薄荷挥发油的提取工艺以及抗菌作用研究
摘 要以江苏产地薄荷为研究对象，以挥发油的提取率为考察指标。采用水蒸气蒸馏法提取获得薄荷中的挥发性成分，以浸泡时间、提取时间、加水量为考察因素进行单因素提取实验确定最佳提取条件，得出最佳浸泡时间为1h，最佳提取时间为1.5h，最佳加水量为12倍，取其三个影响较大的数据来设计正交实验优选条件来确定最佳提取方案，所得最佳提取方案为浸泡1h、提取1.5h、加水12倍。在此提取方案的基础上展开体外抑菌实验，得出薄荷挥发油具有抑菌效果，并且主要抑菌活性物质存在于薄荷的挥发性成分之中，在不同温度下提取液的抑菌效果实验中确定随着温度的升高挥发油提取液的抑菌效果随之增强，并且实验确定薄荷挥发油对革兰阳性菌的抑菌作用比革兰阴性菌的抑菌作用更强，最低抑菌浓度为大肠杆菌60.0μL/mL，枯草芽孢杆菌20.0μL/mL，金黄色葡萄球菌30.0μL/mL。总结数据如上，以期为薄荷挥发油的进一步开发利用提供数据支撑。
目录
1 绪论 1
1.1 薄荷的简述 1
1.2 性状与鉴别 1
1.3 药理作用 2
1.4 重要挥发性成分 3
1.5 薄荷的发展现状与研究进展 3
1.6 本文研究的目的及意义 3
2 实验开展 5
2.1 试剂和器材 5
2.1.1药材 5
2.1.2试剂和仪器 5
2.2实验方法 5
2.2.1薄荷挥发油的量取 5
2.2.2单因素实验设计提取工艺 5
2.2.3正交试验 8
2.2.4正交试验结果及方差分析 8
2.3工艺验证实验 9
2.4结果与讨论 10
2.5抗菌作用 10
2.6实验材料与器材 10
2.6.1器材 10
2.6.2材料 10
2.7实验方法 11
2.7.1挥发油的提取 11
2.7.2制备不同温度下的薄荷浸提液 11
2.7.3抑菌活性的测定 11
2.8实验结果及分析 12
2.8.1不同温度下薄荷提取液的抗菌效果 12
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
2.8.2薄荷挥发油提取后水溶液的抑菌活性 13
2.8.3薄荷挥发油最低抑菌浓度 13
2.9结论与分析 14
3讨论 15
参考文献 16
致 谢 18
1 绪论
1.1 薄荷的简述
薄荷（Mentha canadaensis L），又名蕃荷菜、南薄荷、猫儿薄苛、野薄荷、升阳菜、蔢荷、薄苛、夜息花、仁丹草等。
该药材属于多年份的芳香草本植物，直立生长，最高可达80cm，最低为30cm，质量松脆，交易断裂。茎身为棱形状，可生多个分支，四周倒生少量柔毛或无毛，根部以及接近分节处柔毛密集。叶子生长呈相对单叶分布，叶子具有多种形态，如：披针形、椭圆形等；生长长度可达7㎝，宽度可达3㎝，叶子外缘较为尖锐，根部呈近圆形，边缘从根部起稀疏生长有粗大的锯齿并呈牙齿状，含有56对侧脉，颜色为绿色并且上深下浅，上下两面分布有柔毛和黄色腺鳞，犹以下面更为密集。腋间花生长近似为伞状，轮廓为圆球状，开花时花径约有18mm，且大小分布规律为越向上越小；有数枚小苞片呈线状披针形分布于总枝上，并且均具有缘毛分布与2mm以下，花柄长约2.5mm披有少量柔毛或无毛并且较细；花萼外层附有一层柔毛和腺磷，长度可达3mm，呈钟形管状，内有10脉5齿；花冠冠檐分裂为4份且上裂先端最大，其余三部分相等，其颜色为淡紫色至白色，内部有少量柔毛；雄蕊有4个一般会伸出花冠外有些也会存在于花冠内，有两个平行存在的药室；花柱能够长得超出雄蕊。有形状为卵球形的小坚果，长大约0.9㎜，宽大约0.6㎜，黄褐色或淡褐色，具小腺窝。花期79月，果期1011月。
本植物的鲜茎叶经蒸馏而得的挥发油、鲜茎叶的蒸馏液、全草中提炼出的结晶亦供要用[1416]。
1.2 性状与鉴别
茎长度可达40cm，最短为18cm，直径一般在0.2cm至0.4cm之间，形状为方柱形，分支对生；每节长度大约为25cm,棱角处分布有茸毛，颜色为紫棕色或淡绿色；质地松脆，横切面为白色，内部中空。叶子有短柄并且对向生长；完整叶片为披针形或椭圆形等，一般皱缩卷曲，长度可达7㎝，最短2cm,宽度最大3㎝，最小1cm，叶片外缘自基部以上稀松生长有粗大的锯齿且呈牙齿状，侧脉有5至6对；叶子两面均为绿色但上深下浅，两面均分布有柔软茸毛，但下面有一些腺鳞。花序为轮伞状生长在腋间，花萼与钟相像，并且有5个齿裂在先端，萼齿狭小，为三角状钻形，微被柔毛；花冠淡紫色。揉搓后有特殊清凉香气，味辛凉。
鉴别：
1.茎横切面上偶尔具有毛层覆盖，并含有表皮细胞1列，外层有一层角质层，向内可见后角细胞数十列，内层有数列间隙较大的薄壁细胞，四角可见有棱脊。内皮层有清晰的凯氏点在一列细胞上。有较发达的维管束在四角处，另有较多的小维管束生长在俩相邻的角间。四角处还有较发达的木质部并且由导管和木制薄壁细胞及木纤维组成；韧皮部多为环形并且较为狭窄。髓部常中空构成组织为薄壁细胞。茎部含有针簇状或扇形橙皮苷结晶。
粉碎后为颜色为绿色夹有淡黄。腺鳞头部常为皱缩状态，形状大致为圆球状，直径大致在6199um之间；柄单细胞非常小，根部四周放射性分布有10余个表皮细胞。小腺毛直径大约1526um,单细胞存活且形状为椭圆形；连接处有一两个细胞。非腺毛生长较为弯曲，完整细胞不多，一般为18个，有细密的疣状突起。橙皮苷结晶颜色多为淡黄色，形状不规则，在茎、叶片上下表皮细胞以及薄壁细胞中分布较多。叶片上下表皮细胞含有淡黄色的橙皮苷结晶、形状较弯曲。气孔较多，为直轴式。
将两滴硫酸和少量香草醛结晶加入到叶粉升华物中会显黄色至橙黄色，再加1滴水，变为紫红色
将5ml60℃的石油醚添加至0.5g的粉碎薄荷中，活塞密封好，摇晃五分钟混匀，静置30分钟，过滤，所得溶液为供试品。另外在配制每1ml含2mg石油醚的薄荷脑作为对照品。取前者溶液15ul，后者10ul，分别在同一个；以19：1的苯醋酸乙酯为展开剂的硅胶G薄板上点点，取出，晾干后，喷以2：8的香草醛硫酸乙醇混合溶液，浓度为2%，烘10分钟，烘烤温度为100℃。二者在色谱上同一位置显现同一种颜色[56]。
1.3 药理作用
少量薄荷能过够兴奋中枢神经系统，达到扩张毛细血管，产生发汗散热的目的；它的有效成分能够解除痉挛，用乙醇提取得来的产物能够抑制服用乙酰胆碱或者组胺导致的豚鼠回肠收缩；外用薄荷油外用能过达到清凉、止痒、消炎、止痛；皮下注射能够起到保肝的效果，降低丙氨酸氨基转移酶的活性；能够防止早孕并加强子宫的收缩力；能够抑制宫颈癌发生的产物为热水提取物；另外疏通气道的机制为分泌物比例减少，化解泡沫痰，增大有效通气腔道；同时具有抗炎、抗微生物、促进透皮吸收作用[18]。
目录
1 绪论 1
1.1 薄荷的简述 1
1.2 性状与鉴别 1
1.3 药理作用 2
1.4 重要挥发性成分 3
1.5 薄荷的发展现状与研究进展 3
1.6 本文研究的目的及意义 3
2 实验开展 5
2.1 试剂和器材 5
2.1.1药材 5
2.1.2试剂和仪器 5
2.2实验方法 5
2.2.1薄荷挥发油的量取 5
2.2.2单因素实验设计提取工艺 5
2.2.3正交试验 8
2.2.4正交试验结果及方差分析 8
2.3工艺验证实验 9
2.4结果与讨论 10
2.5抗菌作用 10
2.6实验材料与器材 10
2.6.1器材 10
2.6.2材料 10
2.7实验方法 11
2.7.1挥发油的提取 11
2.7.2制备不同温度下的薄荷浸提液 11
2.7.3抑菌活性的测定 11
2.8实验结果及分析 12
2.8.1不同温度下薄荷提取液的抗菌效果 12
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
2.8.2薄荷挥发油提取后水溶液的抑菌活性 13
2.8.3薄荷挥发油最低抑菌浓度 13
2.9结论与分析 14
3讨论 15
参考文献 16
致 谢 18
1 绪论
1.1 薄荷的简述
薄荷（Mentha canadaensis L），又名蕃荷菜、南薄荷、猫儿薄苛、野薄荷、升阳菜、蔢荷、薄苛、夜息花、仁丹草等。
该药材属于多年份的芳香草本植物，直立生长，最高可达80cm，最低为30cm，质量松脆，交易断裂。茎身为棱形状，可生多个分支，四周倒生少量柔毛或无毛，根部以及接近分节处柔毛密集。叶子生长呈相对单叶分布，叶子具有多种形态，如：披针形、椭圆形等；生长长度可达7㎝，宽度可达3㎝，叶子外缘较为尖锐，根部呈近圆形，边缘从根部起稀疏生长有粗大的锯齿并呈牙齿状，含有56对侧脉，颜色为绿色并且上深下浅，上下两面分布有柔毛和黄色腺鳞，犹以下面更为密集。腋间花生长近似为伞状，轮廓为圆球状，开花时花径约有18mm，且大小分布规律为越向上越小；有数枚小苞片呈线状披针形分布于总枝上，并且均具有缘毛分布与2mm以下，花柄长约2.5mm披有少量柔毛或无毛并且较细；花萼外层附有一层柔毛和腺磷，长度可达3mm，呈钟形管状，内有10脉5齿；花冠冠檐分裂为4份且上裂先端最大，其余三部分相等，其颜色为淡紫色至白色，内部有少量柔毛；雄蕊有4个一般会伸出花冠外有些也会存在于花冠内，有两个平行存在的药室；花柱能够长得超出雄蕊。有形状为卵球形的小坚果，长大约0.9㎜，宽大约0.6㎜，黄褐色或淡褐色，具小腺窝。花期79月，果期1011月。
本植物的鲜茎叶经蒸馏而得的挥发油、鲜茎叶的蒸馏液、全草中提炼出的结晶亦供要用[1416]。
1.2 性状与鉴别
茎长度可达40cm，最短为18cm，直径一般在0.2cm至0.4cm之间，形状为方柱形，分支对生；每节长度大约为25cm,棱角处分布有茸毛，颜色为紫棕色或淡绿色；质地松脆，横切面为白色，内部中空。叶子有短柄并且对向生长；完整叶片为披针形或椭圆形等，一般皱缩卷曲，长度可达7㎝，最短2cm,宽度最大3㎝，最小1cm，叶片外缘自基部以上稀松生长有粗大的锯齿且呈牙齿状，侧脉有5至6对；叶子两面均为绿色但上深下浅，两面均分布有柔软茸毛，但下面有一些腺鳞。花序为轮伞状生长在腋间，花萼与钟相像，并且有5个齿裂在先端，萼齿狭小，为三角状钻形，微被柔毛；花冠淡紫色。揉搓后有特殊清凉香气，味辛凉。
鉴别：
1.茎横切面上偶尔具有毛层覆盖，并含有表皮细胞1列，外层有一层角质层，向内可见后角细胞数十列，内层有数列间隙较大的薄壁细胞，四角可见有棱脊。内皮层有清晰的凯氏点在一列细胞上。有较发达的维管束在四角处，另有较多的小维管束生长在俩相邻的角间。四角处还有较发达的木质部并且由导管和木制薄壁细胞及木纤维组成；韧皮部多为环形并且较为狭窄。髓部常中空构成组织为薄壁细胞。茎部含有针簇状或扇形橙皮苷结晶。
粉碎后为颜色为绿色夹有淡黄。腺鳞头部常为皱缩状态，形状大致为圆球状，直径大致在6199um之间；柄单细胞非常小，根部四周放射性分布有10余个表皮细胞。小腺毛直径大约1526um,单细胞存活且形状为椭圆形；连接处有一两个细胞。非腺毛生长较为弯曲，完整细胞不多，一般为18个，有细密的疣状突起。橙皮苷结晶颜色多为淡黄色，形状不规则，在茎、叶片上下表皮细胞以及薄壁细胞中分布较多。叶片上下表皮细胞含有淡黄色的橙皮苷结晶、形状较弯曲。气孔较多，为直轴式。
将两滴硫酸和少量香草醛结晶加入到叶粉升华物中会显黄色至橙黄色，再加1滴水，变为紫红色
将5ml60℃的石油醚添加至0.5g的粉碎薄荷中，活塞密封好，摇晃五分钟混匀，静置30分钟，过滤，所得溶液为供试品。另外在配制每1ml含2mg石油醚的薄荷脑作为对照品。取前者溶液15ul，后者10ul，分别在同一个；以19：1的苯醋酸乙酯为展开剂的硅胶G薄板上点点，取出，晾干后，喷以2：8的香草醛硫酸乙醇混合溶液，浓度为2%，烘10分钟，烘烤温度为100℃。二者在色谱上同一位置显现同一种颜色[56]。
1.3 药理作用
少量薄荷能过够兴奋中枢神经系统，达到扩张毛细血管，产生发汗散热的目的；它的有效成分能够解除痉挛，用乙醇提取得来的产物能够抑制服用乙酰胆碱或者组胺导致的豚鼠回肠收缩；外用薄荷油外用能过达到清凉、止痒、消炎、止痛；皮下注射能够起到保肝的效果，降低丙氨酸氨基转移酶的活性；能够防止早孕并加强子宫的收缩力；能够抑制宫颈癌发生的产物为热水提取物；另外疏通气道的机制为分泌物比例减少，化解泡沫痰，增大有效通气腔道；同时具有抗炎、抗微生物、促进透皮吸收作用[18]。
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