槐米中槲皮素的提取工艺优化
摘 要优化槐米中槲皮素的提取工艺，用紫外分光度法测定槐米中槲皮素的含量。采用乙醇加热回流提取法从槐米中提取槲皮素。通过正交试验优化实验条件、紫外分光度法测定槲皮素的含量。回流提取的最佳工艺条件为回流提取12倍80%乙醇120 min。以较高的提取率优化槲皮素的提取工艺具有重要意义，可为槐米的进一步开发利用提供一定的帮助。
目 录
1 绪论 1
1.1槐米简介 1
1.2槲皮素的药理作用 1
1.2.1 抗肿瘤作用 1
1.2.2治疗糖尿病 2
1.2.3 防治肺纤维化 3
1.2.4 抗氧化作用 3
1.2.5对心血管系统的影响 3
1.2.6抗炎作用 3
1.2.7抗血栓作用 4
1.2.8抗病毒作用 4
1.2.9止泻作用 4
1.2.10其他作用 5
2 实验部分 6
2.1仪器与材料 6
2.1.1仪器 6
2.1.2材料 6
2．2 方法与结果 6
2.2.1 测定波长的选择 6
2.2.2 精密度实验 6
2.2.3 重复性实验 6
2.2.4 稳定性实验 7
2.2.5 加样回收实验 7
2.2.6正交实验设计 8
2.2.7 标准品溶液的制备 8
2.2.8 样品中槲皮素的含量测定 9
2.3讨论 9
参考文献 10
致 谢 14
1 绪论
1.1 槐米简介
豆科槐(SophorajaponicaL)的花蕾或槐米，可用于出血、肝火炎、头痛、头晕、耳鸣、耳聋、眼红等[1]。槐米中黄酮类物质，像芦丁、槲皮素(Quercetin)等[23]。在它的结构中为3,3,4,5,7五羟基黄酮的槲皮素，花蕾，叶子和果子中部分有，生产用豆科槐的花蕾做药。黄酮类的醇代表了槲皮素的化合物，价值在药用方面很值得。槲皮素镇咳作用，具有减少血糖作用，同时还能减少血压、加强毛细血管阻力、减少毛细血管脆性、减少血脂 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
、防治肺纤维化、抗炎、对血栓抵抗等[4]。最近的研究表明槲皮素在预防癌症中起着重要作用。
1.2 槲皮素的药理作用
1.2.1 抗肿瘤作用
有研究表明，槲皮素一定的预防作用。在肿瘤患者，连续补充槲皮素，细胞内的主导物质抑制细胞转录和细胞外的血中血的蛋白降低[5]。槲皮素结合物可以很特别的与肿瘤靶的芳基烃(Arh)作用，降低细胞与瘤发生接触的关系，细胞中的表达调节阻止与肿瘤作用的信号的传导，从而预防癌症[6]。
用仪器在人体体外检查槲皮素对细胞中的物质的感知。用较高的显微镜观察在细胞中及其敏感细胞中的位置分布。结果表明，槲皮素对细胞的感应性大大增加，在细胞核中的分布被恢复到原来的地步，耐药性改变 [7]。
细胞凋亡是指个体发育过程中受基因调控的细胞自杀行为，调节发育在生物体中，维持内部环境的稳定，并由基因编码，是许多细胞从运动状态饱满到死亡过程。采用MTT比色法测定Hoechst33342/PI双导K562细胞Caspase3酶活性的变化。当槲皮素的浓度比较高时，槲皮素浓度分别为时，K562细胞生长受到明显抑制。当IC50为4×105 mol/L时，可观察到明显的核固缩作用，说明槲皮素通过诱导白血病细胞凋亡，从而发挥抗肿瘤作用 [8]。
采用化学法的细胞法、细胞检测法在中暑前、中暑后细胞内物质的表达和槲皮素对细胞中的感应物质的抑制作用，发现能诱导癌细胞中的致癌物质表达，能抑制人肝心痛细胞的表达，提示槲皮素可增加细胞感知力，抑制肝癌HepG2细胞HSP70的表达[9]。结果表明，槲皮素可抑制细胞增殖及细胞感知坏东西的能力，在小鼠Lewis肺癌中，Lewis肺病生长速度被改变，降低肺癌细胞在细胞中主导作用达，人肺腺癌和小鼠肺中生病物质的生长,肿瘤细胞和肺癌细胞都不同程度发生变化[10]。
1.2.2 治疗糖尿病
糖尿病大鼠细胞中含量、肾脏过滤的力度、大鼠排尿物质检测和排尿次数和正常大鼠较，都比较低。提示槲皮素对患病的人糖的含量抑制作用，在患病早期吃槲皮素可以改变不同程度的作用 [11]。
槲皮素对糖尿病大鼠组织细胞中产生的产物和含量的影响。肾藏中的小球细胞、管皮细胞和肾液细胞中物质含升高。再吃过槲皮素后，肾组织中有关糖尿病物质含量都在减少，而一些无关糖尿病的物质含量无改变，在细胞存在中的无明显变化。槲皮素引起细胞中物质下降是通过大鼠肾中一些物质的含量的降低[12]。
槲可预防佐糖大鼠腹低血糖，对患有糖尿病小鼠有作用，没吃东西的大鼠血糖减少时使用槲皮素可以作用。降糖作用强，但对血糖不会发生反应，槲皮素对血糖，有调节[1315]。此外，治疗后水平降低，槲皮素可降低体内胰岛素含量，变化胰岛素对大鼠作用。结果显示，通过不同的模型和实验，体内变化的糖尿病小鼠，体内细胞的不同变化，并计算百分比，对糖尿病小鼠治疗作用强。
1.2.3 防治肺纤维化
槲皮素在细胞增殖纤维化和细胞中不同物质蛋白的表达中，作用能力强，能防治肺纤维化，在大多数研究中槲皮素都被给予希望，在纤维化的预防和治疗中 [17]。
1.2.4 抗氧化作用
黄酮化合物中的槲皮素，在研究中，抗氧化被人们大多数重视，并且在不断的发现功能，分子结构中槲皮素的羟基很不一样[18,21]。抗氧化能力也被人们不断发现，而它的表现就是：(1)电子转移被强化，自由基活动被改变(活性氧比活性氮)；(2)金属离子聚合，如铁离子、铜离子；(3)在人体内化学酚被重新生长，从而保护维生素。其中电子转移，自由基作用都与它的化学结构有关。采用共振、化学、物理化学等多种方法对槲皮素的自由基的作用，自由基都能被消除[22]。有研究显示，对槲皮素小鼠肝内物质测量，发现大鼠酚物质的浓度变化，维生素都发生变化。
1.2.5 对心血管系统的影响
使用荧光检测素，对平滑细胞(ASMC)钙在高K+、肾上腺素、血液紧张刺激作用下的改变。与不同人的实验结果显示，槲皮素呈抑制高K+引起的浓度升高，槲皮素还抑制细胞和细胞受体诱导钙浓度的加多，导致血液中离子的变化，在不同人中的心血[23]。
目 录
1 绪论 1
1.1槐米简介 1
1.2槲皮素的药理作用 1
1.2.1 抗肿瘤作用 1
1.2.2治疗糖尿病 2
1.2.3 防治肺纤维化 3
1.2.4 抗氧化作用 3
1.2.5对心血管系统的影响 3
1.2.6抗炎作用 3
1.2.7抗血栓作用 4
1.2.8抗病毒作用 4
1.2.9止泻作用 4
1.2.10其他作用 5
2 实验部分 6
2.1仪器与材料 6
2.1.1仪器 6
2.1.2材料 6
2．2 方法与结果 6
2.2.1 测定波长的选择 6
2.2.2 精密度实验 6
2.2.3 重复性实验 6
2.2.4 稳定性实验 7
2.2.5 加样回收实验 7
2.2.6正交实验设计 8
2.2.7 标准品溶液的制备 8
2.2.8 样品中槲皮素的含量测定 9
2.3讨论 9
参考文献 10
致 谢 14
1 绪论
1.1 槐米简介
豆科槐(SophorajaponicaL)的花蕾或槐米，可用于出血、肝火炎、头痛、头晕、耳鸣、耳聋、眼红等[1]。槐米中黄酮类物质，像芦丁、槲皮素(Quercetin)等[23]。在它的结构中为3,3,4,5,7五羟基黄酮的槲皮素，花蕾，叶子和果子中部分有，生产用豆科槐的花蕾做药。黄酮类的醇代表了槲皮素的化合物，价值在药用方面很值得。槲皮素镇咳作用，具有减少血糖作用，同时还能减少血压、加强毛细血管阻力、减少毛细血管脆性、减少血脂 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
、防治肺纤维化、抗炎、对血栓抵抗等[4]。最近的研究表明槲皮素在预防癌症中起着重要作用。
1.2 槲皮素的药理作用
1.2.1 抗肿瘤作用
有研究表明，槲皮素一定的预防作用。在肿瘤患者，连续补充槲皮素，细胞内的主导物质抑制细胞转录和细胞外的血中血的蛋白降低[5]。槲皮素结合物可以很特别的与肿瘤靶的芳基烃(Arh)作用，降低细胞与瘤发生接触的关系，细胞中的表达调节阻止与肿瘤作用的信号的传导，从而预防癌症[6]。
用仪器在人体体外检查槲皮素对细胞中的物质的感知。用较高的显微镜观察在细胞中及其敏感细胞中的位置分布。结果表明，槲皮素对细胞的感应性大大增加，在细胞核中的分布被恢复到原来的地步，耐药性改变 [7]。
细胞凋亡是指个体发育过程中受基因调控的细胞自杀行为，调节发育在生物体中，维持内部环境的稳定，并由基因编码，是许多细胞从运动状态饱满到死亡过程。采用MTT比色法测定Hoechst33342/PI双导K562细胞Caspase3酶活性的变化。当槲皮素的浓度比较高时，槲皮素浓度分别为时，K562细胞生长受到明显抑制。当IC50为4×105 mol/L时，可观察到明显的核固缩作用，说明槲皮素通过诱导白血病细胞凋亡，从而发挥抗肿瘤作用 [8]。
采用化学法的细胞法、细胞检测法在中暑前、中暑后细胞内物质的表达和槲皮素对细胞中的感应物质的抑制作用，发现能诱导癌细胞中的致癌物质表达，能抑制人肝心痛细胞的表达，提示槲皮素可增加细胞感知力，抑制肝癌HepG2细胞HSP70的表达[9]。结果表明，槲皮素可抑制细胞增殖及细胞感知坏东西的能力，在小鼠Lewis肺癌中，Lewis肺病生长速度被改变，降低肺癌细胞在细胞中主导作用达，人肺腺癌和小鼠肺中生病物质的生长,肿瘤细胞和肺癌细胞都不同程度发生变化[10]。
1.2.2 治疗糖尿病
糖尿病大鼠细胞中含量、肾脏过滤的力度、大鼠排尿物质检测和排尿次数和正常大鼠较，都比较低。提示槲皮素对患病的人糖的含量抑制作用，在患病早期吃槲皮素可以改变不同程度的作用 [11]。
槲皮素对糖尿病大鼠组织细胞中产生的产物和含量的影响。肾藏中的小球细胞、管皮细胞和肾液细胞中物质含升高。再吃过槲皮素后，肾组织中有关糖尿病物质含量都在减少，而一些无关糖尿病的物质含量无改变，在细胞存在中的无明显变化。槲皮素引起细胞中物质下降是通过大鼠肾中一些物质的含量的降低[12]。
槲可预防佐糖大鼠腹低血糖，对患有糖尿病小鼠有作用，没吃东西的大鼠血糖减少时使用槲皮素可以作用。降糖作用强，但对血糖不会发生反应，槲皮素对血糖，有调节[1315]。此外，治疗后水平降低，槲皮素可降低体内胰岛素含量，变化胰岛素对大鼠作用。结果显示，通过不同的模型和实验，体内变化的糖尿病小鼠，体内细胞的不同变化，并计算百分比，对糖尿病小鼠治疗作用强。
1.2.3 防治肺纤维化
槲皮素在细胞增殖纤维化和细胞中不同物质蛋白的表达中，作用能力强，能防治肺纤维化，在大多数研究中槲皮素都被给予希望，在纤维化的预防和治疗中 [17]。
1.2.4 抗氧化作用
黄酮化合物中的槲皮素，在研究中，抗氧化被人们大多数重视，并且在不断的发现功能，分子结构中槲皮素的羟基很不一样[18,21]。抗氧化能力也被人们不断发现，而它的表现就是：(1)电子转移被强化，自由基活动被改变(活性氧比活性氮)；(2)金属离子聚合，如铁离子、铜离子；(3)在人体内化学酚被重新生长，从而保护维生素。其中电子转移，自由基作用都与它的化学结构有关。采用共振、化学、物理化学等多种方法对槲皮素的自由基的作用，自由基都能被消除[22]。有研究显示，对槲皮素小鼠肝内物质测量，发现大鼠酚物质的浓度变化，维生素都发生变化。
1.2.5 对心血管系统的影响
使用荧光检测素，对平滑细胞(ASMC)钙在高K+、肾上腺素、血液紧张刺激作用下的改变。与不同人的实验结果显示，槲皮素呈抑制高K+引起的浓度升高，槲皮素还抑制细胞和细胞受体诱导钙浓度的加多，导致血液中离子的变化，在不同人中的心血[23]。
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