盐胁迫对淡水螺旋藻形态和生理指标的影响
摘要：螺旋藻(Spirulina platensis)因具有重要的经济价值已经被成功开发并且大规模生产。但螺旋藻的大规模养殖还存在淡水和营养成分消耗等生产成本高的问题。通过对淡水螺旋藻进行盐逐级驯化、得到可以适应一定的盐度的藻种，对螺旋藻的大规模培养具有重要意义。本论文对实验室现有的钝顶螺旋藻种进行筛选，分离和纯化，选出了优势藻种。确定出螺旋藻实验室最适的生长条件为：初始pH为9.0~9.5，最佳的初始接种量为10%。进一步利用盐度逐级驯化的方法对优势藻种进行驯化，研究盐胁迫对螺旋藻的形态和生理指标的影响,以期为螺旋藻的海水培养和规模化生产提供指导。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）1
1材料与方法2
1.1材料 2
1.1.1实验藻种 2
1.1.2 培养基的组成 2
1.1.3仪器设备 2
1.2实验设计 3
1.2.1螺旋藻预实验逐级驯化3
1.2.2螺旋藻综合培养及指标测定3
1.2.2.1螺旋藻藻种的保存3
1.2.2.2螺旋藻藻种的培养3
1.3测定方法3
1.3.1螺旋藻干重的测定3
1.3.2螺旋藻多糖的测定3
1.3.2.1葡萄糖标准曲线的测定3
1.3.2.2可溶性多糖的测定4
1.3.3螺旋藻藻胆蛋白含量的测定4
1.3.4螺旋藻总脂的测定4
2结果与分析5
2.1盐胁迫对淡水螺旋藻生长、形态的影响5
2.2盐胁迫对淡水螺旋藻生物量的影响 7
2.2.1盐胁迫对藻干重的影响7
2.2.2盐胁迫对多糖的影响7
2.2.3盐胁迫对藻胆蛋白的影响8
2.2.4盐胁迫对总脂的影响9
3讨论 10
3.1盐胁迫对螺旋藻生长的影响 10
3.2盐胁迫对螺旋藻生物量的影响10
4结论 10
致谢10
参考文献11
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5^1^9^1^6^0^7^2^*
/> 盐胁迫对淡水螺旋藻形态和生理指标的影响
引言
引言 螺旋藻（Spirulina）因拥有极高的营养价值和化学组分已经被成功开发并实现商业化生产，是最重要的经济微藻之一[1]。螺旋藻的营养丰富, 其中富含多种蛋白质、维生素、微量元素以及对人体有多种特殊药效功能的活性物质等[2]。 但螺旋藻产率低、生产成本高, 难以广泛推广。目前通过对螺旋藻的培养条件优化如:通过对营养物质、温度、 pH 值、光照等参数的优化研究及控制,寻求螺旋藻生长的良好条件,以提高螺旋藻的生长速率和产率,以期达到高产低成本的目的[3]。江苏省的海岸滩涂约占全国海岸滩涂总面积的1/4、是海岸滩涂资源最丰富的省份。可见，研究盐胁迫对螺旋藻的形态和光合作用的影响、探索螺旋藻NaCl盐度培养技术对充分利用海涂资源、降低螺旋藻生产成本有重大意义。因此，实验通过对螺旋藻在不同盐度的逐级驯化培养，建立盐胁迫条件下螺旋藻高密度培养的方法体系，探求淡水螺旋藻响应盐分胁迫的生理机制，为淡水螺旋藻的海水培养和规模化生产提供理论依据。
1 材料与方法
1．1 材料
1．1．1 实验藻种
藻种为钝顶螺旋藻F3品系，来源于中科院海洋研究所。实验所用藻种是经过分离纯化和筛选获得的纯种藻株。
1．1．2 培养基组成
实验所用的基本培养基为Zarrouk培养基[4]，其组成配方见表11，表12。除NaHCO3和Na2EDTA外，其余Zarrouk培养基各组分均配成母液，因为NaHCO3所需浓度过高，而Na2EDTA溶解度太低。而FeSO47H2O配成母液后易氧化，若出现沉淀则需要重新配制。微量元素溶液A5按下表中的浓度配成母液，配好后置于冰箱中4℃环境下保存，保藏期为两个月，使用前注意充分摇匀。高温灭菌时NaHCO3和K2HPO4易与培养基中的其他成分络合形成沉淀，最好将这两种物质分开灭菌，冷却后再混合。培养基用去离子水配制，pH调至9.0~9.5，再进行灭菌(121℃，灭菌20 min)。
表1 螺旋藻Zarrouk培养基的组成成分
Table 1 Composition of Zarrouk medium
成分
浓度(g?L1)
成分
浓度(g?L1)
NaHCO3
16.80
NaNO3
2.50
K2HPO4
0.50
K2SO4
1.00
NaCl
1.00
CaCl2H2O
0.04
Na2EDTA
0.08
MgSO47H2O
0.20
A5微量元素混合液
1 mL
FeSO47H2O
0.01
B6微量元素混合液
1 mL
表2 微量元素溶液A5的组成成分
Table 2 Composition of microelement in solution A5
成分
浓度(g?L1)
成分
浓度(g?L1)
ZnSO47H2O
0.222
CuSO45H2O
0.079
(NH4)6MO7O244H2O
0.021
H3BO3
2.860
MnCl24H2O
1.810
1．1．3 仪器设备
高速和超高速离心机、冷冻干燥机、高效液相色谱、液质连用色谱、离子色谱仪、流动分析仪、十万分之一天平、TOC仪、80℃冰箱、超净工作台、超低温高速离心机、PCR仪、RealtimePCR仪、电激转化细胞融合仪、荧光显微镜、凝胶成像系统、大型植物生长箱（控温、控光、控湿）、光合作用测定仪、冷冻干燥仪、新建微藻生长室40m2
1．2 实验设计
1．2．1 螺旋藻盐胁迫的逐级驯化
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）1
1材料与方法2
1.1材料 2
1.1.1实验藻种 2
1.1.2 培养基的组成 2
1.1.3仪器设备 2
1.2实验设计 3
1.2.1螺旋藻预实验逐级驯化3
1.2.2螺旋藻综合培养及指标测定3
1.2.2.1螺旋藻藻种的保存3
1.2.2.2螺旋藻藻种的培养3
1.3测定方法3
1.3.1螺旋藻干重的测定3
1.3.2螺旋藻多糖的测定3
1.3.2.1葡萄糖标准曲线的测定3
1.3.2.2可溶性多糖的测定4
1.3.3螺旋藻藻胆蛋白含量的测定4
1.3.4螺旋藻总脂的测定4
2结果与分析5
2.1盐胁迫对淡水螺旋藻生长、形态的影响5
2.2盐胁迫对淡水螺旋藻生物量的影响 7
2.2.1盐胁迫对藻干重的影响7
2.2.2盐胁迫对多糖的影响7
2.2.3盐胁迫对藻胆蛋白的影响8
2.2.4盐胁迫对总脂的影响9
3讨论 10
3.1盐胁迫对螺旋藻生长的影响 10
3.2盐胁迫对螺旋藻生物量的影响10
4结论 10
致谢10
参考文献11
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5^1^9^1^6^0^7^2^*
/> 盐胁迫对淡水螺旋藻形态和生理指标的影响
引言
引言 螺旋藻（Spirulina）因拥有极高的营养价值和化学组分已经被成功开发并实现商业化生产，是最重要的经济微藻之一[1]。螺旋藻的营养丰富, 其中富含多种蛋白质、维生素、微量元素以及对人体有多种特殊药效功能的活性物质等[2]。 但螺旋藻产率低、生产成本高, 难以广泛推广。目前通过对螺旋藻的培养条件优化如:通过对营养物质、温度、 pH 值、光照等参数的优化研究及控制,寻求螺旋藻生长的良好条件,以提高螺旋藻的生长速率和产率,以期达到高产低成本的目的[3]。江苏省的海岸滩涂约占全国海岸滩涂总面积的1/4、是海岸滩涂资源最丰富的省份。可见，研究盐胁迫对螺旋藻的形态和光合作用的影响、探索螺旋藻NaCl盐度培养技术对充分利用海涂资源、降低螺旋藻生产成本有重大意义。因此，实验通过对螺旋藻在不同盐度的逐级驯化培养，建立盐胁迫条件下螺旋藻高密度培养的方法体系，探求淡水螺旋藻响应盐分胁迫的生理机制，为淡水螺旋藻的海水培养和规模化生产提供理论依据。
1 材料与方法
1．1 材料
1．1．1 实验藻种
藻种为钝顶螺旋藻F3品系，来源于中科院海洋研究所。实验所用藻种是经过分离纯化和筛选获得的纯种藻株。
1．1．2 培养基组成
实验所用的基本培养基为Zarrouk培养基[4]，其组成配方见表11，表12。除NaHCO3和Na2EDTA外，其余Zarrouk培养基各组分均配成母液，因为NaHCO3所需浓度过高，而Na2EDTA溶解度太低。而FeSO47H2O配成母液后易氧化，若出现沉淀则需要重新配制。微量元素溶液A5按下表中的浓度配成母液，配好后置于冰箱中4℃环境下保存，保藏期为两个月，使用前注意充分摇匀。高温灭菌时NaHCO3和K2HPO4易与培养基中的其他成分络合形成沉淀，最好将这两种物质分开灭菌，冷却后再混合。培养基用去离子水配制，pH调至9.0~9.5，再进行灭菌(121℃，灭菌20 min)。
表1 螺旋藻Zarrouk培养基的组成成分
Table 1 Composition of Zarrouk medium
成分
浓度(g?L1)
成分
浓度(g?L1)
NaHCO3
16.80
NaNO3
2.50
K2HPO4
0.50
K2SO4
1.00
NaCl
1.00
CaCl2H2O
0.04
Na2EDTA
0.08
MgSO47H2O
0.20
A5微量元素混合液
1 mL
FeSO47H2O
0.01
B6微量元素混合液
1 mL
表2 微量元素溶液A5的组成成分
Table 2 Composition of microelement in solution A5
成分
浓度(g?L1)
成分
浓度(g?L1)
ZnSO47H2O
0.222
CuSO45H2O
0.079
(NH4)6MO7O244H2O
0.021
H3BO3
2.860
MnCl24H2O
1.810
1．1．3 仪器设备
高速和超高速离心机、冷冻干燥机、高效液相色谱、液质连用色谱、离子色谱仪、流动分析仪、十万分之一天平、TOC仪、80℃冰箱、超净工作台、超低温高速离心机、PCR仪、RealtimePCR仪、电激转化细胞融合仪、荧光显微镜、凝胶成像系统、大型植物生长箱（控温、控光、控湿）、光合作用测定仪、冷冻干燥仪、新建微藻生长室40m2
1．2 实验设计
1．2．1 螺旋藻盐胁迫的逐级驯化
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