河蚬抗氧化肽锌螯合物体外模拟胃肠消化稳定性研究【字数:9615】
目的通过将螯合得到的河蚬抗氧化肽-锌螯合物进行体外模拟胃肠模拟消化试验,研究河蚬抗氧化肽-锌螯合物体外抗氧化能力和稳定性。方法采用体外胃肠模拟消化试验,研究不同消化时间下DPPH自由基、ABTS自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基的清除能力,以及还原力的变化情况,并通过EDTA滴定法测锌离子的螯合率,探究河蚬抗氧化肽-锌螯合物的体外抗氧化性和稳定性。结果经过实验得出体外模拟消化后的河蚬抗氧化肽-锌螯合物对几种自由基的清除能力都有一定的提升。河蚬抗氧化肽-锌螯合物在胃消化90min与120min时分别有最大超氧阴离子自由基清除率30.66%和DPPH自由基清除率58.22%;在肠消化90min和120min时分别对羟基自由基与ABTS+自由基有最大清除能力,其清除率分别为55.19%、81.77%;在肠消化120min时有最高还原力0.528,与未消化前相比增加了0.103。且消化过程中锌螯合能力整体变化不大,只下降了1.58%,预测其结构稳定。结论河蚬抗氧化肽-锌螯合物在胃肠模拟消化过程中抗氧化性显著变化,能有效清除几种常见的自由基,稳定性较强,为探究河蚬抗氧化肽-锌螯合物的生物利用提供理论基础。
目 录
1.引言 1
1.1河蚬的资源以及利用现状 1
1.2抗氧化肽锌螯合物的研究现状 1
1.3抗氧化活性 2
1.4研究价值与意义 2
2.材料与设备 3
2.1 实验材料 3
2.1.1主要实验材料 3
2.1.2 实验试剂与药品 3
2.2 主要仪器设备 3
3.实验方法 4
3.1河蚬抗氧化肽锌螯合物的制备 4
3.1.1河蚬抗氧化肽的制备 4
3.1.2 河蚬抗氧化肽锌螯合物的制备 4
3.2 体外胃肠模拟消化试验 4
3.2.1 胃消化试验 4
3.2.2 肠消化试验 4
3.3河蚬抗氧化肽锌螯合物的体外稳定性研究 4
3.3.1 螯合率的测定 5
3.4 河蚬抗氧化肽锌螯合物体外抗氧化作用研究 5
3.4.1 DPPH自由基清除能力的测定方法 5 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ¥351916072¥
3.4.2 羟基自由基清除能力的测定方法 5
3.4.3 超氧阴离子自由基清除能力的测定方法 6
3.4.4 ABTS自由基清除能力的测定方法 6
3.4.5还原力的测定方法 6
4.实验结果与分析 7
4.1 河蚬抗氧化肽锌螯合物体外稳定性研究结果 7
4.2河蚬抗氧化肽锌螯合物体外抗氧化活性分析 7
4.2.1 DPPH自由基清除能力的变化 7
4.2.2 羟基自由基清除能力的变化 8
4.2.3 超氧阴离子自由基清除能力的变化 9
4.2.4 ABTS自由基清除能力的变化 10
4.2.5 还原力的变化 11
5.结论及展望 13
参考文献 15
致谢 17
1.引言
1.1 河蚬的资源以及利用现状
河蚬是一种对环境适应性强的双壳类水生动物。它常栖息于淡水湖泊、池塘以及江河之中,广泛分布在我国的内陆大小水域,天然资源丰富。河蚬三个月便可以达到性成熟,一年四季都可以繁殖,其生长速度快,繁衍的能力强,且成本价格也比较低[1]。而且河蚬的肉质鲜嫩,营养较为丰富,味道鲜美,蚬肉里含有丰富的金属元素和维生素等人体必需的营养成分,具有较高食用价值。河蚬除了鲜食外,也可以通过食品加工制作成帛蚬干或者罐头,也可以腌制成咸蚬,甚至可入药。
河蚬的分布广泛,养殖成本也低、产量较高,经济效益非常显著,普遍受到人们的喜爱。最近几年来,河蚬的出口量增加,日本和韩国每年都会向我国购买上万吨的鲜活河蚬,以用于醒酒和护肝药膳[2]。但目前我国对河蚬的利用率低,多用于食用,且河蚬壳可用于鱼类、禽类的饵料[3],并没有真正的体现出河蚬应有的应用价值。因此,开发河蚬的潜在利用价值具有一定的实际意义。
1.2抗氧化肽锌螯合物的研究现状
锌(Zn)是人体必需的微量元素之一,也是许多酶活性必需的组分和酶的激活剂,它能参与到各种代谢过程中,如碳水化合物、核酸和蛋白质的合成与分解。锌元素能促进机体的生长发育和组织再生,促进性器官与性机能的正常发育,另外在保护皮肤的健康、增强免疫力等方面也具有重要的作用。但是,因为人体对锌的吸收以及代谢会受到很多因素的影响,一般的补锌剂稳定性较差、肠道的吸收率低,所以目前寻找更有效的锌补充剂显得尤其重要。
据报道,抗氧化肽能够抑制体内脂氧合酶、血红蛋白和体外单线态氧催化的脂肪酸败作用。河蚬抗氧化肽锌螯合物是一种生物锌,它有更好的营养补充效果,这是因为抗氧化肽锌螯合物更接近于人体机体内锌元素的作用形式,这样的作用形式可以防止锌元素在机体内产生不溶性物质,而且可以通过肽的吸收途径来转运吸收,因此避免了抗氧化肽或者氨基酸之间的竞争,提高人体对锌元素的吸收。另外抗氧化肽具有较好的抗氧化性,能有效清除人体机体内的有害自由基,避免细胞损伤或者延缓老化。因此,河蚬抗氧化肽锌螯合物具有一定的研究价值意义。
目前,杨杰等人[4]通过研究发现,鱼蛋白小肽螯合锌具有非常明显的补锌效果与抗氧化效果,比同剂量的硫酸锌或者葡萄糖酸锌优异。M.Gelinsky[5]等人研究发现了谷胱甘肽、谷胱甘肽的衍生肽与Zn元素的配合方法,制成的多肽锌配合物满足了人体对谷胱甘肽的需求,也为机体补充了Zn元素。梁春辉等人[6]制备得到了牡蛎氨基酸螯合锌,研究了牡蛎氨基酸螯合锌的体外抗氧化能力,结果表明牡蛎氨基酸螯合锌具有良好的抗氧化能力。Jiang等[7]研究了酶解工艺对鲢鱼源多肽锌螯合物抑菌活性的影响,发现鲢鱼源肽锌螯合物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有一定抑制作用。胡小超等人[8]对细点圆趾蟹肉酶解肽螯合锌工艺进行了优化,结果表明了氨基酸和小肽的结合有促进锌吸收的作用,其原因是多肽与锌在小肠中形成可溶的肽锌鳌合物,在肠道中不会受到植酸等抗营养因子的影响,并能以氨基酸的吸收模式转运,从而提高锌的利用率。
1.3 抗氧化活性
抗氧化活性是抗氧化自由基的简称,而自由基是机体细胞在正常代谢过程中产生的游离基,是指化合物的分子在光热等外界条件下,共价键发生均裂而形成的具有不成对电子的原子或基团。这些年来,有医学研究和临床试验证明:人体细胞电子被抢夺会导致各种疾病的产生。自由基是一种缺乏电子的物质,它进入人体后会争夺电子,给细胞带来损伤或者病变。例如:被夺去电子的细胞蛋白会导致分子畸变而致癌,甚至基因突变,生成大量的癌细胞,最后出现癌症。
因此,清除人体内多余自由基能在一定程度上预防疾病,保护人体的身体健康。现在,研究自由基清除剂对人体的健康有重大意义,开发和利用高效无毒低成本的自由基清除剂已经成为了如今科学发展的趋势。?
目 录
1.引言 1
1.1河蚬的资源以及利用现状 1
1.2抗氧化肽锌螯合物的研究现状 1
1.3抗氧化活性 2
1.4研究价值与意义 2
2.材料与设备 3
2.1 实验材料 3
2.1.1主要实验材料 3
2.1.2 实验试剂与药品 3
2.2 主要仪器设备 3
3.实验方法 4
3.1河蚬抗氧化肽锌螯合物的制备 4
3.1.1河蚬抗氧化肽的制备 4
3.1.2 河蚬抗氧化肽锌螯合物的制备 4
3.2 体外胃肠模拟消化试验 4
3.2.1 胃消化试验 4
3.2.2 肠消化试验 4
3.3河蚬抗氧化肽锌螯合物的体外稳定性研究 4
3.3.1 螯合率的测定 5
3.4 河蚬抗氧化肽锌螯合物体外抗氧化作用研究 5
3.4.1 DPPH自由基清除能力的测定方法 5 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ¥351916072¥
3.4.2 羟基自由基清除能力的测定方法 5
3.4.3 超氧阴离子自由基清除能力的测定方法 6
3.4.4 ABTS自由基清除能力的测定方法 6
3.4.5还原力的测定方法 6
4.实验结果与分析 7
4.1 河蚬抗氧化肽锌螯合物体外稳定性研究结果 7
4.2河蚬抗氧化肽锌螯合物体外抗氧化活性分析 7
4.2.1 DPPH自由基清除能力的变化 7
4.2.2 羟基自由基清除能力的变化 8
4.2.3 超氧阴离子自由基清除能力的变化 9
4.2.4 ABTS自由基清除能力的变化 10
4.2.5 还原力的变化 11
5.结论及展望 13
参考文献 15
致谢 17
1.引言
1.1 河蚬的资源以及利用现状
河蚬是一种对环境适应性强的双壳类水生动物。它常栖息于淡水湖泊、池塘以及江河之中,广泛分布在我国的内陆大小水域,天然资源丰富。河蚬三个月便可以达到性成熟,一年四季都可以繁殖,其生长速度快,繁衍的能力强,且成本价格也比较低[1]。而且河蚬的肉质鲜嫩,营养较为丰富,味道鲜美,蚬肉里含有丰富的金属元素和维生素等人体必需的营养成分,具有较高食用价值。河蚬除了鲜食外,也可以通过食品加工制作成帛蚬干或者罐头,也可以腌制成咸蚬,甚至可入药。
河蚬的分布广泛,养殖成本也低、产量较高,经济效益非常显著,普遍受到人们的喜爱。最近几年来,河蚬的出口量增加,日本和韩国每年都会向我国购买上万吨的鲜活河蚬,以用于醒酒和护肝药膳[2]。但目前我国对河蚬的利用率低,多用于食用,且河蚬壳可用于鱼类、禽类的饵料[3],并没有真正的体现出河蚬应有的应用价值。因此,开发河蚬的潜在利用价值具有一定的实际意义。
1.2抗氧化肽锌螯合物的研究现状
锌(Zn)是人体必需的微量元素之一,也是许多酶活性必需的组分和酶的激活剂,它能参与到各种代谢过程中,如碳水化合物、核酸和蛋白质的合成与分解。锌元素能促进机体的生长发育和组织再生,促进性器官与性机能的正常发育,另外在保护皮肤的健康、增强免疫力等方面也具有重要的作用。但是,因为人体对锌的吸收以及代谢会受到很多因素的影响,一般的补锌剂稳定性较差、肠道的吸收率低,所以目前寻找更有效的锌补充剂显得尤其重要。
据报道,抗氧化肽能够抑制体内脂氧合酶、血红蛋白和体外单线态氧催化的脂肪酸败作用。河蚬抗氧化肽锌螯合物是一种生物锌,它有更好的营养补充效果,这是因为抗氧化肽锌螯合物更接近于人体机体内锌元素的作用形式,这样的作用形式可以防止锌元素在机体内产生不溶性物质,而且可以通过肽的吸收途径来转运吸收,因此避免了抗氧化肽或者氨基酸之间的竞争,提高人体对锌元素的吸收。另外抗氧化肽具有较好的抗氧化性,能有效清除人体机体内的有害自由基,避免细胞损伤或者延缓老化。因此,河蚬抗氧化肽锌螯合物具有一定的研究价值意义。
目前,杨杰等人[4]通过研究发现,鱼蛋白小肽螯合锌具有非常明显的补锌效果与抗氧化效果,比同剂量的硫酸锌或者葡萄糖酸锌优异。M.Gelinsky[5]等人研究发现了谷胱甘肽、谷胱甘肽的衍生肽与Zn元素的配合方法,制成的多肽锌配合物满足了人体对谷胱甘肽的需求,也为机体补充了Zn元素。梁春辉等人[6]制备得到了牡蛎氨基酸螯合锌,研究了牡蛎氨基酸螯合锌的体外抗氧化能力,结果表明牡蛎氨基酸螯合锌具有良好的抗氧化能力。Jiang等[7]研究了酶解工艺对鲢鱼源多肽锌螯合物抑菌活性的影响,发现鲢鱼源肽锌螯合物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有一定抑制作用。胡小超等人[8]对细点圆趾蟹肉酶解肽螯合锌工艺进行了优化,结果表明了氨基酸和小肽的结合有促进锌吸收的作用,其原因是多肽与锌在小肠中形成可溶的肽锌鳌合物,在肠道中不会受到植酸等抗营养因子的影响,并能以氨基酸的吸收模式转运,从而提高锌的利用率。
1.3 抗氧化活性
抗氧化活性是抗氧化自由基的简称,而自由基是机体细胞在正常代谢过程中产生的游离基,是指化合物的分子在光热等外界条件下,共价键发生均裂而形成的具有不成对电子的原子或基团。这些年来,有医学研究和临床试验证明:人体细胞电子被抢夺会导致各种疾病的产生。自由基是一种缺乏电子的物质,它进入人体后会争夺电子,给细胞带来损伤或者病变。例如:被夺去电子的细胞蛋白会导致分子畸变而致癌,甚至基因突变,生成大量的癌细胞,最后出现癌症。
因此,清除人体内多余自由基能在一定程度上预防疾病,保护人体的身体健康。现在,研究自由基清除剂对人体的健康有重大意义,开发和利用高效无毒低成本的自由基清除剂已经成为了如今科学发展的趋势。?
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