川芎及其不同炮制品中阿魏酸在四物汤中初步规律研究
目的 探究川芎不同炮制品在不同古方配伍四物汤中阿魏酸的溶出规律。方法 将当归与川芎按照四种不同的比例配伍、及对应配伍比例的四物汤全方,采用煎煮法、高效液相色谱法测定其中的阿魏酸含量。结果 从配伍角度看,当归川芎=54比例配伍时川芎、炒川芎阿魏酸煎出率最高、当归川芎=1 2时三种川芎炮制品中阿魏酸均有明显减溶趋势。在川芎炮制品中,生川芎阿魏酸含量最高,酒川芎含量最低。在四物汤全方中,白芍当归熟地川芎3264对阿魏酸具有明显增溶作用,其余配伍均为减溶作用。结论 在川芎和当归合煎中,阿魏酸含量变化受当归所占比重影响密切;在全方中,阿魏酸的含量变化,与白芍和地黄配伍比例有密切关系。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言 1
1.材料与方法 2
1.1 仪器 2
1.2 试剂 2
1.3 实验材料 2
1.4 方法 2
1.4.3 对照品溶液的制备 3
1.4.4 供试品溶液的制备及测定 3
1.4.5 线性关系 3
1.4.6 精密度试验 3
1.4.7 稳定性试验 4
1.4.8 重复性试验 4
1.4.9 回收率试验 4
2 结果与分析 4
2.1 三种川芎炮制品生川芎、炒川芎、酒川芎中阿魏酸煎出率变化规律 4
2.2 三种川芎炮制品在对四物汤全方中阿魏酸溶出率的影响 4
2.3 当归和不同川芎炮制品在不同配伍比例阿魏酸煎出量对比 4
2.4 当归和川芎不同配伍比例合煎与全方相应配伍比例合煎阿魏酸煎出量对比 5
2.5 不同全方配伍比例阿魏酸煎出量变化规律 5
3 讨论 6
3.1 其他组分选择依据 6
3.2 川芎炮制品的选择依据 6
3.3 三种川芎炮制品中阿魏酸煎出率变化规律 7
3.4 川芎不同炮制品对四物汤全方阿魏酸溶出率的影响 7
3.5 当归和不同川芎炮制品在不同配 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ¥351916072¥
伍比例阿魏酸煎出量对比 7
3.6 不同配伍比例全方中阿魏酸煎出量变化规律 7
3.7 全方配伍对川芎中阿魏酸煎出率作用的探究 8
致谢 8
参考文献 8
川芎及其不同炮制品中阿魏酸在四物汤中初步规律研究
引言
四物汤最早出现记载于唐朝蔺道人的《仙授理伤续断秘方》,此后载于《太平惠民合剂局方》,是从《金匮要略》中的芎归胶艾汤减去阿胶、艾叶、甘草而成,是补血调经的经典方剂。
四物汤具有诸多不同配伍比例的类方,例如《千金翼方》、《普济方》等,其中应用最广泛的为《太平惠民合剂局方》,当归、川芎、白芍、熟地四味药材依5:4:6:6的比例配伍。
现代证明,四物汤具有免疫刺激、清除自由基、抑制血栓形成、增加心肌收缩能力、泵血能力等功能[1]。在全方中,川芎中含有的主要化学成分有苯酞类、萜烯类、有机酸及其酯、生物碱、多糖等,而川芎中的生物碱成分主要有川芎嗪、三甲胺、腺嘌呤、胆碱、尿嘧啶[2]。其主要成分阿魏酸具有抑制血小板聚集、促进血小板解聚、抗血栓形成、解除血管平滑肌痉挛、增强免疫及抗氧化等作用[3],也是当归中的主要成分之一。符合四物汤中活血药理作用,是四物汤的指标成分之一[4]。
有文献研究表明白芍和川芎、当归合煎对阿魏酸有明显减容作用,但此结论并未在全方中证明,四物汤中其他组分对阿魏酸含量的影响并不明显。因此本课题通过对比川芎单煎、川芎与当归合煎以及四物汤全方合煎中阿魏酸含量的变化规律,探究当归配伍川芎对共有成分阿魏酸是否具有相互作用;其次对比三种川芎炮制品,探究炮制对阿魏酸的影响规律。使四物汤中主要指标性成分阿魏酸的变化规律更加清楚,更加深入的了解当归、川芎与全方之间的相互作用,完善阿魏酸在四物汤的溶出规律变化特征,为进一步研究四物汤的成分以及药效作用打下基础。
1.材料与方法
1.1 仪器
LC20AT高效液相色谱系统仪(日本岛津科技有限公司,手动进样阀门,SPD20A紫外可见光检测器)、FA1104电子分析天平、水浴锅、移液枪、滤头(0.45 μm)、一次性注射器、实验室玻璃仪器。
1.2 试剂
甲醇(色谱纯)、超纯水(自制)、冰醋酸(分析纯)、阿魏酸(纯度98%,批号B20007,上海源叶生物科技有限公司)、食用黄酒(浙江圣塔绍兴酒有限公司 GB/T330615040016,13%vol)。
1.3 实验材料
1.4 方法
1.4.1 炮制方法
炒川芎:取大小均匀的生川芎片200g,置于热锅内,文火加热,不断翻炒,至药物表面呈黄色,取出,放凉;酒川芎:取大小均匀的生川芎片200g,加入黄酒20g,闷润1h,至酒被吸尽,炒至微黄或色泽加深,取出,放凉。[5]
1.4.2 色谱条件
色谱柱:汉邦C18﹙4.6×250 mm,5 μm﹚;流动相:甲醇1%醋酸溶液﹙30∶70﹚;流速:1 mLmin﹣1;检测波长:321 nm;进样量5 μL;柱温:25 ℃。阿魏酸对照品以及供试品色谱图如图 1。
A.对照品色谱 B.供试品色谱
图 1 阿魏酸测定的HPLC图
1.4.3 对照品溶液的制备
精确称量阿魏酸标准品,精密称定0.0001g,置于烧杯中,加70%甲醇,溶解至50 mL容量瓶中,并定容至刻度线,配置成浓度为0.020 mgmL﹣1 的阿魏酸对照品溶液。
1.4.4 供试品溶液的制备及测定
按表1比例,称取饮片,加8倍体积水,浸泡30 min,煮沸后,保持微沸,每次煎煮1h,共煎煮两次,过滤,挤压并洗涤药渣,合并滤液定容至20倍量,静制,离心。使用高效液相色谱仪进行测定阿魏酸:从同一份煎煮液中取样4 mL,共6份,分别进行测定,每次进样5μL,记录阿魏酸峰面积,并进行数据分析,得出阿魏酸含量。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言 1
1.材料与方法 2
1.1 仪器 2
1.2 试剂 2
1.3 实验材料 2
1.4 方法 2
1.4.3 对照品溶液的制备 3
1.4.4 供试品溶液的制备及测定 3
1.4.5 线性关系 3
1.4.6 精密度试验 3
1.4.7 稳定性试验 4
1.4.8 重复性试验 4
1.4.9 回收率试验 4
2 结果与分析 4
2.1 三种川芎炮制品生川芎、炒川芎、酒川芎中阿魏酸煎出率变化规律 4
2.2 三种川芎炮制品在对四物汤全方中阿魏酸溶出率的影响 4
2.3 当归和不同川芎炮制品在不同配伍比例阿魏酸煎出量对比 4
2.4 当归和川芎不同配伍比例合煎与全方相应配伍比例合煎阿魏酸煎出量对比 5
2.5 不同全方配伍比例阿魏酸煎出量变化规律 5
3 讨论 6
3.1 其他组分选择依据 6
3.2 川芎炮制品的选择依据 6
3.3 三种川芎炮制品中阿魏酸煎出率变化规律 7
3.4 川芎不同炮制品对四物汤全方阿魏酸溶出率的影响 7
3.5 当归和不同川芎炮制品在不同配 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ¥351916072¥
伍比例阿魏酸煎出量对比 7
3.6 不同配伍比例全方中阿魏酸煎出量变化规律 7
3.7 全方配伍对川芎中阿魏酸煎出率作用的探究 8
致谢 8
参考文献 8
川芎及其不同炮制品中阿魏酸在四物汤中初步规律研究
引言
四物汤最早出现记载于唐朝蔺道人的《仙授理伤续断秘方》,此后载于《太平惠民合剂局方》,是从《金匮要略》中的芎归胶艾汤减去阿胶、艾叶、甘草而成,是补血调经的经典方剂。
四物汤具有诸多不同配伍比例的类方,例如《千金翼方》、《普济方》等,其中应用最广泛的为《太平惠民合剂局方》,当归、川芎、白芍、熟地四味药材依5:4:6:6的比例配伍。
现代证明,四物汤具有免疫刺激、清除自由基、抑制血栓形成、增加心肌收缩能力、泵血能力等功能[1]。在全方中,川芎中含有的主要化学成分有苯酞类、萜烯类、有机酸及其酯、生物碱、多糖等,而川芎中的生物碱成分主要有川芎嗪、三甲胺、腺嘌呤、胆碱、尿嘧啶[2]。其主要成分阿魏酸具有抑制血小板聚集、促进血小板解聚、抗血栓形成、解除血管平滑肌痉挛、增强免疫及抗氧化等作用[3],也是当归中的主要成分之一。符合四物汤中活血药理作用,是四物汤的指标成分之一[4]。
有文献研究表明白芍和川芎、当归合煎对阿魏酸有明显减容作用,但此结论并未在全方中证明,四物汤中其他组分对阿魏酸含量的影响并不明显。因此本课题通过对比川芎单煎、川芎与当归合煎以及四物汤全方合煎中阿魏酸含量的变化规律,探究当归配伍川芎对共有成分阿魏酸是否具有相互作用;其次对比三种川芎炮制品,探究炮制对阿魏酸的影响规律。使四物汤中主要指标性成分阿魏酸的变化规律更加清楚,更加深入的了解当归、川芎与全方之间的相互作用,完善阿魏酸在四物汤的溶出规律变化特征,为进一步研究四物汤的成分以及药效作用打下基础。
1.材料与方法
1.1 仪器
LC20AT高效液相色谱系统仪(日本岛津科技有限公司,手动进样阀门,SPD20A紫外可见光检测器)、FA1104电子分析天平、水浴锅、移液枪、滤头(0.45 μm)、一次性注射器、实验室玻璃仪器。
1.2 试剂
甲醇(色谱纯)、超纯水(自制)、冰醋酸(分析纯)、阿魏酸(纯度98%,批号B20007,上海源叶生物科技有限公司)、食用黄酒(浙江圣塔绍兴酒有限公司 GB/T330615040016,13%vol)。
1.3 实验材料
1.4 方法
1.4.1 炮制方法
炒川芎:取大小均匀的生川芎片200g,置于热锅内,文火加热,不断翻炒,至药物表面呈黄色,取出,放凉;酒川芎:取大小均匀的生川芎片200g,加入黄酒20g,闷润1h,至酒被吸尽,炒至微黄或色泽加深,取出,放凉。[5]
1.4.2 色谱条件
色谱柱:汉邦C18﹙4.6×250 mm,5 μm﹚;流动相:甲醇1%醋酸溶液﹙30∶70﹚;流速:1 mLmin﹣1;检测波长:321 nm;进样量5 μL;柱温:25 ℃。阿魏酸对照品以及供试品色谱图如图 1。
A.对照品色谱 B.供试品色谱
图 1 阿魏酸测定的HPLC图
1.4.3 对照品溶液的制备
精确称量阿魏酸标准品,精密称定0.0001g,置于烧杯中,加70%甲醇,溶解至50 mL容量瓶中,并定容至刻度线,配置成浓度为0.020 mgmL﹣1 的阿魏酸对照品溶液。
1.4.4 供试品溶液的制备及测定
按表1比例,称取饮片,加8倍体积水,浸泡30 min,煮沸后,保持微沸,每次煎煮1h,共煎煮两次,过滤,挤压并洗涤药渣,合并滤液定容至20倍量,静制,离心。使用高效液相色谱仪进行测定阿魏酸:从同一份煎煮液中取样4 mL,共6份,分别进行测定,每次进样5μL,记录阿魏酸峰面积,并进行数据分析,得出阿魏酸含量。
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