养血柔肝汤对小鼠的微循环及抗疲劳作用(附件)
摘 要 研究养血柔肝汤对小鼠的微循环及抗疲劳作用，将150只小鼠随机分成24组，雄性小鼠为12组，雌性小鼠为12组，每12组分别为对照（2组），地西泮片(2组)，养血柔肝汤大剂量(2组)，中剂量（2组），小剂量（2组），扶正化瘀胶囊（2组）。对照组给予水，其他组给一定剂量的对应中药水溶液，所有小鼠均为每日给药一次，连续给药30天，养血柔肝汤中剂量和扶正化瘀胶囊对小鼠抗疲劳作用相对于养血柔肝汤大剂量、小剂量效果好。养血柔肝汤大剂量和小剂量相对于中剂量、扶正化瘀胶囊对小鼠抗疲劳有较好效果，养血柔肝汤中剂量和扶正化瘀胶囊虽然没有明显效果，但是相对于水对照组有抗疲劳的趋势。扶正化瘀胶囊和丹参注射液对小鼠微循环的改善比养血柔肝汤大剂量、中剂量作用明显，丹参注射液作用最强，养血柔肝汤小剂量虽然没有明显的效果，但是相对于水对照组，也是有改善的趋势。研究表明活血化瘀、补气健脾中药具有良好抗纤维化作用，养血柔肝汤具有活血化瘀、清热解毒、滋阴养肾、健脾利湿的功效。目 录
1 绪言
2实验材料
2.1实验动物 3
2.2实验条件 3
2.3主要药品与试剂 3
2.4仪器设备 3
3试验制剂
3.1实验药物的配制 5
3.2功能主治 5
3.3药物剂量的选择 5
3.4用法用量 5
4急性毒性实验：观察养血柔肝汤的急性毒性反应
4.1试验剂量的选择依据和实验结果的统计方法 7
4.2实验结果的统计方法 7
4.3动物急性毒性实验方法 7
5养血柔肝汤对小鼠增强抗疲劳作用
5.1小鼠游泳实验方法 9
5.2测小鼠YLS4C型转棒式疲劳仪的实验方法 10
5.3养血柔肝汤对小鼠微循环的改善作用 11
结论与讨论
参考文献
致谢
1 绪言
肝体阴而用阳，性刚而喜柔，肝之体以阴为养，以柔为生，在病理变化中常以阴亏血虚为多。肝体阴指肝藏血，以制约肝的阳气升腾，勿使过亢，主濡养头目及四肢；用阳指正常的肝气和肝阳是使肝脏升发和条畅的一种能力。肝脏以上
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式疲劳仪的实验方法 10
5.3养血柔肝汤对小鼠微循环的改善作用 11
结论与讨论
参考文献
致谢
1 绪言
肝体阴而用阳，性刚而喜柔，肝之体以阴为养，以柔为生，在病理变化中常以阴亏血虚为多。肝体阴指肝藏血，以制约肝的阳气升腾，勿使过亢，主濡养头目及四肢；用阳指正常的肝气和肝阳是使肝脏升发和条畅的一种能力。肝脏以上生理病理特点决定了柔肝法为中医肝病治疗中不可或缺的治法。人类肝纤维化的病理改变多数发展较为缓慢，从肝细胞的损伤、炎症、坏死、细胞外基质的异常增生和沉积，有的需要经过数月至数年之久，平均约35年的时间。由于肝脏具有很强的代偿功能，即使肝纤维化处于活动期，病人的临床表现也不典型;即使病人有症状，往往也缺乏特征性。许多患者是在体格检查或因其他疾病进行剖腹探查，甚至在尸体解剖时才被发现。
肝脏纤维化是由多种原因引起的以肝内结缔组织的异常增生为病理过程的慢性肝损者，是慢性肝病发展到肝硬化的必经过程。肝纤维化中医理论源流包括病名，病因，病机，证治，方药，流派等方面。由于肝纤维化的并发症只有在疾病的终末期才会发生，因此治疗的目标是减弱而不是消除肝脏对慢性损害的反应，抗纤维化治疗可以部分逆转或者减慢肝纤维化的进展。慢性乙型肝炎是我国的常见病，多发病。现有的研究已证实，在肝纤维化阶段肝脏的病变是可逆的，中医认为，慢性肝炎是由湿热疫毒之邪内侵机体引起的。外感毒邪，内因正虚，极易形成正邪相持或正虚邪恋之势，导致慢性化。湿热毒邪蕴伏日久，必然伤及脏腑气血，一方面出现湿热中阻，肝郁脾雍，脾失健运，从而导致脾气虚弱，肾气亏损之证；另一方面出现肝郁气滞，久病及血，淤血阻络，营血被伤之象。因此，湿热毒邪是脏腑导致肝病的启动因子，湿热有缠绵难怯之性，反复不逾，削弱正气，藏伏于脏腑血络之中，使气血失调，所以淤血阻络是慢性肝病的主要病理基础。一般认为，抗肝纤维化药物仅对肝纤维化3期以下者有效，如已达4期，则难以产生疗效，因抗肝纤维化药物对老化的胶原纤维无作用，因此必须予以早期治疗。如早期进行有效的治疗，可使肝纤维化完全逆转。肝纤维化治疗需持续多长时间尚不明确。由于肝纤维化是一个慢性过程，治疗或许需持续几年的时间，这一过程可以是间断性的。目前研究表明肝纤维化经治疗5年内可以产生明显的肝纤维化逆转。
成东生主任医师采用“养血柔肝法”治疗慢性病毒性肝炎肝纤维化的经验方“养血柔肝汤”进行改善肝功能、抗肝纤维化、改善睡眠、改善微循环及增强抗疲劳五方面的动物实验研究；运用循证医学技术，成东生主任医生临床采用“养血柔肝法”治疗慢性病毒性肝炎肝纤维化的临床病例300份，整理所收集病例制作数据库，在此基础上，进行数据挖掘，以表达症候、症状、处方、用药、药物剂量，从中找出内在规律。
养血柔肝汤由当归，熟地，川芎，白芍，木瓜，酸枣仁，柴胡，五味子，鸡血藤，鸡内金，阿胶，鳖甲组成，其功能为养血柔肝，软坚通络。主治慢性病毒性肝炎肝纤维化，中医辨证属肝血虚损，瘀血阻络证，症见身困乏力，口干不欲饮，头晕目眩，四肢麻木，二便调，失眠多梦，舌质暗红苔薄白或苔黄或少苔，脉细弦或脉细弦涩。
2实验材料
2.1实验动物
健康ICR小鼠150只，雌雄各半，体重1825g（购自第四军医大学医学院实验动物中心）；动物级别：SPF；动物许可证号：SCXK（陕）2012003。购入本实验室的动物适应性饲养七天，然后进行实验。
2.2实验条件
实验室温度：2024℃，相对湿度4565%，空调调温，自然光照，排气扇通风，每三天打扫鼠舍一次。食固体饲料，按标准配方由西安交通大学实验动物中心提供，自由饮水。
2.3主要药品与试剂
地西泮片：由山东信谊制药有限公司生产；国药准字：H37023039；生产批号：140604
扶正化瘀胶囊：由上海黄海制药有限公司生产；国药准字：Z20020073；生产批号：140320
丹参注射液：由北京第四制药厂生产；国药准字：Z32020678;生产批号：0807111
12味中药水提物，包括有当归，熟地，川芎，白芍，木瓜，酸枣仁，柴胡，五味子，鸡血藤，鸡内金，阿胶，鳖甲（药材均购于西安市药材市场，由陕西省中医院研究院中药研究所研究员张小丽鉴定及提取）。
2.4仪器设备
电子天平：型号，YP1202N；准度级别，Ⅲ；生产厂家，上海精密科学仪器有限公司
电子天平：型号，AL104；精确度，0.0001；生产厂家，瑞士MettlerToledo Group，各种手术器械，试管等。
YLS4C型转棒式疲劳仪:型号YLS4C；生产厂家，上海软隆科技发展有限公司。
微循环显微镜：型号，YY 00672007；生产厂家，北京劲松建达科技图书有限公司。
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1 绪言
2实验材料
2.1实验动物 3
2.2实验条件 3
2.3主要药品与试剂 3
2.4仪器设备 3
3试验制剂
3.1实验药物的配制 5
3.2功能主治 5
3.3药物剂量的选择 5
3.4用法用量 5
4急性毒性实验：观察养血柔肝汤的急性毒性反应
4.1试验剂量的选择依据和实验结果的统计方法 7
4.2实验结果的统计方法 7
4.3动物急性毒性实验方法 7
5养血柔肝汤对小鼠增强抗疲劳作用
5.1小鼠游泳实验方法 9
5.2测小鼠YLS4C型转棒式疲劳仪的实验方法 10
5.3养血柔肝汤对小鼠微循环的改善作用 11
结论与讨论
参考文献
致谢
1 绪言
肝体阴而用阳，性刚而喜柔，肝之体以阴为养，以柔为生，在病理变化中常以阴亏血虚为多。肝体阴指肝藏血，以制约肝的阳气升腾，勿使过亢，主濡养头目及四肢；用阳指正常的肝气和肝阳是使肝脏升发和条畅的一种能力。肝脏以上
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥3^5`1^9`1^6^0`7^2$
式疲劳仪的实验方法 10
5.3养血柔肝汤对小鼠微循环的改善作用 11
结论与讨论
参考文献
致谢
1 绪言
肝体阴而用阳，性刚而喜柔，肝之体以阴为养，以柔为生，在病理变化中常以阴亏血虚为多。肝体阴指肝藏血，以制约肝的阳气升腾，勿使过亢，主濡养头目及四肢；用阳指正常的肝气和肝阳是使肝脏升发和条畅的一种能力。肝脏以上生理病理特点决定了柔肝法为中医肝病治疗中不可或缺的治法。人类肝纤维化的病理改变多数发展较为缓慢，从肝细胞的损伤、炎症、坏死、细胞外基质的异常增生和沉积，有的需要经过数月至数年之久，平均约35年的时间。由于肝脏具有很强的代偿功能，即使肝纤维化处于活动期，病人的临床表现也不典型;即使病人有症状，往往也缺乏特征性。许多患者是在体格检查或因其他疾病进行剖腹探查，甚至在尸体解剖时才被发现。
肝脏纤维化是由多种原因引起的以肝内结缔组织的异常增生为病理过程的慢性肝损者，是慢性肝病发展到肝硬化的必经过程。肝纤维化中医理论源流包括病名，病因，病机，证治，方药，流派等方面。由于肝纤维化的并发症只有在疾病的终末期才会发生，因此治疗的目标是减弱而不是消除肝脏对慢性损害的反应，抗纤维化治疗可以部分逆转或者减慢肝纤维化的进展。慢性乙型肝炎是我国的常见病，多发病。现有的研究已证实，在肝纤维化阶段肝脏的病变是可逆的，中医认为，慢性肝炎是由湿热疫毒之邪内侵机体引起的。外感毒邪，内因正虚，极易形成正邪相持或正虚邪恋之势，导致慢性化。湿热毒邪蕴伏日久，必然伤及脏腑气血，一方面出现湿热中阻，肝郁脾雍，脾失健运，从而导致脾气虚弱，肾气亏损之证；另一方面出现肝郁气滞，久病及血，淤血阻络，营血被伤之象。因此，湿热毒邪是脏腑导致肝病的启动因子，湿热有缠绵难怯之性，反复不逾，削弱正气，藏伏于脏腑血络之中，使气血失调，所以淤血阻络是慢性肝病的主要病理基础。一般认为，抗肝纤维化药物仅对肝纤维化3期以下者有效，如已达4期，则难以产生疗效，因抗肝纤维化药物对老化的胶原纤维无作用，因此必须予以早期治疗。如早期进行有效的治疗，可使肝纤维化完全逆转。肝纤维化治疗需持续多长时间尚不明确。由于肝纤维化是一个慢性过程，治疗或许需持续几年的时间，这一过程可以是间断性的。目前研究表明肝纤维化经治疗5年内可以产生明显的肝纤维化逆转。
成东生主任医师采用“养血柔肝法”治疗慢性病毒性肝炎肝纤维化的经验方“养血柔肝汤”进行改善肝功能、抗肝纤维化、改善睡眠、改善微循环及增强抗疲劳五方面的动物实验研究；运用循证医学技术，成东生主任医生临床采用“养血柔肝法”治疗慢性病毒性肝炎肝纤维化的临床病例300份，整理所收集病例制作数据库，在此基础上，进行数据挖掘，以表达症候、症状、处方、用药、药物剂量，从中找出内在规律。
养血柔肝汤由当归，熟地，川芎，白芍，木瓜，酸枣仁，柴胡，五味子，鸡血藤，鸡内金，阿胶，鳖甲组成，其功能为养血柔肝，软坚通络。主治慢性病毒性肝炎肝纤维化，中医辨证属肝血虚损，瘀血阻络证，症见身困乏力，口干不欲饮，头晕目眩，四肢麻木，二便调，失眠多梦，舌质暗红苔薄白或苔黄或少苔，脉细弦或脉细弦涩。
2实验材料
2.1实验动物
健康ICR小鼠150只，雌雄各半，体重1825g（购自第四军医大学医学院实验动物中心）；动物级别：SPF；动物许可证号：SCXK（陕）2012003。购入本实验室的动物适应性饲养七天，然后进行实验。
2.2实验条件
实验室温度：2024℃，相对湿度4565%，空调调温，自然光照，排气扇通风，每三天打扫鼠舍一次。食固体饲料，按标准配方由西安交通大学实验动物中心提供，自由饮水。
2.3主要药品与试剂
地西泮片：由山东信谊制药有限公司生产；国药准字：H37023039；生产批号：140604
扶正化瘀胶囊：由上海黄海制药有限公司生产；国药准字：Z20020073；生产批号：140320
丹参注射液：由北京第四制药厂生产；国药准字：Z32020678;生产批号：0807111
12味中药水提物，包括有当归，熟地，川芎，白芍，木瓜，酸枣仁，柴胡，五味子，鸡血藤，鸡内金，阿胶，鳖甲（药材均购于西安市药材市场，由陕西省中医院研究院中药研究所研究员张小丽鉴定及提取）。
2.4仪器设备
电子天平：型号，YP1202N；准度级别，Ⅲ；生产厂家，上海精密科学仪器有限公司
电子天平：型号，AL104；精确度，0.0001；生产厂家，瑞士MettlerToledo Group，各种手术器械，试管等。
YLS4C型转棒式疲劳仪:型号YLS4C；生产厂家，上海软隆科技发展有限公司。
微循环显微镜：型号，YY 00672007；生产厂家，北京劲松建达科技图书有限公司。
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