 标准曲线制备 3
2.2.2 总黄酮得率的测定 3
2.2.3 单因素试验 4
2.2.4 正交试验设计 4
3结果分析 5
3.1标准曲线 5
3.2单因素试验结果 5
3.2.1 酶解时间对总黄酮提取率的影响 5
3.2.2酶解PH对总黄酮提取率的影响 6
3.2.3酶解温度对总黄酮提取率的影响 6
3.2.4超声时间对总黄酮提取率的影响 7
3.3正交试验因素与水平设计 8
3.4正交试验结果与分析 8
4结论 10
5参考文献 11
6致 谢 12
1 绪论
1.1 绞股蓝的简介
绞股蓝为绞股蓝属草质攀援植物，具有分枝以及纵棱槽，绞股蓝适宜阴湿以及较为温和的气候条件，茎呈现细弱状，在林下以及小溪边等的荫蔽处生长的数量较多，无毛或者疏被短柔毛状，
主要是分在东南亚还有长江以南的大部分地区，拥有很多的的黄酮类化合物[1]，在促进新陈代 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
谢、治疗气管炎等方面具有良好疗效，还有临床的抗疲劳、传染性肝炎等方面的作用[2]。日本称作甘蔓茶。
1.2绞股蓝的化学成分
1.2.1 皂苷类
绞股蓝皂苷是绞股蓝植物中比重很大的物质，绞股蓝皂苷中一些成分分别具有与人参皂苷相同的结构。部位不同其含量也有所不同，存在于植物营养器官一些组织中还有韧皮部薄壁细胞，而在叶子中的含有量是最高的[3]。随着色谱分离方法和光谱技术的不断发展，从绞股蓝中分离出140多种绞股蓝皂苷 [4]。
1.2.2 黄酮类
绞股蓝中黄酮类化合物的含量为2％~5％。它们的主要功能是调节生长素的运输。而现在多数都是关于其含量测定和制备工艺的研究[5]。现今所记载的关于绞股蓝其中所含有的黄酮类化合物的一些文献比较少。
1.2.3 氨基酸
绞股蓝中氨基酸的含量与种类很多，其中有很多的氨基酸都拥有着药理活性。含量为6.5824μg/ g。例如，亮氨酸对皮肤和伤口愈合有作用。促进腺体分泌，过敏性疾病组氨酸的作用较为明显，还可以对消化性溃疡、心绞痛等进行做用[6]。
1.3 绞股蓝的药理作用
1.3.1 抗肿瘤
绞股蓝中有一种很重要的成分被叫做绞股蓝皂苷，通过调查各种期刊以及文献发现它对于一些癌症的治疗具有明显的作用 [7]。并且能使其快速其凋亡，这一作用也得到了多方学者的验证 [8]。从各项调查中显示出在细胞增殖方面也有很大作用[9]。
1.3.2 降血糖
糖尿病在当今社会变得越来越普遍。已经成为心脑血管疾病和恶性肿瘤之后的第三大持续性疾病。严重影响人们的健康生活。绞股蓝对此方面的疾病还有并发症丢有很明显的效果[10]。通过对实验性糖尿病小鼠运用股蓝皂苷来实施实验性治疗，发现小鼠的血糖降低，显现出绞股蓝皂苷对于肝糖原合成有一定对效果[11]。绞股蓝的一些衍生物以及分离出来的物质。可以起到降低蛋白酪氨酸磷脂酶的活性的状态，从最终结果可以看出，促进胰岛素的分泌然后降低血糖的含量。还发现，绞股蓝的乙醇提取物可以通过改变葡萄糖代谢酶活性从而起到降低血糖浓度的效果[12]。
1.3.3 免疫调节作用
从增强非特异性免疫力的方面可以看出绞股蓝的活性，对体外和体内细胞因子的分泌显著影响;细胞免疫;;。绞股蓝脂质体（GPSL）的体外免疫活性试验可以看出，绞股蓝具具有免疫调节作用并能够影响淋巴细胞转化和白细胞介素2的分泌[13]。
2研究方法
2.1 实验药材、药品及仪器
药材：绞股蓝在西安的药材市场购买。经过陕西国际商贸学院中药学教研室的雷国莲教授鉴定是葫芦科、绞股蓝属草质攀援植物绞股蓝。
药品：芦丁对照品（批号1000872200885）从药品生物制品检定所购买（质量分数≥98%）；
纤维素酶（2000U/g，批号200795）从湖南有特儿有限公司购买；
其他试剂均为分析纯。
仪器：V2450紫外可见分光光度计 长沙湘平科技发展有限公司
HH2数显恒温水浴锅 昆山市科学仪器总厂
精密pH计 国华电器有限公司
Es10K电子天平 日本岛津出品
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