枸杞中原花青素的组成与含量分析
本试验以宁夏黑果枸杞干品（2015年产和2016年产）为原料，对黑果枸杞中的多酚、黄酮、原花青素、花青素进行含量测定。通过大孔树脂对原花青素粗提取物进行纯化制备大孔树脂纯化样品，并以维生素C作为阳性对照，以DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率、FRAP值、总还原力等指标对黑果枸杞原花青素粗提取物和AB-8纯化样品的抗氧化活性进行评价分析，结果表明2015年产和2016年产的宁夏黑果枸杞浸提液中的多酚、黄酮、原花青素、花青素含量均较为丰富，且2016年产黑果枸杞中各化学成分含量均高于2015年产黑果枸杞，差异明显。黑果枸杞原花青素粗提物经AS-8树脂纯化后，原花青素含量由7.6%上升到76.8%。原花青素粗提物和纯化物均具有良好的抗氧化活性，原花青素纯化样品浓度达到200 ug/mL时对DPPH自由基、ASTS自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别达到53.72%、95.36%和86.75%，抗氧化活性良好且各项抗氧化指标均高于原花青素粗提物，表明原花青素粗提物经过纯化后抗氧化活性得到提升，是潜在的具有良好抗氧化活性的天然植物成分。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料 3
1.1 原料 3
1.2 主要试剂3
1.3 主要仪器与设备3
2 实验方法3
2.1 多酚提取和含量测定方法3
2.2 黄酮提取和含量测定方法3
2.3 原花青素提取和含量测定方法4
2.4 花青素提取和含量测定方法4
2.5 大孔树脂纯化黑果枸杞原花青素4
2.5.1 大孔树脂的选择4
2.5.2黑果枸杞原花青素的纯化4
2.6 抗氧化实验方法 5
2.6.1 DPPH自由基5
2.6.2 ABTS自由基5
2.6.3 超氧阴离子自由基5
2.6.4 还原能力测定5
2.6.5 铁原子还原力（FRAP）测定5
3 结果与分析6
3.1 标准曲线绘制 6
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3.2 不同黑果枸杞中原花青素，多酚和黄酮的含量7
3.2.1 黑果枸杞中多酚含量7
3.2.2 黑果枸杞中黄酮含量7
3.2.3 黑果枸杞中原花青素含量7
3.2.4 黑果枸杞中花青素含量7
3.3 大孔树脂纯化黑果枸杞原花青素实验结果7
3.4 抗氧化实验结果8
3.4.1 DPPH自由基清除率实验结果8
3.4.2 ABTS自由基清除率实验结果8
3.4.3 超氧阴离子自由基清除率实验结果9
3.4.4 总还原力测定实验结果9
3.4.5 铁原子还原力（FRAP）测定实验结果10
4讨论10
致谢11
参考文献 11
枸杞中原花青素的组成与含量分析
引言
引言
黑果枸杞（Lycium ruthrnicum）为茄科枸杞属。在我国宁夏贺兰山、、内蒙古西部、陕西北部、甘肃、青海东部、新疆北部和西藏等地，黑果枸杞皆有零星分布。
黑果枸杞味甘、性平，富含蛋白质、枸杞多糖、氨基酸、维生素、矿物质、微量元素、生物碱等多种营养成分，还含有丰富的天然原花青素。与红枸杞相比，黑果枸杞的维生素、矿物质等营养成分含量更丰富，尤其是含有具有清除自由基、抗氧化功能的天然的花色甙素，其药用和保健价值远远高于普通红枸杞，因此被誉为“软黄金”，野生的“蓝色妖姬”。
黑果枸杞具有增强人体免疫力、延缓衰老；补肾益精、预防癌症；生津止渴、改善循环；补血安神、改善睡眠；润肺止咳、减缓晒老；明目等保健作用。
黑果枸杞因其营养价值和药用价值，备受青睐，现在已经受到越来越多的关注。
原花青素在弱酸环境下较稳定，对光热不稳定，易分解，宜避光、低温保存[1]。
原花青素(Proanthocyanidins，简称PC)是植物中广泛存在的一类由不同数量的单体黄烷3醇或黄烷3，4二醇缩合而成的聚多酚类物质,起初统称归于缩合鞣质或黄烷醇类。原花青素不仅具有多种生物活性作用，而且具有非常强的抗氧化活性和自由基清除能力，是一种高效、低毒且高生物利用度的天然物质。最简单的原花青素是儿茶素、表儿茶素或儿茶素与表儿茶素形成的二聚体。此外，还有三聚体、四聚体等直至十聚体。按聚合度的大小，通常将二~四聚体称为低聚体（ProcyanidolicOligomers，简称OPC），将五聚体以上的称为高聚体（Procyanidolic Polymers， 简称 PPC）。在各类原花青素中，对二聚体的研究最多，其分布也是最广的，是最重要的一类原花青素。二聚体中，因两个单体的构象或键合位置的不同，可有多种异构体，易分离鉴定的8种结构形式分别命名为B1～B8，其中，B1～B4 是由 C4～C8键合，B5～B8 是由C4～C6键合。三聚体中，也因组成的单体及其相连接碳原子位置的不同形成各种各样的结构并命名为C1、C2等，其中C1在自然界中分布最丰富[2]。
原花青素目前具有多中提取方法。水提取法、传统有机溶剂提取法、微波辅助提取法、超声辅助提取法、超临界萃取法、酶提取法等。本实验采用传统有机溶剂法提取，采用乙醇作为主要提取溶剂[3]。
目前，原花青素的含量测定方法也有很多。常用的测定方法有铁盐催化法、香草醛法、紫外分光光度法、Folin Ciocalteau 与 HPLC 结合法以及钼酸铵分光光度法。本实验采用香草醛法对黑果枸杞中的原花青素含量进行测定[5]。
原花青素具有良好的抗氧化性、清除自由基、抑制肿瘤、抗诱变、保护心血管等多种生物活性[6]。原花青素具有极强的抗氧化、消除自由基的作用，可有效消除超氧阴离子自由基和羟基自由基，也参与磷酸、花生四烯酸的代谢和蛋白质磷酸化，保护脂质不发生过氧化损伤；是强有力的金属螯合剂，可螯合金属离子，在体内形成惰性化合物；保护和稳定维生素C，有助于维生素C的吸收和利用。
原花青素含量作为衡量枸杞营养价值的指标之一。本文对不同黑果枸杞中多酚、黄酮、原花青素及花青素含量进行了测定和分析，并对黑果枸杞中原花青素的抗氧化性进行了研究和分析。
研究报道机体内少量的自由基可助于机体的传导信号并帮助机体更好的地域感染类物质的入侵，然而过量的自由基则会给机体带来损坏机体组织的负面作用，并且会引发一系列诸如癌症、糖尿病、动脉硬化等疾病。机体在衰老过程中，机体内如过氧化氢酶、超氧化物歧化酶等与清除自由基相关的酶活力衰退，造成自由基持续累积，导致机体氧化系统与抗氧化系统平衡被打破，机体抗氧化能力减弱，为此寻求具有降低机体自由基危害的抗氧化剂成为研究热点，当前市面上已有多种诸如TBHQ、BHT、BHA等人工合成的抗氧化剂,但已有报道显示此类抗氧化剂具有引发癌症、机体肝损伤等疾病的风险[15]，因而利用动植物、微生物等天然资源获取具有高效抗氧化能力的天然抗氧化剂一直是研究热点。黑果枸杞的成熟浆果中富含紫红色素，又属于珍稀的天然花色苷类色素资源，具有清除自由基、抗氧化的功能，是目前较为理想的天然抗氧化剂。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料 3
1.1 原料 3
1.2 主要试剂3
1.3 主要仪器与设备3
2 实验方法3
2.1 多酚提取和含量测定方法3
2.2 黄酮提取和含量测定方法3
2.3 原花青素提取和含量测定方法4
2.4 花青素提取和含量测定方法4
2.5 大孔树脂纯化黑果枸杞原花青素4
2.5.1 大孔树脂的选择4
2.5.2黑果枸杞原花青素的纯化4
2.6 抗氧化实验方法 5
2.6.1 DPPH自由基5
2.6.2 ABTS自由基5
2.6.3 超氧阴离子自由基5
2.6.4 还原能力测定5
2.6.5 铁原子还原力（FRAP）测定5
3 结果与分析6
3.1 标准曲线绘制 6
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3.2 不同黑果枸杞中原花青素，多酚和黄酮的含量7
3.2.1 黑果枸杞中多酚含量7
3.2.2 黑果枸杞中黄酮含量7
3.2.3 黑果枸杞中原花青素含量7
3.2.4 黑果枸杞中花青素含量7
3.3 大孔树脂纯化黑果枸杞原花青素实验结果7
3.4 抗氧化实验结果8
3.4.1 DPPH自由基清除率实验结果8
3.4.2 ABTS自由基清除率实验结果8
3.4.3 超氧阴离子自由基清除率实验结果9
3.4.4 总还原力测定实验结果9
3.4.5 铁原子还原力（FRAP）测定实验结果10
4讨论10
致谢11
参考文献 11
枸杞中原花青素的组成与含量分析
引言
引言
黑果枸杞（Lycium ruthrnicum）为茄科枸杞属。在我国宁夏贺兰山、、内蒙古西部、陕西北部、甘肃、青海东部、新疆北部和西藏等地，黑果枸杞皆有零星分布。
黑果枸杞味甘、性平，富含蛋白质、枸杞多糖、氨基酸、维生素、矿物质、微量元素、生物碱等多种营养成分，还含有丰富的天然原花青素。与红枸杞相比，黑果枸杞的维生素、矿物质等营养成分含量更丰富，尤其是含有具有清除自由基、抗氧化功能的天然的花色甙素，其药用和保健价值远远高于普通红枸杞，因此被誉为“软黄金”，野生的“蓝色妖姬”。
黑果枸杞具有增强人体免疫力、延缓衰老；补肾益精、预防癌症；生津止渴、改善循环；补血安神、改善睡眠；润肺止咳、减缓晒老；明目等保健作用。
黑果枸杞因其营养价值和药用价值，备受青睐，现在已经受到越来越多的关注。
原花青素在弱酸环境下较稳定，对光热不稳定，易分解，宜避光、低温保存[1]。
原花青素(Proanthocyanidins，简称PC)是植物中广泛存在的一类由不同数量的单体黄烷3醇或黄烷3，4二醇缩合而成的聚多酚类物质,起初统称归于缩合鞣质或黄烷醇类。原花青素不仅具有多种生物活性作用，而且具有非常强的抗氧化活性和自由基清除能力，是一种高效、低毒且高生物利用度的天然物质。最简单的原花青素是儿茶素、表儿茶素或儿茶素与表儿茶素形成的二聚体。此外，还有三聚体、四聚体等直至十聚体。按聚合度的大小，通常将二~四聚体称为低聚体（ProcyanidolicOligomers，简称OPC），将五聚体以上的称为高聚体（Procyanidolic Polymers， 简称 PPC）。在各类原花青素中，对二聚体的研究最多，其分布也是最广的，是最重要的一类原花青素。二聚体中，因两个单体的构象或键合位置的不同，可有多种异构体，易分离鉴定的8种结构形式分别命名为B1～B8，其中，B1～B4 是由 C4～C8键合，B5～B8 是由C4～C6键合。三聚体中，也因组成的单体及其相连接碳原子位置的不同形成各种各样的结构并命名为C1、C2等，其中C1在自然界中分布最丰富[2]。
原花青素目前具有多中提取方法。水提取法、传统有机溶剂提取法、微波辅助提取法、超声辅助提取法、超临界萃取法、酶提取法等。本实验采用传统有机溶剂法提取，采用乙醇作为主要提取溶剂[3]。
目前，原花青素的含量测定方法也有很多。常用的测定方法有铁盐催化法、香草醛法、紫外分光光度法、Folin Ciocalteau 与 HPLC 结合法以及钼酸铵分光光度法。本实验采用香草醛法对黑果枸杞中的原花青素含量进行测定[5]。
原花青素具有良好的抗氧化性、清除自由基、抑制肿瘤、抗诱变、保护心血管等多种生物活性[6]。原花青素具有极强的抗氧化、消除自由基的作用，可有效消除超氧阴离子自由基和羟基自由基，也参与磷酸、花生四烯酸的代谢和蛋白质磷酸化，保护脂质不发生过氧化损伤；是强有力的金属螯合剂，可螯合金属离子，在体内形成惰性化合物；保护和稳定维生素C，有助于维生素C的吸收和利用。
原花青素含量作为衡量枸杞营养价值的指标之一。本文对不同黑果枸杞中多酚、黄酮、原花青素及花青素含量进行了测定和分析，并对黑果枸杞中原花青素的抗氧化性进行了研究和分析。
研究报道机体内少量的自由基可助于机体的传导信号并帮助机体更好的地域感染类物质的入侵，然而过量的自由基则会给机体带来损坏机体组织的负面作用，并且会引发一系列诸如癌症、糖尿病、动脉硬化等疾病。机体在衰老过程中，机体内如过氧化氢酶、超氧化物歧化酶等与清除自由基相关的酶活力衰退，造成自由基持续累积，导致机体氧化系统与抗氧化系统平衡被打破，机体抗氧化能力减弱，为此寻求具有降低机体自由基危害的抗氧化剂成为研究热点，当前市面上已有多种诸如TBHQ、BHT、BHA等人工合成的抗氧化剂,但已有报道显示此类抗氧化剂具有引发癌症、机体肝损伤等疾病的风险[15]，因而利用动植物、微生物等天然资源获取具有高效抗氧化能力的天然抗氧化剂一直是研究热点。黑果枸杞的成熟浆果中富含紫红色素，又属于珍稀的天然花色苷类色素资源，具有清除自由基、抗氧化的功能，是目前较为理想的天然抗氧化剂。
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