不同比例的氨基酸条件下木霉对黄瓜促生效果的研究
摘要：以哈茨木霉T37与黄瓜为研究材料，通过温室盆栽实验，研究了以化肥为基肥（与1%有机肥等养分）作对照的CK处理，以化肥为基肥（与1%有机肥等养分）作对照+0.5%氨基酸肥料的AA处理，以化肥为基肥（与1%有机肥等养分）作对照+哈茨木霉T37的AA+T对照实验以及以1%有机肥为底肥+0.5%氨基酸肥料+哈茨木霉T37的ATO处理五种不同处理条件下对黄瓜的促生效果，结果表明在ATO处理下黄瓜的根系生长状况、株高、茎粗、叶片数、叶面积、叶绿素含量要明显好于AA+T、AA、T、CK对照处理，说明木霉及在适宜的营养因子条件下对黄瓜具有明显的促生作用。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1 实验材料 2
1.1.1 供试菌株 2 1.1.2 供试培养基 2
1.1.3 供试土壤与肥料2
1.2 温室盆栽实验2
1.2.1 菌株的培养2
1.2.2 黄瓜催芽及育苗3
1.2.3 促生菌孢子液的准备3
1.2.4 黄瓜生长量测定及其涂布计数3
1.2.5 试验设计与处理3
1.2.6 数据统计3
2 结果与分析3
2.1 木霉促生黄瓜地下部根系生长测定结果3
2.2 木霉促生黄瓜地上部分生长测定结果4
2.2.1 黄瓜株高与茎粗生长测定结果4
2.2.2 黄瓜叶面部分生长测定结果4
2.3 盆栽土样涂布计数结果6
3 讨论 7
3.1 木霉促生黄瓜生长机理7
3.2 氨基酸与木霉共同促进黄瓜生长7
3.3 有机肥与木霉促进黄瓜生长7
4 结论8
致谢8
参考文献8
不同比例的氨基酸条件下木霉对黄瓜促生效果的研究
引言
木霉属（Trichoderma spp.）真菌界、双核菌门、半知菌亚门、丝孢纲、丛梗孢目、
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
丛梗孢科，是一类分布广泛的土壤习居菌，常见于植物残体及动物粪便上，是一种重要的生防菌[12]。Weinding[3]首先发表了木素木霉(Trichoderma lignorum)对几种土壤真菌的拮抗作用的研究结果。其后，人们对木霉的生物防治潜力产生了极大的兴趣，相继就木霉对植物病原真菌的拮抗作用及其机制开展了大量的研究。近年来人们发现，生防木霉不仅对植物病原真菌具有拮抗效应,还能促进植物的生长。
随着科学社会的发展，大量的证据表明植物除了能吸收无机态氮外，也能吸收有机态氮[46]，氨基酸是一组分子量大小不等的有机化合物，是合成蛋白质的基本单位，氨基酸可提供有机氮源，植物可吸收分子态的氨基酸[4]。生产氨基酸肥料的主要工艺是水解或微生物发酵，大部分是利用动物毛发和植物边角料提取植物氨基酸和制造氨基酸肥料。这些材料都是病死的畜禽动物，施用液体氨基酸肥料不仅能够处理生产生活中的垃圾，又能变废为宝，实现资源的再利用，大量研究证明，氨基酸可提高作物产量和品质，增强作物抗性，改善生态环境[7]，因而氨基酸肥料作为一种新型肥料逐渐得到认可。研究氨基酸肥料与土壤微生物的相互作用对植物的促生关系对农业生产具有现实意义。
随着我国经济的高速发展，尤其是化肥工业的迅速崛起，让广大农民逐渐放弃了施用有机肥的传统，取而代之的是化肥的大量施用。这种转变虽然为解决我国13亿人口的吃饭问题做出了重大贡献，但也带来了天然气、煤等能源的大量消耗，钾肥依赖进口的程度更高，未被利用的有机肥资源污染环境等一系列问题。
有机肥含有丰富的有机质、氨基酸、蛋白质等有机养分，同时也含有氮、磷、钾等无机养分[89]，在我国农业发展过程中一直发挥着重要的作用。20世纪中期以来,由于化肥的大量施用，人们一度对有机肥重视不够，施用面积和施用量逐渐减少。化肥的大量施用，使土壤微生物多样性下降，严重影响了作物品质和产量[10]。导致土壤肥力和农产品品质下降，施肥效益递减。大量的研究表明，施用有机肥不但可以提高作物产量，培肥地力，更能改善农产品品质[1113]。多功能化、长效化及生物化的有机肥料对调控土壤微生物群落结构，提高土壤更新或恢复能力，防止土传病害等具有重要意义[14?15]。随着市场经济的发展和人们对绿色食品需求的不断提高，对农产品品质也有了更高的要求，因此，有机肥的施用引起了人们的广泛关注。
施用生物有机肥是调控土壤微生物区系的有效途径，而微生物特定功能的发挥又受到营养因子影响，针对功能微生物易受环境影响，在土壤中功能发挥不稳定等问题，增施有机肥和人工引入外源有益微生物，再结合农业其它管理措施等可以有效调控土壤微生物区系和增加土壤生物活性，促进作物生长，达到利用土壤微生物内生态的自我稳定机制、平衡土壤微生物区系、提高土壤养分供应能力等目的。这些方面既有很多关键的科学问题，也具有重要的应用价值。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 供试菌株：
哈茨木霉T37
1.1.2 供试培养基：
PDA培养基：马铃薯洗净去皮切碎称取200g，加水1000ml煮沸半个小时，纱布过滤，再加1020g葡萄糖和1720g琼脂，充分溶解后趁热纱布过滤，分装121℃灭菌20min冷却后贮存备用。
木霉基础培养基：MgSO47H2O 0.2g、K2HPO4 0.9g、KCl 0.15g，（NH4）2SO4 1g、蔗糖3g、五氯硝基苯（PCNB的75％可湿性粉剂）0.2g、孟加拉红（五氯四碘荧光燃料C20H4O5Cl4）0.033g、琼脂20g、蒸馏水1000ml，调pH至6.0。
木霉选择性培养基：[硫酸镁（MgSO4.7H2O）0.2g、磷酸氢二钾（K2HPO4）0.9g、氯化钾（KCl）0.15g、硝酸铵[（NH4）2SO4]1g、孟加拉红（五氯四碘荧光燃料C20H4O5Cl4）0.15g、琼脂20g，葡萄糖3g，溶于950ml蒸馏水中，121℃，灭菌20min。将氯霉素0.25g。链霉素原液（1%）9ml，五氯硝基苯0.2g，霜霉威（722g/L）1.2ml，混合加入到冷却的培养基中。
1.1.3 供试土壤及肥料
土壤为江苏省江阴市水稻土。
氨基酸肥料（江苏联业公司猪毛水解液），江阴联业生物有机肥（N：3.36%，P2O5：1.56%，K2O：1.32%，pH：7.0，有机质：44.20%，含水量：30.25%）。
1.2 温室盆栽试验
1.2.1 菌株的培养
在250ml三角瓶加入培养基100ml，接入T37孢子液在摇床内，28℃，180rpm，培养7天，用无菌纱布过滤菌丝，将菌液过滤到无菌三角瓶待用。
1.2.2 黄瓜催芽及育苗
黄瓜种子加入5%次氯酸钠溶液浸泡15 min，无菌水洗6次；用55℃水浸泡3h，将消毒好的种子均匀平铺在无菌水湿润滤纸平板上置于30 ℃培养箱中催芽2 d。种子吐白后，播种到育苗基质的育苗盘中，每个孔播种2粒种子，置于温室中生长，室温约在26 ℃到32 ℃，按黄瓜需求浇水，待长至两叶一心时，移植盆钵内生长35天后接入孢子液。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1 实验材料 2
1.1.1 供试菌株 2 1.1.2 供试培养基 2
1.1.3 供试土壤与肥料2
1.2 温室盆栽实验2
1.2.1 菌株的培养2
1.2.2 黄瓜催芽及育苗3
1.2.3 促生菌孢子液的准备3
1.2.4 黄瓜生长量测定及其涂布计数3
1.2.5 试验设计与处理3
1.2.6 数据统计3
2 结果与分析3
2.1 木霉促生黄瓜地下部根系生长测定结果3
2.2 木霉促生黄瓜地上部分生长测定结果4
2.2.1 黄瓜株高与茎粗生长测定结果4
2.2.2 黄瓜叶面部分生长测定结果4
2.3 盆栽土样涂布计数结果6
3 讨论 7
3.1 木霉促生黄瓜生长机理7
3.2 氨基酸与木霉共同促进黄瓜生长7
3.3 有机肥与木霉促进黄瓜生长7
4 结论8
致谢8
参考文献8
不同比例的氨基酸条件下木霉对黄瓜促生效果的研究
引言
木霉属（Trichoderma spp.）真菌界、双核菌门、半知菌亚门、丝孢纲、丛梗孢目、
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
丛梗孢科，是一类分布广泛的土壤习居菌，常见于植物残体及动物粪便上，是一种重要的生防菌[12]。Weinding[3]首先发表了木素木霉(Trichoderma lignorum)对几种土壤真菌的拮抗作用的研究结果。其后，人们对木霉的生物防治潜力产生了极大的兴趣，相继就木霉对植物病原真菌的拮抗作用及其机制开展了大量的研究。近年来人们发现，生防木霉不仅对植物病原真菌具有拮抗效应,还能促进植物的生长。
随着科学社会的发展，大量的证据表明植物除了能吸收无机态氮外，也能吸收有机态氮[46]，氨基酸是一组分子量大小不等的有机化合物，是合成蛋白质的基本单位，氨基酸可提供有机氮源，植物可吸收分子态的氨基酸[4]。生产氨基酸肥料的主要工艺是水解或微生物发酵，大部分是利用动物毛发和植物边角料提取植物氨基酸和制造氨基酸肥料。这些材料都是病死的畜禽动物，施用液体氨基酸肥料不仅能够处理生产生活中的垃圾，又能变废为宝，实现资源的再利用，大量研究证明，氨基酸可提高作物产量和品质，增强作物抗性，改善生态环境[7]，因而氨基酸肥料作为一种新型肥料逐渐得到认可。研究氨基酸肥料与土壤微生物的相互作用对植物的促生关系对农业生产具有现实意义。
随着我国经济的高速发展，尤其是化肥工业的迅速崛起，让广大农民逐渐放弃了施用有机肥的传统，取而代之的是化肥的大量施用。这种转变虽然为解决我国13亿人口的吃饭问题做出了重大贡献，但也带来了天然气、煤等能源的大量消耗，钾肥依赖进口的程度更高，未被利用的有机肥资源污染环境等一系列问题。
有机肥含有丰富的有机质、氨基酸、蛋白质等有机养分，同时也含有氮、磷、钾等无机养分[89]，在我国农业发展过程中一直发挥着重要的作用。20世纪中期以来,由于化肥的大量施用，人们一度对有机肥重视不够，施用面积和施用量逐渐减少。化肥的大量施用，使土壤微生物多样性下降，严重影响了作物品质和产量[10]。导致土壤肥力和农产品品质下降，施肥效益递减。大量的研究表明，施用有机肥不但可以提高作物产量，培肥地力，更能改善农产品品质[1113]。多功能化、长效化及生物化的有机肥料对调控土壤微生物群落结构，提高土壤更新或恢复能力，防止土传病害等具有重要意义[14?15]。随着市场经济的发展和人们对绿色食品需求的不断提高，对农产品品质也有了更高的要求，因此，有机肥的施用引起了人们的广泛关注。
施用生物有机肥是调控土壤微生物区系的有效途径，而微生物特定功能的发挥又受到营养因子影响，针对功能微生物易受环境影响，在土壤中功能发挥不稳定等问题，增施有机肥和人工引入外源有益微生物，再结合农业其它管理措施等可以有效调控土壤微生物区系和增加土壤生物活性，促进作物生长，达到利用土壤微生物内生态的自我稳定机制、平衡土壤微生物区系、提高土壤养分供应能力等目的。这些方面既有很多关键的科学问题，也具有重要的应用价值。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 供试菌株：
哈茨木霉T37
1.1.2 供试培养基：
PDA培养基：马铃薯洗净去皮切碎称取200g，加水1000ml煮沸半个小时，纱布过滤，再加1020g葡萄糖和1720g琼脂，充分溶解后趁热纱布过滤，分装121℃灭菌20min冷却后贮存备用。
木霉基础培养基：MgSO47H2O 0.2g、K2HPO4 0.9g、KCl 0.15g，（NH4）2SO4 1g、蔗糖3g、五氯硝基苯（PCNB的75％可湿性粉剂）0.2g、孟加拉红（五氯四碘荧光燃料C20H4O5Cl4）0.033g、琼脂20g、蒸馏水1000ml，调pH至6.0。
木霉选择性培养基：[硫酸镁（MgSO4.7H2O）0.2g、磷酸氢二钾（K2HPO4）0.9g、氯化钾（KCl）0.15g、硝酸铵[（NH4）2SO4]1g、孟加拉红（五氯四碘荧光燃料C20H4O5Cl4）0.15g、琼脂20g，葡萄糖3g，溶于950ml蒸馏水中，121℃，灭菌20min。将氯霉素0.25g。链霉素原液（1%）9ml，五氯硝基苯0.2g，霜霉威（722g/L）1.2ml，混合加入到冷却的培养基中。
1.1.3 供试土壤及肥料
土壤为江苏省江阴市水稻土。
氨基酸肥料（江苏联业公司猪毛水解液），江阴联业生物有机肥（N：3.36%，P2O5：1.56%，K2O：1.32%，pH：7.0，有机质：44.20%，含水量：30.25%）。
1.2 温室盆栽试验
1.2.1 菌株的培养
在250ml三角瓶加入培养基100ml，接入T37孢子液在摇床内，28℃，180rpm，培养7天，用无菌纱布过滤菌丝，将菌液过滤到无菌三角瓶待用。
1.2.2 黄瓜催芽及育苗
黄瓜种子加入5%次氯酸钠溶液浸泡15 min，无菌水洗6次；用55℃水浸泡3h，将消毒好的种子均匀平铺在无菌水湿润滤纸平板上置于30 ℃培养箱中催芽2 d。种子吐白后，播种到育苗基质的育苗盘中，每个孔播种2粒种子，置于温室中生长，室温约在26 ℃到32 ℃，按黄瓜需求浇水，待长至两叶一心时，移植盆钵内生长35天后接入孢子液。
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