梨成熟果实对炭疽病菌和轮纹病菌
对101个梨品种成熟果实抗炭疽病菌和轮纹病菌扩展能力进行评价、聚类分析，并对其抗病菌扩展能力与生理指标作相关分析。聚类分析结果表明，101个梨品种果实对两种病菌抗扩展能力均可分为五类即抗扩展性强、较强、中等、较弱、弱。其中对炭疽病菌和轮纹病菌抗扩展性中等的品种最多，分别占供试品种40.6%和35.6%，而对这两种病菌抗扩展性弱的品种最少，分别占供试品种5.9%和2.0%。相关分析表明，果肉总酚含量分别与果实抗炭疽病菌和轮纹病菌的扩展能力呈极显著和显著正相关；果肉石细胞含量与果实对这两种病菌抗扩展的能力均呈正相关，其中与轮纹病达到极显著水平；而果肉木质素含量和果实对这两种病菌抗扩展能力之间相关性不明显。
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words 3
引言 3
1材料与方法 4 1.1材料 4
1.2方法 4
1.2.1样品采集4
1.2.2接种方法4
1.2.3果实主要生理指标测定4
1.3数据处理4
2结果与分析4
2.1不同梨品种果实对炭疽病菌抗扩展能力及其生理指标变化特点4
2.2 不同梨品种果实对炭疽病菌和轮纹病菌的抗扩展能力的聚类分析 6
2.3 梨果实对炭疽病菌和轮纹病菌的抗扩展能力与其主要生理指标相关性分析 7
3讨论 8
致谢 8
参考文献8
梨成熟果实对炭疽病菌和轮纹病菌抗扩展能力的评价
引言
梨炭疽病（Pear anthracnose）和轮纹病（Pear ring rot）是梨树两大主要病害。梨炭疽病菌为半知菌亚门刺盘孢属的胶孢炭疽菌（Collectorichum gloeosporioides）[1]，主要危害果实，使果实腐烂、早落、影响产量和品质。梨轮纹病菌为子囊菌亚门葡萄座腔菌属的梨生孢囊壳菌（Botryosphaeria berengeriana）[2]，主要危害枝干和果实，叶片受害比较少见。梨轮纹病除危害梨，还可危害苹果、山楂、桃等果树。培育和利用抗病品种是防治病害的最有效、最符合农业可持续发展要求的 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
措施，因此鉴定梨品种对炭疽病菌和轮纹病菌的抗性是抗病育种的关键环节之一。目前，不同梨品种果实对炭疽病菌抗性的评价还未见报道，而对轮纹病菌抗性的评价虽有部分报道[35]，但所试验品种有限。病原菌在寄主体内扩展是导致其发病的重要阶段之一，因此研究寄主抗病原菌扩展能力对于评价其抗病性具有较好的指导意义。本研究对101份梨种质资源的成熟果实进行室内接种梨炭疽病菌和轮纹病菌，测定各梨品种果实对两种病菌的抗扩展能力。本研究首次利用聚类分析方法对梨成熟果实抗炭疽病菌和轮纹病菌扩展能力分类，该分类方法比较灵活，可以根据研究目的及研究对象而调整，使分类在定量和定性方面得到统一。同时，对梨果实抗病菌扩展能力及果实主要生理指标进行相关性分析。本研究不仅为梨优质生产技术提供理论支撑，还可为梨种质资源评价、筛选及抗性育种提供重要理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
2012年7月10月，以大学江浦梨资源圃的101个梨品种果实为试材。梨炭疽病菌和轮纹病菌由大学植物保护学院刘凤权课题组提供。
1.2方法
1.2.1 样品采集
于各品种的成熟期采摘梨果实，不同梨品种成熟期的确定参考各品种往年成熟期和种子颜色变成褐色且果实组织没有衰老。每个品种选取长势中等、产量一致的5株树，在每株树冠外围不同方向随机选取5个大小一致、无病虫害果实，每个品种共计25个果实。10个果实用于接种炭疽病菌，10个果实用于接种轮纹病菌， 5个果实用于测定该品种主要生理指标。
1.2.2 接种方法
取生长均一的梨炭疽病菌及轮纹病菌菌丝培养物，连同培养基用直径5 mm打孔器采下菌饼。用酒精棉（75%酒精浸泡）对梨表面进行消毒处理，在每个梨果实中偏上部针刺接种菌饼，每果接种2个菌饼，封口膜密封固定。接种后的果实置于28℃恒温培养箱内培养，培养6d，测量病斑直径。病斑直径越大，表明梨品种对病菌抗扩展能力越小。
1.2.3 果实主要生理指标测定
总酚含量的测定采用福林酚法[6]，以没食子酸为基准物质，计算梨果肉多酚含量。石细胞含量测定参照聂继云等[7]的冷冻分离法进行。木质素含量测定参照Maria A. Sancho等[8]的方法。
1.3 数据处理
试验数据用SPSS13.0软件统计分析。依据病斑直径，运用欧氏最长距离法，对101个梨品种进行聚类分析。同时，对梨果实炭疽病病斑直径、轮纹病病斑直径与梨果肉总酚、石细胞以及木质素含量作相关性分析。
2 结果与分析
2.1 不同梨品种果实对炭疽病菌和轮纹病菌抗扩展能力及其生理指标变化特点
101个梨品种果实炭疽病病斑直径和轮纹病病斑直径及其生理指标见表1。从表1可以看出：不同梨品种感病（炭疽病和轮纹病）后的病斑直径差异较大。其中，炭疽病病斑直径为0.638～3.974 cm，均值为2.358 cm；轮纹病病斑直径为1.856～6.720 cm，均值是3.881cm。由此可知，总体上，轮纹病病斑直径平均比炭疽病病斑直径大，即梨种质资源对轮纹病菌的抗扩展能力低于对炭疽病菌的抗扩展能力。在所有供试梨品种果实中，‘巴梨’总酚含量最高，为0.859 A/gFW，‘秋荣’总酚含量最低，为0.163 A/gFW，101个梨品种果实总酚含量均值是0.323 A/gFW；石细胞含量差异很大，含量变化范围在 0.010~1.036 g/100gFW，均值为0.233 g/100gFW，大部分品种集中在0.1~0.65 g/100gFW，占所有品种的77.8%，只有2个品种大于0.65 g/100g/FW，分别为‘白皮酥’和‘金川野生梨2号’；木质素含量变化范围为0.140～0.547 A/10gFW，均值为0.303 A/10gFW。
表1炭疽病病斑直径、轮纹病病斑直径及其主要生理指标
Table 1 The main physiological factors in fruit and lesion diameter of fruit anthracnose and ring rot
编号
Number
品种名称
Cultivar name
炭疽病病斑直径/cm
Lesion diameter of fruit anthracnose
轮纹病病斑直径/cm
Lesion diameter of ring rot
总酚含量
/Ag1FW
Total phenols content
石细胞含量/g100g1FW
Stone cell content
木质素含量/A10g1FW
Lignin content
1
早蜜
3.218
5.678
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words 3
引言 3
1材料与方法 4 1.1材料 4
1.2方法 4
1.2.1样品采集4
1.2.2接种方法4
1.2.3果实主要生理指标测定4
1.3数据处理4
2结果与分析4
2.1不同梨品种果实对炭疽病菌抗扩展能力及其生理指标变化特点4
2.2 不同梨品种果实对炭疽病菌和轮纹病菌的抗扩展能力的聚类分析 6
2.3 梨果实对炭疽病菌和轮纹病菌的抗扩展能力与其主要生理指标相关性分析 7
3讨论 8
致谢 8
参考文献8
梨成熟果实对炭疽病菌和轮纹病菌抗扩展能力的评价
引言
梨炭疽病（Pear anthracnose）和轮纹病（Pear ring rot）是梨树两大主要病害。梨炭疽病菌为半知菌亚门刺盘孢属的胶孢炭疽菌（Collectorichum gloeosporioides）[1]，主要危害果实，使果实腐烂、早落、影响产量和品质。梨轮纹病菌为子囊菌亚门葡萄座腔菌属的梨生孢囊壳菌（Botryosphaeria berengeriana）[2]，主要危害枝干和果实，叶片受害比较少见。梨轮纹病除危害梨，还可危害苹果、山楂、桃等果树。培育和利用抗病品种是防治病害的最有效、最符合农业可持续发展要求的 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
措施，因此鉴定梨品种对炭疽病菌和轮纹病菌的抗性是抗病育种的关键环节之一。目前，不同梨品种果实对炭疽病菌抗性的评价还未见报道，而对轮纹病菌抗性的评价虽有部分报道[35]，但所试验品种有限。病原菌在寄主体内扩展是导致其发病的重要阶段之一，因此研究寄主抗病原菌扩展能力对于评价其抗病性具有较好的指导意义。本研究对101份梨种质资源的成熟果实进行室内接种梨炭疽病菌和轮纹病菌，测定各梨品种果实对两种病菌的抗扩展能力。本研究首次利用聚类分析方法对梨成熟果实抗炭疽病菌和轮纹病菌扩展能力分类，该分类方法比较灵活，可以根据研究目的及研究对象而调整，使分类在定量和定性方面得到统一。同时，对梨果实抗病菌扩展能力及果实主要生理指标进行相关性分析。本研究不仅为梨优质生产技术提供理论支撑，还可为梨种质资源评价、筛选及抗性育种提供重要理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
2012年7月10月，以大学江浦梨资源圃的101个梨品种果实为试材。梨炭疽病菌和轮纹病菌由大学植物保护学院刘凤权课题组提供。
1.2方法
1.2.1 样品采集
于各品种的成熟期采摘梨果实，不同梨品种成熟期的确定参考各品种往年成熟期和种子颜色变成褐色且果实组织没有衰老。每个品种选取长势中等、产量一致的5株树，在每株树冠外围不同方向随机选取5个大小一致、无病虫害果实，每个品种共计25个果实。10个果实用于接种炭疽病菌，10个果实用于接种轮纹病菌， 5个果实用于测定该品种主要生理指标。
1.2.2 接种方法
取生长均一的梨炭疽病菌及轮纹病菌菌丝培养物，连同培养基用直径5 mm打孔器采下菌饼。用酒精棉（75%酒精浸泡）对梨表面进行消毒处理，在每个梨果实中偏上部针刺接种菌饼，每果接种2个菌饼，封口膜密封固定。接种后的果实置于28℃恒温培养箱内培养，培养6d，测量病斑直径。病斑直径越大，表明梨品种对病菌抗扩展能力越小。
1.2.3 果实主要生理指标测定
总酚含量的测定采用福林酚法[6]，以没食子酸为基准物质，计算梨果肉多酚含量。石细胞含量测定参照聂继云等[7]的冷冻分离法进行。木质素含量测定参照Maria A. Sancho等[8]的方法。
1.3 数据处理
试验数据用SPSS13.0软件统计分析。依据病斑直径，运用欧氏最长距离法，对101个梨品种进行聚类分析。同时，对梨果实炭疽病病斑直径、轮纹病病斑直径与梨果肉总酚、石细胞以及木质素含量作相关性分析。
2 结果与分析
2.1 不同梨品种果实对炭疽病菌和轮纹病菌抗扩展能力及其生理指标变化特点
101个梨品种果实炭疽病病斑直径和轮纹病病斑直径及其生理指标见表1。从表1可以看出：不同梨品种感病（炭疽病和轮纹病）后的病斑直径差异较大。其中，炭疽病病斑直径为0.638～3.974 cm，均值为2.358 cm；轮纹病病斑直径为1.856～6.720 cm，均值是3.881cm。由此可知，总体上，轮纹病病斑直径平均比炭疽病病斑直径大，即梨种质资源对轮纹病菌的抗扩展能力低于对炭疽病菌的抗扩展能力。在所有供试梨品种果实中，‘巴梨’总酚含量最高，为0.859 A/gFW，‘秋荣’总酚含量最低，为0.163 A/gFW，101个梨品种果实总酚含量均值是0.323 A/gFW；石细胞含量差异很大，含量变化范围在 0.010~1.036 g/100gFW，均值为0.233 g/100gFW，大部分品种集中在0.1~0.65 g/100gFW，占所有品种的77.8%，只有2个品种大于0.65 g/100g/FW，分别为‘白皮酥’和‘金川野生梨2号’；木质素含量变化范围为0.140～0.547 A/10gFW，均值为0.303 A/10gFW。
表1炭疽病病斑直径、轮纹病病斑直径及其主要生理指标
Table 1 The main physiological factors in fruit and lesion diameter of fruit anthracnose and ring rot
编号
Number
品种名称
Cultivar name
炭疽病病斑直径/cm
Lesion diameter of fruit anthracnose
轮纹病病斑直径/cm
Lesion diameter of ring rot
总酚含量
/Ag1FW
Total phenols content
石细胞含量/g100g1FW
Stone cell content
木质素含量/A10g1FW
Lignin content
1
早蜜
3.218
5.678
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