放线菌初步鉴定及其制备黄瓜种子包衣对发芽与抗病的影响
采用形态特征、培养特征观察、理化特征测定等方法对四株放线菌（编号分别为D4、D5、D6、B04）进行初步鉴定，并查阅Bergys细菌鉴定手册，初步鉴定四株放线菌均属于链霉菌属。取放线菌D4、D5做进一步研究，将其产生的分生孢子与成膜剂混合制成黄瓜种子包衣，研究不同的处理方法对黄瓜包衣种子发芽的影响，结果表明黄瓜包衣种子的平均发芽率、发芽指数、发芽百分率、平均出苗时间、出苗指数、出苗率以及幼苗性状等与未包衣种子均无显著差异。用黄瓜枯萎病菌感染D4包衣黄瓜种子与未包衣种子的幼苗，发现包衣种子幼苗比对照对黄瓜枯萎病菌具有更好的抗病效果。研究结果为植物连作病害生物防治提供了材料和依据。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言2
1材料与方法2
1.1材料 2
1.1.1放线菌菌株2
1.1.2黄瓜枯萎病原菌2
1.1.3培养基 2
1.1.4黄瓜枯萎病菌悬液2
1.1.5黄瓜种子2
1.2实验方法 2
1.2.1放线菌形态特征及培养特征观察2
1.2.2放线菌理化特征测定3
1.2.2.1明胶液化实验3
1.2.2.2淀粉水解3
1.2.2.3牛奶的凝固与胨化3
1.2.2.4硫化氢产生实验3
1.2.2.5纤维素利用实验3
1.2.3种子包衣成膜剂3
1.2.4种子处理3
1.2.4.1种子预处理3
1.2.4.2四种种子处理方法3
1.2.4.3发芽试验4
1.2.4.4黄瓜枯萎病防治4
1.2.5统计方法4
2结果与分析4
2.1放线菌形态特征4
2.2放线菌生理生化性质5
2.2.1明胶液化实验5
2.2.2淀粉水解实验5
2.2.3牛奶的凝固与胨化6
2.2.4硫化氢产生实验6
2.2.5纤维素利用实验6
2.3发芽实验结果6 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
2.4黄瓜枯萎病防治效果研究7
3 讨论8
致谢9
参考文献10
放线菌初步鉴定及其制备黄瓜种子包衣对
发芽与抗病的影响
（大学资源与环境科学学院，江苏 南京 210095）
引言
引言
黄瓜的营养价值高，富含纤维素、多种维生素和矿质元素，并具有抗肿瘤等食疗作用[1]，但黄瓜生长过程中会受到各种病害的侵染，影响黄瓜的品质和产量，其中，黄瓜枯萎病是一种危害严重的土传病害，采用化学农药防治效果不佳，且易造成环境污染、农药残留等问题。研究证明生防放线菌能修复作物连作障碍，促进作物生长[2]，因此，研究生防放线菌对黄瓜生长的效应以及对黄瓜栽培和病害防治具有重要意义。
放线菌是具有重大实用价值的一类微生物，目前从微生物中发现的大约8000种生物活性物质中，近70%是由放线菌产生的[3]。放线菌是抗生素等一些有较高价值的生理活性物质的产生菌, 在医药、农业等多方面有着广泛的应用, 但其发酵产物在复杂的多相系统中, 除了微量的抗生素和菌丝体外, 还有很多杂质, 杂质的含量为抗生素浓度的几十倍、几百倍甚至几千倍[4]。因此, 必须对发酵液进行预处理以除去杂质, 才能更好地对目的产物进行分离提取。在预处理结束后, 应对其理化特性进行初步推断, 在此基础上, 才能选择合适的分离方法纯化和精制, 然后进行结构测定。
近年来，利用生防放线菌防治黄瓜枯萎病已受到国内外有关学者的关注[5]。段春梅等[6]以黄瓜幼苗为试材，采用盆栽试验研究3种生防放线菌剂单接和与病原菌混接对黄瓜的促生作用，结果表明，施用放线菌剂能显著促进黄瓜生长，对根系生长及活力的促进作用尤为明显，并使黄瓜产生诱导抗性。
种子包衣技术是指通过机械或人工加工的手段, 根据不同需要给种子表面包上一层不同有效成分的种衣剂[7]。种衣在土中遇水只吸胀而不溶解, 由此达到既不影响种 子正常吸水发芽, 又能使药肥缓慢释放, 达到提高种子质量、防病治虫、促进幼苗生长的目的。种子包衣技术集优良品种、植保和土肥多学科技术为一体, 是近年来我国在农业部门重点推广的一项高新科技成果[8]。同时, 由于种子包衣剂用药少、毒性低、效率高等特点, 是实现我国资源节约型和环境友好型社会的有效途径。种子包衣可以部分消除( 或减少)种子带菌的问题, 不仅在苗期能起到一定的保护作用, 同时增强植株的抗逆性[9]；而且由于不同种子使用了不同颜色的包衣剂包衣, 使其不容易被模仿, 对于杜绝假冒产品侵权具有积极效果, 从而使种子生产商与蔬菜生产者的利益得到保护。（小四宋体）
1 材料与方法
.1 材料
1.1.1 放线菌菌株D4、D5、D6、B04,实验室保存。
1.1.2 黄瓜枯萎病原菌，实验室保存
1.1.3培养基
高氏一号培养基，培养基组分：可溶性淀粉20g、NaCl 0.5g、KNO3 1g?K2HPO43H2O 0.5g、MgSO4.7H2O?0.5g FeSO47H2O 0.01g、琼脂20g、H2O1000ml、pH7.2。
PDA培养基组分：马铃薯200g、蔗糖20g、H2O 1000mL.pH自然。
1.1.4 黄瓜枯萎病菌悬液
将黄瓜枯萎病菌接种于PDA液体培养基，170rmp30℃摇床震荡培养制得。
1.1.5黄瓜种子，江苏省农科院提供
1.2方法
1. 2. 1 放线菌形态特征及培养特征观察
用接种环分别取放线菌D4、D5、D6、B04的孢子在高氏一号平板上划线，将平板倒置于28℃培养5～7d，观察放线菌菌落的菌落形态。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言2
1材料与方法2
1.1材料 2
1.1.1放线菌菌株2
1.1.2黄瓜枯萎病原菌2
1.1.3培养基 2
1.1.4黄瓜枯萎病菌悬液2
1.1.5黄瓜种子2
1.2实验方法 2
1.2.1放线菌形态特征及培养特征观察2
1.2.2放线菌理化特征测定3
1.2.2.1明胶液化实验3
1.2.2.2淀粉水解3
1.2.2.3牛奶的凝固与胨化3
1.2.2.4硫化氢产生实验3
1.2.2.5纤维素利用实验3
1.2.3种子包衣成膜剂3
1.2.4种子处理3
1.2.4.1种子预处理3
1.2.4.2四种种子处理方法3
1.2.4.3发芽试验4
1.2.4.4黄瓜枯萎病防治4
1.2.5统计方法4
2结果与分析4
2.1放线菌形态特征4
2.2放线菌生理生化性质5
2.2.1明胶液化实验5
2.2.2淀粉水解实验5
2.2.3牛奶的凝固与胨化6
2.2.4硫化氢产生实验6
2.2.5纤维素利用实验6
2.3发芽实验结果6 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
2.4黄瓜枯萎病防治效果研究7
3 讨论8
致谢9
参考文献10
放线菌初步鉴定及其制备黄瓜种子包衣对
发芽与抗病的影响
（大学资源与环境科学学院，江苏 南京 210095）
引言
引言
黄瓜的营养价值高，富含纤维素、多种维生素和矿质元素，并具有抗肿瘤等食疗作用[1]，但黄瓜生长过程中会受到各种病害的侵染，影响黄瓜的品质和产量，其中，黄瓜枯萎病是一种危害严重的土传病害，采用化学农药防治效果不佳，且易造成环境污染、农药残留等问题。研究证明生防放线菌能修复作物连作障碍，促进作物生长[2]，因此，研究生防放线菌对黄瓜生长的效应以及对黄瓜栽培和病害防治具有重要意义。
放线菌是具有重大实用价值的一类微生物，目前从微生物中发现的大约8000种生物活性物质中，近70%是由放线菌产生的[3]。放线菌是抗生素等一些有较高价值的生理活性物质的产生菌, 在医药、农业等多方面有着广泛的应用, 但其发酵产物在复杂的多相系统中, 除了微量的抗生素和菌丝体外, 还有很多杂质, 杂质的含量为抗生素浓度的几十倍、几百倍甚至几千倍[4]。因此, 必须对发酵液进行预处理以除去杂质, 才能更好地对目的产物进行分离提取。在预处理结束后, 应对其理化特性进行初步推断, 在此基础上, 才能选择合适的分离方法纯化和精制, 然后进行结构测定。
近年来，利用生防放线菌防治黄瓜枯萎病已受到国内外有关学者的关注[5]。段春梅等[6]以黄瓜幼苗为试材，采用盆栽试验研究3种生防放线菌剂单接和与病原菌混接对黄瓜的促生作用，结果表明，施用放线菌剂能显著促进黄瓜生长，对根系生长及活力的促进作用尤为明显，并使黄瓜产生诱导抗性。
种子包衣技术是指通过机械或人工加工的手段, 根据不同需要给种子表面包上一层不同有效成分的种衣剂[7]。种衣在土中遇水只吸胀而不溶解, 由此达到既不影响种 子正常吸水发芽, 又能使药肥缓慢释放, 达到提高种子质量、防病治虫、促进幼苗生长的目的。种子包衣技术集优良品种、植保和土肥多学科技术为一体, 是近年来我国在农业部门重点推广的一项高新科技成果[8]。同时, 由于种子包衣剂用药少、毒性低、效率高等特点, 是实现我国资源节约型和环境友好型社会的有效途径。种子包衣可以部分消除( 或减少)种子带菌的问题, 不仅在苗期能起到一定的保护作用, 同时增强植株的抗逆性[9]；而且由于不同种子使用了不同颜色的包衣剂包衣, 使其不容易被模仿, 对于杜绝假冒产品侵权具有积极效果, 从而使种子生产商与蔬菜生产者的利益得到保护。（小四宋体）
1 材料与方法
.1 材料
1.1.1 放线菌菌株D4、D5、D6、B04,实验室保存。
1.1.2 黄瓜枯萎病原菌，实验室保存
1.1.3培养基
高氏一号培养基，培养基组分：可溶性淀粉20g、NaCl 0.5g、KNO3 1g?K2HPO43H2O 0.5g、MgSO4.7H2O?0.5g FeSO47H2O 0.01g、琼脂20g、H2O1000ml、pH7.2。
PDA培养基组分：马铃薯200g、蔗糖20g、H2O 1000mL.pH自然。
1.1.4 黄瓜枯萎病菌悬液
将黄瓜枯萎病菌接种于PDA液体培养基，170rmp30℃摇床震荡培养制得。
1.1.5黄瓜种子，江苏省农科院提供
1.2方法
1. 2. 1 放线菌形态特征及培养特征观察
用接种环分别取放线菌D4、D5、D6、B04的孢子在高氏一号平板上划线，将平板倒置于28℃培养5～7d，观察放线菌菌落的菌落形态。
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