gc／uplcms的经典明方当归补血汤物质基准化学成分研究
摘 要经典名方是是中医药宝库中最精髓的部分，也是中药方剂学的一个重要标志，并且对于目前国内外的形势以及在市场上，从而使对于其迫切需要。当归补血汤在中药当中是比较经典的气与血双补名方，它具有补气生血的功效。当归补血汤中以黄芪、当归为主，黄芪中含有皂苷类、黄酮类、糖类等成分，当归中含有有机酸类、多糖类等成分。从而建立当归补血汤物质基准分析方法。实验表明筛选出的物质成分大多数均归属于黄芪。例如乙酸乙酯、苯酚、对甲基苯酚等。而相对较少部分归属于当归，例如甘露糖、葡萄糖、雪松烯月桂烯、十一烷等。极少部分当归黄芪中均含有，例如右旋柠檬烯、2,6-二甲基-2,4,6-辛三烯等。因为当归补血汤中药材含有部分挥发性成分，但由于LC-MS技术对化学成分分析具有一定的局限性，因此采用气质GC-MS的方法对当归补血汤中的挥发性物质进行筛选与总结，并得出相关含量的数据。
目 录
1绪论 1
1.1当归的概述 1
1.1.1当归对机体作用研究 1
1.1.2当归中提取成分研究 2
1.1.3当归中化学成分的提取 3
1.2黄芪的概述 3
1.2.1黄芪对机体作用研究 3
1.2.2黄芪中提取成分研究 4
1.2.3黄芪的提取方法研究 5
2当归补血汤LCMS实验 6
2.1实验材料 6
2.1.1仪器与试剂 6
2.1.2试验药材 6
2.2实验方法 6
2.2.1当归补血汤物质基准制备 6
2.2.2研究用样品制备 7
2.3当归补血汤LCMS分析条件 7
2.3.1色谱条件、质谱条件 7
2.4分析方法 7
2.5结果与分析 10
2.5.1当归补血汤 LCMS分析结果 10
2.5.2当归补血汤 LCMS总离子流分析 10
3当归补血汤GCMS实验 13
3.1实验材料 13
3.1.1仪器、试剂 13
3.2实验方法 13
3.2.1样品制备 13
3.2.2 GCMS分析 13
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: #351916072#
/> 3.2.3进样方式 13
3.2.4程序升温 14
3.2.5 GCMS分析条件 14
3.3结果与分析 14
4结论 16
参考文献 17
致谢 19
1绪论
1.1当归的概述
当归，它又叫做云归、秦归，因为其治疗范围广、功效强、药理作用多，所以这类药材在中医临床界被广泛医学人士所用。当归不仅有可以补血的作用而且还有可以活血的作用，它非但有可以调经，从而也有可以止痛的作用，在中医组方用药上可以治疗经闭，痛经以及肠道干燥引起的便秘等[1]。
当归历来都有“十方九归”之说，除了在中医处方上用药之外，在一些中成药中的当归在临床上也得以体现出它用药范围广的优势。
1.1.1当归对机体作用研究
当归的药理作用研究包括镇痛抗炎作用、对心血管系统的作用、抗肿瘤的作用以及对中枢神经系统的影响。具体如下：
华永丽建造大鼠LPS（脂多糖）炎症模型并用高、中、低剂量的当归挥发油进行干预检测相应指标发现当归挥发油各剂量组均能有效的抑制大鼠体内炎症症状且对大鼠肝脏损伤有一定保护作用并减少了LPS 对其的伤害[2]。
当归的功效有很多，它可以抗心律失常，降低心肌细胞兴奋性，使不应期延长。
表1.1 当归挥发油以及当归多糖对机体的药理作用
成分
作用
当归挥发油
当归多糖
对机体的药理作用
对于大脑缺血以及灌注损伤大鼠神经功能缺损都能很好的改善以及降低脑血管通透性和脑含水量[3]
可以对k562细胞产生明显的抑制作用，并且加入多糖的浓度与抑制强弱呈正相关，但浓度过高会产生毒性反应
通过研究发现，多糖与瘤苗适于二者连用，相互协助，多糖主要的作用可以提高免疫功能，一旦和瘤苗连用，从而会使瘤苗的抗瘤作用得到增强[5]。
藁本内酯对机体的药理作用如下表：
表1.2 藁本内酯的药理作用
成分
作用
藁本内酯
药理作用
对中枢有抑制作用，使小鼠活动明显减少，就有安定镇静作用，与氯胺酮连用可发生拮抗作用从而使小鼠中枢兴奋[6]。
1.1.2当归中提取成分研究
当归中可提取成分颇多，其中挥发油、有机酸、多糖、黄酮类占多数。以下内容是对这些成分具体的叙述及分析：
挥发油虽然属于当归中提取的有效成分之一，但在当归中所占比例非常小。当归中的挥发油主要以中性油为主，占总挥发油的比例很高，主要包括藁本内酯、丁烯基酞内酯、洋川芎内酯、亚丁基苯酞以及当归酮等[7]。从化学结构上看，挥发油中以苯酞类及其二聚体类化合物为主，其次为以ɑ 蒎烯、氧化石竹烯等为代表的倍半萜类化合物。另外还有一些酣类化合物如对 乙烯基愈创木酣、丁烯基苯酣等。
多糖是当归中的水溶性有效成分，其在当归中含量高达15%。当归多糖具有补血和调节免疫的功效[8]。目前，当归多糖的提纯方法主要包括水提醇沉法的粗提、离子交换层析、凝胶层析等提纯法。利用某种提取方法分离出的多糖经过GC/UPLCMS的筛选与鉴定，从而筛选出多种糖类，（其中以葡萄糖、阿拉伯糖、等糖类为主），另外还有一些少部分的酸性多糖。
当归中存在的有机酸含量也很多（其中以阿魏酸、丁二酸等为主）。阿魏酸是有机酸类的代表，属于较早分离出当归的有效成分，同时也是当归质量控制指标之一[9]。
黄酮类化合物也是当归的重要组分之一。这类化合物可用乙醇提取，提取后的结果大部分是木犀草素（其中多以木犀草素7OD和木犀草素7O芦丁糖苷为主）。
1.1.3当归中化学成分的提取
水蒸气蒸馏法提取步骤：1.取新鲜当归药材100g。2.粉碎。3.过筛。4.进行挥发油测定并连续蒸馏6h，收集挥发油。这种方法最后收集的藁本内酯的收率只有67.3%，且易发生异构化反应[10]。由于温度较高，需时较长，易使对湿热不稳定及易氧化的挥发油成分发生变化[11]。
超临界二氧化碳萃取条件：1.将当归饮片500g 投入萃取釜中。2.萃取条件为压力25MPa、温度为40℃、CO2流量2L/kg，时间6h。提取物4℃过夜，过滤，即得。
目 录
1绪论 1
1.1当归的概述 1
1.1.1当归对机体作用研究 1
1.1.2当归中提取成分研究 2
1.1.3当归中化学成分的提取 3
1.2黄芪的概述 3
1.2.1黄芪对机体作用研究 3
1.2.2黄芪中提取成分研究 4
1.2.3黄芪的提取方法研究 5
2当归补血汤LCMS实验 6
2.1实验材料 6
2.1.1仪器与试剂 6
2.1.2试验药材 6
2.2实验方法 6
2.2.1当归补血汤物质基准制备 6
2.2.2研究用样品制备 7
2.3当归补血汤LCMS分析条件 7
2.3.1色谱条件、质谱条件 7
2.4分析方法 7
2.5结果与分析 10
2.5.1当归补血汤 LCMS分析结果 10
2.5.2当归补血汤 LCMS总离子流分析 10
3当归补血汤GCMS实验 13
3.1实验材料 13
3.1.1仪器、试剂 13
3.2实验方法 13
3.2.1样品制备 13
3.2.2 GCMS分析 13
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: #351916072#
/> 3.2.3进样方式 13
3.2.4程序升温 14
3.2.5 GCMS分析条件 14
3.3结果与分析 14
4结论 16
参考文献 17
致谢 19
1绪论
1.1当归的概述
当归，它又叫做云归、秦归，因为其治疗范围广、功效强、药理作用多，所以这类药材在中医临床界被广泛医学人士所用。当归不仅有可以补血的作用而且还有可以活血的作用，它非但有可以调经，从而也有可以止痛的作用，在中医组方用药上可以治疗经闭，痛经以及肠道干燥引起的便秘等[1]。
当归历来都有“十方九归”之说，除了在中医处方上用药之外，在一些中成药中的当归在临床上也得以体现出它用药范围广的优势。
1.1.1当归对机体作用研究
当归的药理作用研究包括镇痛抗炎作用、对心血管系统的作用、抗肿瘤的作用以及对中枢神经系统的影响。具体如下：
华永丽建造大鼠LPS（脂多糖）炎症模型并用高、中、低剂量的当归挥发油进行干预检测相应指标发现当归挥发油各剂量组均能有效的抑制大鼠体内炎症症状且对大鼠肝脏损伤有一定保护作用并减少了LPS 对其的伤害[2]。
当归的功效有很多，它可以抗心律失常，降低心肌细胞兴奋性，使不应期延长。
表1.1 当归挥发油以及当归多糖对机体的药理作用
成分
作用
当归挥发油
当归多糖
对机体的药理作用
对于大脑缺血以及灌注损伤大鼠神经功能缺损都能很好的改善以及降低脑血管通透性和脑含水量[3]
可以对k562细胞产生明显的抑制作用，并且加入多糖的浓度与抑制强弱呈正相关，但浓度过高会产生毒性反应
通过研究发现，多糖与瘤苗适于二者连用，相互协助，多糖主要的作用可以提高免疫功能，一旦和瘤苗连用，从而会使瘤苗的抗瘤作用得到增强[5]。
藁本内酯对机体的药理作用如下表：
表1.2 藁本内酯的药理作用
成分
作用
藁本内酯
药理作用
对中枢有抑制作用，使小鼠活动明显减少，就有安定镇静作用，与氯胺酮连用可发生拮抗作用从而使小鼠中枢兴奋[6]。
1.1.2当归中提取成分研究
当归中可提取成分颇多，其中挥发油、有机酸、多糖、黄酮类占多数。以下内容是对这些成分具体的叙述及分析：
挥发油虽然属于当归中提取的有效成分之一，但在当归中所占比例非常小。当归中的挥发油主要以中性油为主，占总挥发油的比例很高，主要包括藁本内酯、丁烯基酞内酯、洋川芎内酯、亚丁基苯酞以及当归酮等[7]。从化学结构上看，挥发油中以苯酞类及其二聚体类化合物为主，其次为以ɑ 蒎烯、氧化石竹烯等为代表的倍半萜类化合物。另外还有一些酣类化合物如对 乙烯基愈创木酣、丁烯基苯酣等。
多糖是当归中的水溶性有效成分，其在当归中含量高达15%。当归多糖具有补血和调节免疫的功效[8]。目前，当归多糖的提纯方法主要包括水提醇沉法的粗提、离子交换层析、凝胶层析等提纯法。利用某种提取方法分离出的多糖经过GC/UPLCMS的筛选与鉴定，从而筛选出多种糖类，（其中以葡萄糖、阿拉伯糖、等糖类为主），另外还有一些少部分的酸性多糖。
当归中存在的有机酸含量也很多（其中以阿魏酸、丁二酸等为主）。阿魏酸是有机酸类的代表，属于较早分离出当归的有效成分，同时也是当归质量控制指标之一[9]。
黄酮类化合物也是当归的重要组分之一。这类化合物可用乙醇提取，提取后的结果大部分是木犀草素（其中多以木犀草素7OD和木犀草素7O芦丁糖苷为主）。
1.1.3当归中化学成分的提取
水蒸气蒸馏法提取步骤：1.取新鲜当归药材100g。2.粉碎。3.过筛。4.进行挥发油测定并连续蒸馏6h，收集挥发油。这种方法最后收集的藁本内酯的收率只有67.3%，且易发生异构化反应[10]。由于温度较高，需时较长，易使对湿热不稳定及易氧化的挥发油成分发生变化[11]。
超临界二氧化碳萃取条件：1.将当归饮片500g 投入萃取釜中。2.萃取条件为压力25MPa、温度为40℃、CO2流量2L/kg，时间6h。提取物4℃过夜，过滤，即得。
版权保护: 本文由 hbsrm.com编辑，转载请保留链接: www.hbsrm.com/yxlw/zygc/27.html
