正交试验法优选女贞子酒制工艺(附件)
摘 要本论文以齐墩果酸和特女贞苷含量为考察指标，通过正交试验，比较女贞子酒制工艺中加黄酒量（A）、加水量(B）、浸润时间（C）、蒸制时间（D）对女贞子质量的影响。用氯仿提取女贞子中齐墩果酸，正交试验结果表明最佳炮制工艺为黄酒用量7ml，加水量2.5ml，浸润时间3h，蒸制时间5h；用50 %乙醇提取女贞子中特女贞苷，正交试验结果表明最佳炮制工艺为黄酒用量4.5ml，加水量2.5ml，浸润时间1h，蒸制时间3h。按以上结果炮制女贞子，工艺操作简单，重复性好。目 录
1 概述
1.1 研究背景 1
1.2 女贞子炮研究现状 1
1.3 药材来源以及形态 3
1.4 化学成分 3
1.4.1 萜类 4
1.4.2 黄酮类 4
1.4.3 苯乙醇苷类化合物 4
1.4.4 挥发油类 4
1.4.5 氨基酸 4
1.4.6 微量元素 4
1.5 药理作用及临床应用 4
1.5.1 药理作用 5
1.5.2 临床应用 5
2 实验部分
2.1 仪器与试药 7
2.1.1 仪器 7
2.1.2 试药 7
2.2 齐墩果酸和特女贞苷的含量测定方法 7
2.2.1 齐墩果酸的含量测定方法 7
2.2.2 特女贞苷的含量测定方法 10
3.1 女贞子炮制工艺正交试验设计 12
3.2 实验结果 13
3.3 结果分析 14
结论 15
参考文献 16
致谢 19
1 概述
1.1 研究背景
女贞子的应用由来已久，我国很多医药著作对其功能主治均有过记载，比如：《神农本草经》：“主补中，安五脏，养精神，除百疾，久服肥健”，《本草蒙荃》：“黑发黑须，强筋强力，多服补血祛风，”《本草纲目》：“强阴，健腰膝，明目，”《本草经疏》：“凉血、养血，”《本草正》：“养阴益肾，止虚汗，亦清肝火，可以明目止泪，治腰膝疼，通便和血，”《本草再新》：“养阴益肾，补气疏肝”，《广西中药志》：“
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女贞子的应用由来已久，我国很多医药著作对其功能主治均有过记载，比如：《神农本草经》：“主补中，安五脏，养精神，除百疾，久服肥健”，《本草蒙荃》：“黑发黑须，强筋强力，多服补血祛风，”《本草纲目》：“强阴，健腰膝，明目，”《本草经疏》：“凉血、养血，”《本草正》：“养阴益肾，止虚汗，亦清肝火，可以明目止泪，治腰膝疼，通便和血，”《本草再新》：“养阴益肾，补气疏肝”，《广西中药志》：“治老人大便虚秘[1]”等等。
现代研究表明，女贞子主要含有萜类（包括三萜类、环烯醚萜类)、苯乙醇类、苯丙素类、黄酮类、多糖、氨基酸、脂肪酸、挥发油类等化学成分[26]，目前已经分离的达100多种。女贞子具有多种药理功能包括：提高人体免疫功能、升白、抗炎抑菌、减少冠状动脉粥样硬化病变、降血糖、降眼压、护肝、抗癌、抗衰老等[78]。临床上主要用于白细胞减少症、冠心病、青光眼、乙肝、糖尿病、高血脂等病症。女贞子的炮制方法始见于宋代《疮疡》一书，随着历史的发展，炮制方法不断增加，沿用至今。现在女贞子的炮制方法，除了净制、蒸制、酒制、盐制外，还有醋制，全国各地的炮制规范中收载的大多是酒制。1963和1977年版《中国药典》均收载为酒炖法，1985~2015年版《中国药典》收载为酒炖法或酒蒸法，用酒量为每100kg女贞子用酒20kg。2015版《中国药典》对女贞子炮制工艺规定为“取净女贞子，照酒炖法或酒蒸法，炖至酒吸尽或蒸透[9]”。查阅文献关于女贞子炮制的工艺各地各法，工艺参数也不完备。目前女贞子的酒制，无论《中国药典》2015版还是各省市的中药饮片炮制规范，在是否闷润、蒸制时间、蒸制温度上都没有明确的规定，即便有规定，也是各地各法，没有统一标准，如此情况势必影响饮片的质量，造成临床疗效下降，因此有必要规范女贞子酒制工艺。
本课题以齐墩果酸和特女贞苷作为研究指标，利用正交试验法优选酒蒸女贞子炮制工艺参数，对女贞子酒制工艺进行规范研究，提高女贞子炮制过程的可控性，为女贞子炮制品临床应用的有效性提供保证。
1.2 女贞子研究现状
现代女贞子的炮制方法主要为去梗叶、洗净、酒蒸、酒炖、盐制、醋制等，其中以酒炖和酒蒸法应用较多。
《中国药典》2015版和《全国中药炮制规范》1988版均收录女贞子和酒女贞子两种炮制品。其中《中国药典》2015版规定：女贞子为 “除去杂质，洗净，干燥”；酒女贞子为“取净女贞子，照酒炖法或酒蒸法炖至酒洗尽或蒸透”。《全国中药炮制规范》1988版规定：女贞子为“取原药材，除去杂质及梗叶，洗炮制品净，干燥”。酒女贞子为“取净女贞子，用黄酒拌匀，稍闷后置蒸罐内密封，隔水炖或置适宜容器内蒸，至酒被吸尽，色泽黑润时，取出干燥，每女贞子100kg，用黄酒20kg[10]”。从以上可以看出，《中国药典》和《全国中药炮制规范》均未对女贞子酒炖和酒蒸的具体条件、时间作明确规定。
目前全国各省、市、自治区所颁布的地方性炮制规范，除云南、广东等地允许净制后生品入药，其余省、市、自治区均规定女贞子须炮制后入药，如上海市采用单蒸法，规定“将原药除去梗、泥屑等杂质。淘净，取出，沥干。置蒸具内蒸4小时，焖过夜。取出，干燥[11]”。其余省市炮制方法绝大多数采用酒炖和酒蒸，如北京市2005年炮制规范规定“取原药材，除去杂质，洗净，加黄酒拌匀，闷润2~4小时，装入蒸罐内，加水适量，密封，蒸15~24小时，至色泽黑润时，取出，晾干。每100kg净女贞子，用黄酒20kg”。《广东省中药炮制规范》规定“用酒拌匀，闷润，待酒被吸尽后，蒸2~4小时，取出，晾干[12]”。《安徽省中药饮品炮制规范》2005版规定“取净女贞子，照蒸法，用黄酒拌蒸至色泽黑润[13]”。《山东省中药炮制规范》规定“先将净女贞子用黄酒拌匀，闷润至黄酒被吸尽，放笼屉内，先用武火加热，待圆气后改用文火，蒸至色泽黑润时（约4 h），取出，摊晾至外皮微干，再将原汁拌入，吸尽，干燥[14]”。《江苏省中药饮片炮制规范》规定“取净女贞子加黄酒拌匀，闷润，待酒吸尽，蒸6 h，焖12 h，至黑色，取出，干燥[15]”。由此可见，虽然地方性炮制规范中对女贞子酒炖和酒蒸时间做出相关规定，但各地各法，没有统一标准，所以对女贞子酒炖和酒蒸工艺进行深入研究具有重要意义。
周爱香等[16]研究对比女贞子生品、酒炖品、酒蒸品、加压品、盐蒸品、醋蒸品、单蒸品七种炮制品在升白、抗炎、增强非特异性免疫功能等方面的作用，结果发现酒蒸品在各方面作用均优于生品及其它炮制品。张学兰等[17]以红景天苷和特女贞苷含量为评价指标，以黄酒用量、水用量、闷润时间和炖制时间为考察因素，通过正交试验，综合评价，优选最佳炮制工艺为取净女贞子，加其重量20%的黄酒，不加水，闷润1h，蒸汽加热炖制10h，并且在炮制过程中发现随着炮制时间增加特女贞苷含量降低，而红景天苷含量增加。徐维统等[18]采用正交试验，以齐墩果
1 概述
1.1 研究背景 1
1.2 女贞子炮研究现状 1
1.3 药材来源以及形态 3
1.4 化学成分 3
1.4.1 萜类 4
1.4.2 黄酮类 4
1.4.3 苯乙醇苷类化合物 4
1.4.4 挥发油类 4
1.4.5 氨基酸 4
1.4.6 微量元素 4
1.5 药理作用及临床应用 4
1.5.1 药理作用 5
1.5.2 临床应用 5
2 实验部分
2.1 仪器与试药 7
2.1.1 仪器 7
2.1.2 试药 7
2.2 齐墩果酸和特女贞苷的含量测定方法 7
2.2.1 齐墩果酸的含量测定方法 7
2.2.2 特女贞苷的含量测定方法 10
3.1 女贞子炮制工艺正交试验设计 12
3.2 实验结果 13
3.3 结果分析 14
结论 15
参考文献 16
致谢 19
1 概述
1.1 研究背景
女贞子的应用由来已久，我国很多医药著作对其功能主治均有过记载，比如：《神农本草经》：“主补中，安五脏，养精神，除百疾，久服肥健”，《本草蒙荃》：“黑发黑须，强筋强力，多服补血祛风，”《本草纲目》：“强阴，健腰膝，明目，”《本草经疏》：“凉血、养血，”《本草正》：“养阴益肾，止虚汗，亦清肝火，可以明目止泪，治腰膝疼，通便和血，”《本草再新》：“养阴益肾，补气疏肝”，《广西中药志》：“
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女贞子的应用由来已久，我国很多医药著作对其功能主治均有过记载，比如：《神农本草经》：“主补中，安五脏，养精神，除百疾，久服肥健”，《本草蒙荃》：“黑发黑须，强筋强力，多服补血祛风，”《本草纲目》：“强阴，健腰膝，明目，”《本草经疏》：“凉血、养血，”《本草正》：“养阴益肾，止虚汗，亦清肝火，可以明目止泪，治腰膝疼，通便和血，”《本草再新》：“养阴益肾，补气疏肝”，《广西中药志》：“治老人大便虚秘[1]”等等。
现代研究表明，女贞子主要含有萜类（包括三萜类、环烯醚萜类)、苯乙醇类、苯丙素类、黄酮类、多糖、氨基酸、脂肪酸、挥发油类等化学成分[26]，目前已经分离的达100多种。女贞子具有多种药理功能包括：提高人体免疫功能、升白、抗炎抑菌、减少冠状动脉粥样硬化病变、降血糖、降眼压、护肝、抗癌、抗衰老等[78]。临床上主要用于白细胞减少症、冠心病、青光眼、乙肝、糖尿病、高血脂等病症。女贞子的炮制方法始见于宋代《疮疡》一书，随着历史的发展，炮制方法不断增加，沿用至今。现在女贞子的炮制方法，除了净制、蒸制、酒制、盐制外，还有醋制，全国各地的炮制规范中收载的大多是酒制。1963和1977年版《中国药典》均收载为酒炖法，1985~2015年版《中国药典》收载为酒炖法或酒蒸法，用酒量为每100kg女贞子用酒20kg。2015版《中国药典》对女贞子炮制工艺规定为“取净女贞子，照酒炖法或酒蒸法，炖至酒吸尽或蒸透[9]”。查阅文献关于女贞子炮制的工艺各地各法，工艺参数也不完备。目前女贞子的酒制，无论《中国药典》2015版还是各省市的中药饮片炮制规范，在是否闷润、蒸制时间、蒸制温度上都没有明确的规定，即便有规定，也是各地各法，没有统一标准，如此情况势必影响饮片的质量，造成临床疗效下降，因此有必要规范女贞子酒制工艺。
本课题以齐墩果酸和特女贞苷作为研究指标，利用正交试验法优选酒蒸女贞子炮制工艺参数，对女贞子酒制工艺进行规范研究，提高女贞子炮制过程的可控性，为女贞子炮制品临床应用的有效性提供保证。
1.2 女贞子研究现状
现代女贞子的炮制方法主要为去梗叶、洗净、酒蒸、酒炖、盐制、醋制等，其中以酒炖和酒蒸法应用较多。
《中国药典》2015版和《全国中药炮制规范》1988版均收录女贞子和酒女贞子两种炮制品。其中《中国药典》2015版规定：女贞子为 “除去杂质，洗净，干燥”；酒女贞子为“取净女贞子，照酒炖法或酒蒸法炖至酒洗尽或蒸透”。《全国中药炮制规范》1988版规定：女贞子为“取原药材，除去杂质及梗叶，洗炮制品净，干燥”。酒女贞子为“取净女贞子，用黄酒拌匀，稍闷后置蒸罐内密封，隔水炖或置适宜容器内蒸，至酒被吸尽，色泽黑润时，取出干燥，每女贞子100kg，用黄酒20kg[10]”。从以上可以看出，《中国药典》和《全国中药炮制规范》均未对女贞子酒炖和酒蒸的具体条件、时间作明确规定。
目前全国各省、市、自治区所颁布的地方性炮制规范，除云南、广东等地允许净制后生品入药，其余省、市、自治区均规定女贞子须炮制后入药，如上海市采用单蒸法，规定“将原药除去梗、泥屑等杂质。淘净，取出，沥干。置蒸具内蒸4小时，焖过夜。取出，干燥[11]”。其余省市炮制方法绝大多数采用酒炖和酒蒸，如北京市2005年炮制规范规定“取原药材，除去杂质，洗净，加黄酒拌匀，闷润2~4小时，装入蒸罐内，加水适量，密封，蒸15~24小时，至色泽黑润时，取出，晾干。每100kg净女贞子，用黄酒20kg”。《广东省中药炮制规范》规定“用酒拌匀，闷润，待酒被吸尽后，蒸2~4小时，取出，晾干[12]”。《安徽省中药饮品炮制规范》2005版规定“取净女贞子，照蒸法，用黄酒拌蒸至色泽黑润[13]”。《山东省中药炮制规范》规定“先将净女贞子用黄酒拌匀，闷润至黄酒被吸尽，放笼屉内，先用武火加热，待圆气后改用文火，蒸至色泽黑润时（约4 h），取出，摊晾至外皮微干，再将原汁拌入，吸尽，干燥[14]”。《江苏省中药饮片炮制规范》规定“取净女贞子加黄酒拌匀，闷润，待酒吸尽，蒸6 h，焖12 h，至黑色，取出，干燥[15]”。由此可见，虽然地方性炮制规范中对女贞子酒炖和酒蒸时间做出相关规定，但各地各法，没有统一标准，所以对女贞子酒炖和酒蒸工艺进行深入研究具有重要意义。
周爱香等[16]研究对比女贞子生品、酒炖品、酒蒸品、加压品、盐蒸品、醋蒸品、单蒸品七种炮制品在升白、抗炎、增强非特异性免疫功能等方面的作用，结果发现酒蒸品在各方面作用均优于生品及其它炮制品。张学兰等[17]以红景天苷和特女贞苷含量为评价指标，以黄酒用量、水用量、闷润时间和炖制时间为考察因素，通过正交试验，综合评价，优选最佳炮制工艺为取净女贞子，加其重量20%的黄酒，不加水，闷润1h，蒸汽加热炖制10h，并且在炮制过程中发现随着炮制时间增加特女贞苷含量降低，而红景天苷含量增加。徐维统等[18]采用正交试验，以齐墩果
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