挥发性有机物单体对灰葡萄孢菌的生长抑制作用研究

灰葡萄孢可引起多种果蔬采后灰霉病的发生,给生产带来巨大的经济损失,果蔬采后灰霉病的防治是目前亟待解决的问题。本实验采取了离体实验和在草莓果实上进行活体实验的方式,探究葡萄汁有孢汉逊酵母产生的挥发性有机物中的各种单体对于灰葡萄孢菌菌丝生长、孢子萌发和草莓贮藏品质的影响,意在寻找出对于灰葡萄孢有良好抑制作用的挥发性有机物单体。实验结果表明,离体实验中2-壬酮对菌丝生长和孢子萌发都有很强的抑制效果,活体实验中3-羟基己酸乙酯和辛酸乙酯都有较好的草莓贮藏保鲜效果且3-羟基己酸乙酯效果好于辛酸乙酯,为研制绿色有效的果蔬采后生防熏蒸剂提供理论依据。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言(或绪论)1
1 材料与方法2
1.1 实验材料 2
1.1.1 供试菌株2
1.1.2 供试果实2
1.1.3 试剂2
1.1.4 仪器设备2
1.2 实验方法 2
1.2.1 挥发性单体对灰葡萄孢菌生长的影响2
1.2.1.1 挥发性单体对灰葡萄孢菌菌丝生长能力的影响2
1.2.1.2 挥发性单体对灰葡萄孢菌孢子萌发能力的影响3
1.2.2 挥发性单体对草莓贮藏品质的影响3
1.2.3 测定指标3
2 结果与分析4
2.1 挥发性单体抑制灰葡萄孢菌生长4
2.1.1 挥发性单体对灰葡萄孢菌菌丝生长的抑制作用4
2.1.2 挥发性单体对灰葡萄孢菌孢子萌发的抑制作用7
2.2 挥发性单体影响草莓贮藏品质8
3 感悟 9
3.1 总结9
3.2 问题及解决措施9
致谢10
参考文献10
挥发性有机物单体对灰葡萄孢菌的生长抑制作用研究
引言
果蔬产品组织娇嫩,在采收和贮运过程中极易受到机械损伤和微生物的侵染,采后极易腐败变质,进而导致巨大的经济损失。其中灰葡萄孢(Botrytis cinerea)侵染导致的灰霉病是引发果蔬采后腐烂变质的主要原 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@ 
因之一。灰霉病是果蔬的一种常见病害,可侵染多达一千四百种植物,因此寻找高效的采后防腐保鲜技术就显得极为迫切。
目前对果蔬采后灰霉病的防治手段主要有物理防治[1]、化学防治[2]和生物防治[3]三个方面,其中生物防治因安全有效被广泛研究。生物防治的作用机制主要包括以下几个方面:1)营养和空间的竞争:竞争使病原菌没有合适的营养和生存空间进行孢子的萌发,抑制病原菌的生长,起到病害防治的效果[4]。2)重寄生作用:研究表明,部分生防菌在病原菌菌丝上附着定殖,形成对病原菌的直接寄生作用,同时并能分泌胞外水解酶(β1,3葡聚糖酶、几丁质酶等) ,分解病原菌的细胞壁或菌丝体,从而抑制病原菌的生长[5] 。3)诱导寄主产生抗病性:诱导抗性是指有些微生物可以诱导寄主植物产生防御反应,局部或整体获得针对灰霉病的抗性。4)分泌抗菌物质:大多数生防细菌和真菌都能产生抗菌物质[6]。5)产生挥发性有机化合物:生物本身产生或降解后释放的小分子天然挥发性有机物,能够抑制病原菌的生长,提高果蔬抗病性。
植物源[7]和微生物源[8]挥发性物质用于果蔬采后病害防控,因不与果蔬直接接触,安全有效,同重视人类身体健康、保护环境这一主流理念相吻合而成为研究的热点,然而挥发性有机物中何种挥发性有机物单体起主要抑制作用并未完全明晰。
本实验以葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)为拮抗酵母菌株,研究其产生的挥发性有机物各成分单体[9]对灰葡萄孢菌菌丝生长、孢子萌发以及染菌草莓贮藏品质的影响,从而探究单体对于灰葡萄孢菌的生长抑制作用,明晰挥发性有机物中对于灰霉病起防控作用的单体,为未来研制便捷绿色的果蔬采后熏蒸剂提供理论基础和技术支持。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 供试菌株:灰葡萄孢霉从草莓果实上分离纯化得到,保藏在4℃的PDA试管斜面上。使用前从斜面将病原菌接种到PDA平板上,23℃恒温培养7 d活化(PDA培养基配置:1 L培养基需土豆200 g、葡萄糖20 g、琼脂1520 g)。
1.1.2 供试果实:试验中选用无病虫害、无机械损伤、无腐烂、大小一致的八成熟草莓果实。
1.1.3 试剂: 挥发性有机物单体:乙酸乙酯、辛酸乙酯、正己酸、苯甲醇、肉桂酸乙酯、3羟基己酸乙酯、2壬酮、2甲基丁酸乙酯、3羟基丁酸乙酯、月桂酸(见表1);无水乙醇、无菌水。
表1 挥发性有机物单体
序号
化学名称
CAS号
1
乙酸乙酯
141786
2
辛酸乙酯
106321
3
正己酸
142621
4
苯甲醇
100516
5
肉桂酸乙酯
103366
6
3羟基己酸乙酯
2305251
7
2壬酮
821556
8
2甲基丁酸乙酯
7452791
9
3羟基丁酸乙酯
5405414
10
月桂酸
143077
1.1.4 仪器设备:低温冰箱、高压灭菌锅、烘箱、超净工作台、涡旋仪、恒温培养箱、光学显微镜、血球计数板、电子天平、高速冷冻离心机、恒温恒湿培养箱、手持糖量仪、便携式色差仪、质构分析仪等。
1.2 实验方法
1.2.1 挥发性单体对灰葡萄孢菌生长的影响
采取离体实验的方式,一方面探究挥发性单体对灰葡萄孢菌菌丝生长的影响,另一方面探究挥发性单体对于灰葡萄孢菌孢子萌发的影响,从而研究挥发性单体对灰葡萄孢菌生长的抑制作用。
1.2.1.1 挥发性单体对灰葡萄孢菌菌丝生长能力的影响

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