超声波酶法提取沙苑子总黄酮的工艺研究
摘 要本实验采用超声波-酶联合提取法提取沙苑子中总黄酮成分并对提取工艺进行优化；在单因素实验的基础上，采用Design Expert软件8.0.版进行响应面实验设计分析，获取最优的沙苑子总黄酮提取工艺；选用沙苑子总黄酮的提取量为响应值，探究影响因子Etoh浓度（%）、温度（℃）、pH 值、加酶量（%）对沙苑子总黄酮含量的影响；最终的实验结果为Etoh浓度选择80%、温度选择49℃，PH值取5.2，加酶量选择0.32%时，总黄酮的提取量达到最大值，且总黄酮含量猜测值为4.321mg/g，验证值为4.366mg/g，差别不大，表明猜测值与验证值相近度很高，证明该最优的工艺参数是准确可靠的。
目 录
1 绪 论 1
1.1概述 1
1.1.1沙苑子的植物特征 1
1.1.2沙苑子的记载史 1
1.2所含化学成分 1
1.2.1 黄酮类化合物 2
1.2.2三萜类化合物 2
1.2.3氨基酸类化合物 2
1.2.4其他化学成分 3
1.3沙苑子的药理作用 3
1.3.1降脂作用 3
1.3.2对高血压的抑制作用 3
1.3.3消除炎症、增高抵抗力的作用 3
1.3.4减轻疲劳、增强活动能力的作用 4
1.3.5其他的作用 4
2 实验 5
2.1实验用品 5
2.1.1样品 5
2.1.2所需试剂 5
2.1.3所需仪器 5
2.2实验方法 6
2.2.1芦丁标准品溶液的配制 6
2.2.2样品曲线的绘制 6
2.2.3沙苑子总黄酮的提取 6
2.2.4单因素实验考察 6
2.2.5响应面法 7
3 结果分析 8
3.1标准曲线 8
3.2单因素 8
3.2.1Etoh浓度 8
3.2.2 酶解温度 9
3.2.3 PH值 9
3.2.4酶含量 10
3.3沙苑子响应面实验的结果与分析 10 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
3.3.1响应面实验结果及分析 11
3.3.2响应面之间的交互作用 13
3.3.3确定工艺最佳条件并验证 16
结 论 17
参考文献 18
致 谢 20
1 绪 论
1.1概述
沙苑子（Semen astragali complanati）豆科植物类一年生长期的草本植物，扁茎黄芪的种子[1]。其他称呼有沙苑白蒺藜、白蒺藜、潼蒺藜、沙苑蒺藜等。沙苑子常分布在我国北方的内蒙古、东北的辽宁、西北的陕西等这些地域内，被收纳于历朝各代的本草记载中。喜欢生长于高度为一千米以上的山坡上或者含碱的草甸及灌木草丛里，现今多为人工栽培养殖，陕西省大荔县生产的沙苑子，别名叫潼蒺藜，是道地药材[2]。
1.1.1沙苑子的植物特征
沙苑子属于豆科草本植物，高约30～100厘米[3]。主根朝地面伸展，可以达到1m。茎平卧较细弱，长20～100厘米，无毛或为粗短不一的硬毛。羽毛状复叶，一般约9～25片，形似扁球状，长宽比为2：1。叶边似V形凹凸，叶片上长有小绒毛。总状花序大约3～7片，短梗，萼齿与萼筒长相近。花冠白色或带红色。瓣片为圆形。花期为7～9月，结果期为8～10月。
沙苑子形状为扁椭圆样，侧边凹进去处为沙苑子的种脐，触摸有光滑感，颜色似咖啡，非常坚硬，不容易被外物破坏表皮。闻之味道稍淡，口嚼似豆味。
1.1.2沙苑子的记载史
在各种中药材记录中，沙苑子第一次出现是在《尔雅》这本书中[4]，沙苑子经常与其他药物进行配伍使用，是治疗人体肾虚的主要良药。沙苑子可以用做治疗遗精溺血等病症，《本草纲目》《本草蒙筌》等中都有关于沙苑子用于治疗此类功效的载录。同时沙苑子可以用来治疗尿频尿遗沥的症状， 还能养肝明目，“小便多，止遗沥”、“兼止小便遗沥” 、“能养肝明目”都是对于沙苑子其药效的古代载录。沙苑子还能够帮助气化、消脂，主要是因为沙苑子温和但却不燥的药性，气味回甘，又能够入肝经和肾经。
1.2所含化学成分
1.2.1 黄酮类化合物
使用Etoh对沙苑子进行提取分离，对沙苑子提取物研究分析后发现其含有大量的黄酮类成分，其中包括沙苑子苷（Complanatuside）和沙苑子新苷（Neocomplanoside）、沙苑子杨梅苷 [5]以及紫云英苷（Astragalin）、杨梅树皮素、山奈素（Kaempferol）、山奈素3OαL阿拉伯吡喃糖苷（Kaempferol3OαLarabinopyranoside）、鼠李柠檬素－3，4－O－β－D－双葡萄糖苷（Rhamnolidin3,4OβDdiglucoside）。使用Meoh提取分离沙苑子，提取物中含有的黄酮成分有鼠李柠檬素(Rhamnocitrin)[6] 和异槲皮素苷（Isoquercetin glycoside）、芒柄花素(Formononetintin)和土麻苷（Saponins）、杨梅素－3－O－β－D－葡萄糖苷（Myricetin3OβDglucoside）和胡萝卜素苷（Carotene glycoside）。
1.2.2三萜类化合物
沙苑子提取物中除了黄酮类成分还含有大量的三萜类成分，其中包括：黄芪苷Ⅷ甲脂（Astragalus glycosides Ⅷ armour grease）、大豆皂苷Ⅰ甲脂（Soybean saponin Ⅰ armour grease）、3－O－α－l－吡喃鼠李糖基(1→2)－β－D－吡喃木糖基(1→2)－6－O－甲基－β－D－吡喃葡萄糖醛酸基大豆皂醇β－22－O－β－D－吡喃葡萄糖苷、3－O－α－L－吡喃鼠李糖基(1→2)－β－D－吡喃半乳糖基(1→2)－6－O－甲基－β－D－吡喃葡萄糖醛酸基－3β、22β和24－三羟基－11－氧甙－12－齐墩果烯、3－O－α－L－吡喃鼠李糖基(1－2)－β－D－吡喃木糖基(1→2)－6－O－甲基－β－D－吡喃葡萄糖醛酸基－3β、22β、24－三羟基－11－氧甙－12－齐墩果烯[7]。
1.2.3氨基酸类化合物
目 录
1 绪 论 1
1.1概述 1
1.1.1沙苑子的植物特征 1
1.1.2沙苑子的记载史 1
1.2所含化学成分 1
1.2.1 黄酮类化合物 2
1.2.2三萜类化合物 2
1.2.3氨基酸类化合物 2
1.2.4其他化学成分 3
1.3沙苑子的药理作用 3
1.3.1降脂作用 3
1.3.2对高血压的抑制作用 3
1.3.3消除炎症、增高抵抗力的作用 3
1.3.4减轻疲劳、增强活动能力的作用 4
1.3.5其他的作用 4
2 实验 5
2.1实验用品 5
2.1.1样品 5
2.1.2所需试剂 5
2.1.3所需仪器 5
2.2实验方法 6
2.2.1芦丁标准品溶液的配制 6
2.2.2样品曲线的绘制 6
2.2.3沙苑子总黄酮的提取 6
2.2.4单因素实验考察 6
2.2.5响应面法 7
3 结果分析 8
3.1标准曲线 8
3.2单因素 8
3.2.1Etoh浓度 8
3.2.2 酶解温度 9
3.2.3 PH值 9
3.2.4酶含量 10
3.3沙苑子响应面实验的结果与分析 10 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
3.3.1响应面实验结果及分析 11
3.3.2响应面之间的交互作用 13
3.3.3确定工艺最佳条件并验证 16
结 论 17
参考文献 18
致 谢 20
1 绪 论
1.1概述
沙苑子（Semen astragali complanati）豆科植物类一年生长期的草本植物，扁茎黄芪的种子[1]。其他称呼有沙苑白蒺藜、白蒺藜、潼蒺藜、沙苑蒺藜等。沙苑子常分布在我国北方的内蒙古、东北的辽宁、西北的陕西等这些地域内，被收纳于历朝各代的本草记载中。喜欢生长于高度为一千米以上的山坡上或者含碱的草甸及灌木草丛里，现今多为人工栽培养殖，陕西省大荔县生产的沙苑子，别名叫潼蒺藜，是道地药材[2]。
1.1.1沙苑子的植物特征
沙苑子属于豆科草本植物，高约30～100厘米[3]。主根朝地面伸展，可以达到1m。茎平卧较细弱，长20～100厘米，无毛或为粗短不一的硬毛。羽毛状复叶，一般约9～25片，形似扁球状，长宽比为2：1。叶边似V形凹凸，叶片上长有小绒毛。总状花序大约3～7片，短梗，萼齿与萼筒长相近。花冠白色或带红色。瓣片为圆形。花期为7～9月，结果期为8～10月。
沙苑子形状为扁椭圆样，侧边凹进去处为沙苑子的种脐，触摸有光滑感，颜色似咖啡，非常坚硬，不容易被外物破坏表皮。闻之味道稍淡，口嚼似豆味。
1.1.2沙苑子的记载史
在各种中药材记录中，沙苑子第一次出现是在《尔雅》这本书中[4]，沙苑子经常与其他药物进行配伍使用，是治疗人体肾虚的主要良药。沙苑子可以用做治疗遗精溺血等病症，《本草纲目》《本草蒙筌》等中都有关于沙苑子用于治疗此类功效的载录。同时沙苑子可以用来治疗尿频尿遗沥的症状， 还能养肝明目，“小便多，止遗沥”、“兼止小便遗沥” 、“能养肝明目”都是对于沙苑子其药效的古代载录。沙苑子还能够帮助气化、消脂，主要是因为沙苑子温和但却不燥的药性，气味回甘，又能够入肝经和肾经。
1.2所含化学成分
1.2.1 黄酮类化合物
使用Etoh对沙苑子进行提取分离，对沙苑子提取物研究分析后发现其含有大量的黄酮类成分，其中包括沙苑子苷（Complanatuside）和沙苑子新苷（Neocomplanoside）、沙苑子杨梅苷 [5]以及紫云英苷（Astragalin）、杨梅树皮素、山奈素（Kaempferol）、山奈素3OαL阿拉伯吡喃糖苷（Kaempferol3OαLarabinopyranoside）、鼠李柠檬素－3，4－O－β－D－双葡萄糖苷（Rhamnolidin3,4OβDdiglucoside）。使用Meoh提取分离沙苑子，提取物中含有的黄酮成分有鼠李柠檬素(Rhamnocitrin)[6] 和异槲皮素苷（Isoquercetin glycoside）、芒柄花素(Formononetintin)和土麻苷（Saponins）、杨梅素－3－O－β－D－葡萄糖苷（Myricetin3OβDglucoside）和胡萝卜素苷（Carotene glycoside）。
1.2.2三萜类化合物
沙苑子提取物中除了黄酮类成分还含有大量的三萜类成分，其中包括：黄芪苷Ⅷ甲脂（Astragalus glycosides Ⅷ armour grease）、大豆皂苷Ⅰ甲脂（Soybean saponin Ⅰ armour grease）、3－O－α－l－吡喃鼠李糖基(1→2)－β－D－吡喃木糖基(1→2)－6－O－甲基－β－D－吡喃葡萄糖醛酸基大豆皂醇β－22－O－β－D－吡喃葡萄糖苷、3－O－α－L－吡喃鼠李糖基(1→2)－β－D－吡喃半乳糖基(1→2)－6－O－甲基－β－D－吡喃葡萄糖醛酸基－3β、22β和24－三羟基－11－氧甙－12－齐墩果烯、3－O－α－L－吡喃鼠李糖基(1－2)－β－D－吡喃木糖基(1→2)－6－O－甲基－β－D－吡喃葡萄糖醛酸基－3β、22β、24－三羟基－11－氧甙－12－齐墩果烯[7]。
1.2.3氨基酸类化合物
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