辣椒幼苗对不同育苗基质的形态和生理响应
目 录
1 引言1
1.1 微生物肥料1
1.2 凹土及凹土复配剂1
1.3 试验目的2
2 材料和方法2
2.1 供试材料与地点2
2.2 试验设计2
2.3 测定指标与方法2
3 结果与分析3
3.1 不同育苗基质对辣椒幼苗株高的影响3
3.2 辣椒幼苗对不同育苗基质的生理响应5
结论17
致谢18
参考文献191 引言
辣椒又名番椒、海椒、秦椒、辣茄，属茄科一年生草本植物。辣椒现在是世界上三大蔬菜作物之一仅低于豆类、番茄。辣椒的种植遍及世界各地，中国、美国、印度等国家更是种植普遍。它在中国的种植量仅次于大白菜，是中国的第二大蔬菜作物。培育辣椒幼苗是使辣椒高产、高效栽培的关键技术之一。通过优质的育苗技术可以大大提高土地的利用率，节约辣椒的用种量，处理季节衔接和茬口安排问题，易于管理，从而节约劳动力。辣椒在栽培生产的过程中会收到很多环境的影响，特别是辣椒幼苗质量的好坏是果实品质低劣和产量高低十分重要的因素[1,2]。随着辣椒栽培面积的不断增长，穴盘育苗在生产中被广泛运用并逐渐取代传统育苗方式。穴盘育苗最关键的就是基质，通常基质具有质量轻、无病菌、含有多种植物必需元素、保水保肥性能强等特点。目前，辣椒等作物育苗发展技术的关键在于开发优质的育苗基质[3]。
1.1 微生物肥料
微生物肥料简称菌肥（也叫作接种剂，它的作用在于通过微生物的生命活动以及初、次生代谢产物提供给农作物有特定有益肥料效用的微生物活品)[4,5]。微生物的品种繁多、功能更是具有多种多样的功能，在农业方面的潜力巨大，可以用作科研和一些 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
病虫害的防治等。目前，微生物肥料在提高土壤肥力，减轻农作物对重金属、农药以及硝态氮等吸收，从而修复和改善土壤的方面的作用无可取代。同时，它还能够加快生活垃圾和农作物秸秆的腐熟进度，提高土地利用率，预防农作物病虫害的发生。并且它在提高农作物产品质量、保证食品安全等方面具有重要作用[6]。微生物生物量，是推动土壤进行营养转换和物质能量运输的关键作用力，又被称为原动力，它对调控土壤中养分和物质循环起着重要的作用[7]。
1.2 凹土及凹土复配剂
凹凸棒石粘土（简称凹土）是一种天然非金属（以凹土棒石为主要成分）粘土矿物[8]。凹凸棒石的主要成分是坡缕石，是一种层链状结构的含水铝镁硅酸盐矿物[9]，还共生有蒙脱石、蛋白石、海泡石等矿产物[10]。其晶体结构呈棒状、纤维状，层内贯穿孔道，表面凹凸相间布满沟槽，具有较大的比表面积大部分的阳离子、水分子和一定大小的有机分子均可直接被吸附进孔道中。因此，凹凸棒石具有良好的吸附作用、催化作用、流变性和耐热性等性质。在石油、化工、建材、医药、农业和环保领域应用十分广泛，被称作是“千用之土”[11,12]。21世纪以来，凹土常被用来进行土壤的修复与改良[13]。凹土复配剂指的是在凹土中添加腐植酸、活性炭、熟石灰、煤渣。目前，农业方面对腐植酸的研究开发利用较为广泛。多次实践表明，腐植酸对西红柿、棉花等作物在生长上具有一定的刺激作用。目前，腐植酸已成为叶面肥、调整剂及复配产品、抗旱剂的主要成分，在农业上应用广泛[14,15]。活性炭是一种黑色的固体,比表面积巨大，一般可达到500-1500m2/g，其表面具有各种各样的官能团。它的内部具有丰富的微孔结构[16]。因此活性炭能够起到较好的吸附育苗基质中的有机物的作用，为辣椒幼苗提供更多的营养。熟石灰可以破坏病菌的生活环境，煤渣可以提高育苗基质的通风透气性，利于辣椒幼苗根系的拓展生长。
1.3 本研究的目的
本文通过在基质中添加凹土、凹土复配剂及微生物微生物菌剂，研究了辣椒幼苗生长和生理指标的变化，以期为提高辣椒幼苗素质、缓解辣椒连作障碍提供理论依据，为推动辣椒产业的健康快速发展提供支持。
2 材料与方法
2.1 供试材料
辣椒品种为金泰红；凹土和凹土复配剂由实验室提供；微生物微生物菌剂（枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和侧孢短芽孢杆菌复配而成，载体为有机质，有效活菌数为200亿/g。）购自启明微生物公司；育苗基质购自淮安市农科院。
2.2 试验设计
试验于28号楼的玻璃温室中进行，辣椒育苗分别用凹土、凹土复配剂和微生物微生物菌剂进行改良，处理包括：凹土复配剂与基质比例为1：10、1：15、1：20；凹土与基质比例为1：15、1：20、1：25；微生物微生物菌剂与基质为1g/kg、5g/kg、10g/kg，以基质育苗为对照，采用穴盘育苗，每处理3盘。每盘播50粒种子，播种后覆土覆膜，浇透水保湿。每天观察，6-7叶期测定辣椒的株高和生理指标。
2.3 测定指标与方法参考文献按照指标分别标注
株高：株高采用直尺测量，隔十天测量一次，共3次。
根系活力：采用TTC法[17]、叶绿素含量：采用分光光度计法[17]，可溶性蛋白质含量：考马斯亮蓝法[17]，超氧化物歧化酶(SOD)活性：NBT法[17]，过氧化 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
物酶(POD)的活性：愈创木酚法[18]，过氧化氢酶(CAT)活性：紫外分光光度计法[18]，丙二醛(MDA)含量：硫代巴比妥酸法[18]，呼吸速率的测定：小篮子法-广口瓶法[18]，可溶性糖的测定：蒽酮比色法[18]。
氮素同化酶活性：
（1）粗酶液的制备
取0.5g叶片，加入2ml预冷的酶提取缓冲液（pH7.5的20mmol.L-1hepes-NaOH缓冲液，含0.5 mmol.L-1 β-硫基乙醇；5 mmol/L EDTA；2 mmol.L-1 MgCL2；0.5 mmol.L-1 PMSF；2.5 mmol.L-1 DTT；0.05% Triton-100；2%PVP），冰浴研磨，匀浆在4℃，12000 r/min，离心15 min，收集上清液。
（2）硝酸还原酶（NR）活性的测定
取酶粗提取液0.5 mL，加入pH7.5 0.1 mol/L 磷酸缓冲液 0.5 mL，1mg/mL NADH O.5 mL，1 mg/ml KNO3 1 mL，定容至10 mL。于28摄氏度预培养15 min后加入1%氨基苯磺酰胺5 mL，0.02%萘基乙烯二胺水溶液5 mL终止其反应。反应混合液在5000 r/min离心5 min后，在540 nm处测定吸光值，空白对照不加NADH，用0.1 mL水代替（以28℃下，每克鲜物质每小时催化生成的亚硝酸盐量为一个酶活力单位U）。
（3）谷氨酰胺合成酶（GS）活性的测定
取酶提取液1.2 mL，加入0.6 mL 0.25 mol/L咪唑-盐酸缓冲液（pH7.0），0.4 mL谷氨酸钠溶液（pH7.0），0.4 mL 30 mmol/L ATP-Na溶液（pH7.0），0.2 mL 0.6 mol/L羟胺，0.2 mL 0.5 mol/L MgSO4，反应液在37摄氏度水浴保温15 min后，加入0.8 mLFeCl3终止反应。混合液于4000 r/min离心15 min，上清液在540nm处测定吸光度。（GS活力=A/（w×t））
1 引言1
1.1 微生物肥料1
1.2 凹土及凹土复配剂1
1.3 试验目的2
2 材料和方法2
2.1 供试材料与地点2
2.2 试验设计2
2.3 测定指标与方法2
3 结果与分析3
3.1 不同育苗基质对辣椒幼苗株高的影响3
3.2 辣椒幼苗对不同育苗基质的生理响应5
结论17
致谢18
参考文献191 引言
辣椒又名番椒、海椒、秦椒、辣茄，属茄科一年生草本植物。辣椒现在是世界上三大蔬菜作物之一仅低于豆类、番茄。辣椒的种植遍及世界各地，中国、美国、印度等国家更是种植普遍。它在中国的种植量仅次于大白菜，是中国的第二大蔬菜作物。培育辣椒幼苗是使辣椒高产、高效栽培的关键技术之一。通过优质的育苗技术可以大大提高土地的利用率，节约辣椒的用种量，处理季节衔接和茬口安排问题，易于管理，从而节约劳动力。辣椒在栽培生产的过程中会收到很多环境的影响，特别是辣椒幼苗质量的好坏是果实品质低劣和产量高低十分重要的因素[1,2]。随着辣椒栽培面积的不断增长，穴盘育苗在生产中被广泛运用并逐渐取代传统育苗方式。穴盘育苗最关键的就是基质，通常基质具有质量轻、无病菌、含有多种植物必需元素、保水保肥性能强等特点。目前，辣椒等作物育苗发展技术的关键在于开发优质的育苗基质[3]。
1.1 微生物肥料
微生物肥料简称菌肥（也叫作接种剂，它的作用在于通过微生物的生命活动以及初、次生代谢产物提供给农作物有特定有益肥料效用的微生物活品)[4,5]。微生物的品种繁多、功能更是具有多种多样的功能，在农业方面的潜力巨大，可以用作科研和一些 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
病虫害的防治等。目前，微生物肥料在提高土壤肥力，减轻农作物对重金属、农药以及硝态氮等吸收，从而修复和改善土壤的方面的作用无可取代。同时，它还能够加快生活垃圾和农作物秸秆的腐熟进度，提高土地利用率，预防农作物病虫害的发生。并且它在提高农作物产品质量、保证食品安全等方面具有重要作用[6]。微生物生物量，是推动土壤进行营养转换和物质能量运输的关键作用力，又被称为原动力，它对调控土壤中养分和物质循环起着重要的作用[7]。
1.2 凹土及凹土复配剂
凹凸棒石粘土（简称凹土）是一种天然非金属（以凹土棒石为主要成分）粘土矿物[8]。凹凸棒石的主要成分是坡缕石，是一种层链状结构的含水铝镁硅酸盐矿物[9]，还共生有蒙脱石、蛋白石、海泡石等矿产物[10]。其晶体结构呈棒状、纤维状，层内贯穿孔道，表面凹凸相间布满沟槽，具有较大的比表面积大部分的阳离子、水分子和一定大小的有机分子均可直接被吸附进孔道中。因此，凹凸棒石具有良好的吸附作用、催化作用、流变性和耐热性等性质。在石油、化工、建材、医药、农业和环保领域应用十分广泛，被称作是“千用之土”[11,12]。21世纪以来，凹土常被用来进行土壤的修复与改良[13]。凹土复配剂指的是在凹土中添加腐植酸、活性炭、熟石灰、煤渣。目前，农业方面对腐植酸的研究开发利用较为广泛。多次实践表明，腐植酸对西红柿、棉花等作物在生长上具有一定的刺激作用。目前，腐植酸已成为叶面肥、调整剂及复配产品、抗旱剂的主要成分，在农业上应用广泛[14,15]。活性炭是一种黑色的固体,比表面积巨大，一般可达到500-1500m2/g，其表面具有各种各样的官能团。它的内部具有丰富的微孔结构[16]。因此活性炭能够起到较好的吸附育苗基质中的有机物的作用，为辣椒幼苗提供更多的营养。熟石灰可以破坏病菌的生活环境，煤渣可以提高育苗基质的通风透气性，利于辣椒幼苗根系的拓展生长。
1.3 本研究的目的
本文通过在基质中添加凹土、凹土复配剂及微生物微生物菌剂，研究了辣椒幼苗生长和生理指标的变化，以期为提高辣椒幼苗素质、缓解辣椒连作障碍提供理论依据，为推动辣椒产业的健康快速发展提供支持。
2 材料与方法
2.1 供试材料
辣椒品种为金泰红；凹土和凹土复配剂由实验室提供；微生物微生物菌剂（枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和侧孢短芽孢杆菌复配而成，载体为有机质，有效活菌数为200亿/g。）购自启明微生物公司；育苗基质购自淮安市农科院。
2.2 试验设计
试验于28号楼的玻璃温室中进行，辣椒育苗分别用凹土、凹土复配剂和微生物微生物菌剂进行改良，处理包括：凹土复配剂与基质比例为1：10、1：15、1：20；凹土与基质比例为1：15、1：20、1：25；微生物微生物菌剂与基质为1g/kg、5g/kg、10g/kg，以基质育苗为对照，采用穴盘育苗，每处理3盘。每盘播50粒种子，播种后覆土覆膜，浇透水保湿。每天观察，6-7叶期测定辣椒的株高和生理指标。
2.3 测定指标与方法参考文献按照指标分别标注
株高：株高采用直尺测量，隔十天测量一次，共3次。
根系活力：采用TTC法[17]、叶绿素含量：采用分光光度计法[17]，可溶性蛋白质含量：考马斯亮蓝法[17]，超氧化物歧化酶(SOD)活性：NBT法[17]，过氧化 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
物酶(POD)的活性：愈创木酚法[18]，过氧化氢酶(CAT)活性：紫外分光光度计法[18]，丙二醛(MDA)含量：硫代巴比妥酸法[18]，呼吸速率的测定：小篮子法-广口瓶法[18]，可溶性糖的测定：蒽酮比色法[18]。
氮素同化酶活性：
（1）粗酶液的制备
取0.5g叶片，加入2ml预冷的酶提取缓冲液（pH7.5的20mmol.L-1hepes-NaOH缓冲液，含0.5 mmol.L-1 β-硫基乙醇；5 mmol/L EDTA；2 mmol.L-1 MgCL2；0.5 mmol.L-1 PMSF；2.5 mmol.L-1 DTT；0.05% Triton-100；2%PVP），冰浴研磨，匀浆在4℃，12000 r/min，离心15 min，收集上清液。
（2）硝酸还原酶（NR）活性的测定
取酶粗提取液0.5 mL，加入pH7.5 0.1 mol/L 磷酸缓冲液 0.5 mL，1mg/mL NADH O.5 mL，1 mg/ml KNO3 1 mL，定容至10 mL。于28摄氏度预培养15 min后加入1%氨基苯磺酰胺5 mL，0.02%萘基乙烯二胺水溶液5 mL终止其反应。反应混合液在5000 r/min离心5 min后，在540 nm处测定吸光值，空白对照不加NADH，用0.1 mL水代替（以28℃下，每克鲜物质每小时催化生成的亚硝酸盐量为一个酶活力单位U）。
（3）谷氨酰胺合成酶（GS）活性的测定
取酶提取液1.2 mL，加入0.6 mL 0.25 mol/L咪唑-盐酸缓冲液（pH7.0），0.4 mL谷氨酸钠溶液（pH7.0），0.4 mL 30 mmol/L ATP-Na溶液（pH7.0），0.2 mL 0.6 mol/L羟胺，0.2 mL 0.5 mol/L MgSO4，反应液在37摄氏度水浴保温15 min后，加入0.8 mLFeCl3终止反应。混合液于4000 r/min离心15 min，上清液在540nm处测定吸光度。（GS活力=A/（w×t））
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