拮抗菌在土壤和堆肥中的定殖研究
摘要：定殖和竞争能力强是土壤有益微生物发挥作用的前提条件,因此研究影响定殖的因素对土壤有益细菌的应用具有重要作用。本研究旨在研究番茄青枯菌拮抗菌--解淀粉芽孢杆菌SQY12在土壤和堆肥中的定殖能力。结果表明解淀粉芽孢杆菌SQY12在鸡粪中定殖最好，猪粪中次之，而在牛粪中稍差。在鸡粪中加入不同比例的氨基酸，均有利于拮抗菌的生长，而添加20%氨基酸溶液最适合拮抗菌生长。接种方式显著影响拮抗菌SQY12在番茄根际的定殖，采取淀粉菌悬液蘸根的方式比菌悬液灌根的方式显著促进拮抗菌在根际的定殖。通过本研究，为拮抗菌更有效更稳定的防治番茄青枯病提供了理论基础。
目录
摘要 2
关键词 2
Abstract 2
Key Words 2
引言 2
1材料与方法 3
1.1 供试材料 3
1.1.1供试菌种 3
1.1.2供试土壤 3
1.1.3供试有机肥 3
1.1.4培养基和试剂 3
1. 2 试验方法 3
1.2.1 接种菌液的制备 3
1.2.2 SQY12在不同堆肥中的定殖能力 4
1.2.3 不同猪肉氨基酸水解液的比例对SQY12在堆肥中的定殖的影响 4
1.2.4 不同接种方式对SQY12在土壤中的定殖能力的影响 4
1.2.4.1 番茄幼苗的准备 4
1.2.4.2 番茄植株移栽和处理 4
1.2.4.3 番茄植株根际土壤拮抗菌的测定 4
1.3 数据统计与分析 5
2 结果与分析 5
2.1 SQY12在不同堆肥中的定殖能力 5
2.2 不同猪肉氨基酸水解液的比例对SQY12在堆肥中的定殖的影响 5
2.3 不同接种方式对SQY12在土壤中的定殖能力的影响 6
3.讨论 6
4.结论 7
致谢 7
参考文献 7
拮抗菌在土壤和肥料中的定殖研究
农业资源与环境 宋宇琦
引言
引言
番茄青枯病是
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: %3^5`1^9`1^6^0`7^2#
由茄科雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum）引起的，是一种在世界范围普遍流行的细菌性土传病害[1]，严重危害番茄的生长过程。病原菌主要随植株病残体在田间越冬，并通过流水传播，在植株病残体根部或茎基部通过伤口侵入寄主，进入维管束内繁殖生长，堵塞导管进而影响营养和水分的运输，同时也可通过导管入侵细胞壁，使植株茎部出现不规则的病斑。番茄青枯病的发生在高温和高湿条件下会得到促进，久雨或雨后初晴，气温急剧升高时，通常会大规模发生病害[2]。
常用防治番茄青枯病的措施包括喷洒农药、改良土壤、嫁接、轮作等，但效果并不十分稳定[3][4][5]，而且化学农药的施用易造成环境的污染，影响人们的身体健康。生物防治因其环境友好而受到高度重视。目前报道的生防菌资源包括无（弱）致病力青枯菌[6]、芽孢杆菌属[4,7,8]、假单胞菌属[9,10]、嗜麦芽寡养假单胞菌[5]、不动杆菌属和肠杆菌属[11]、寡雄腐霉[12]和链霉菌属[3,13]等。生防菌的定殖是其与根围土壤土著微生物(包括病原菌)相互竞争营养及空间位点的过程［14][15］。
拮抗菌是能够抑制病原菌生长的一类有益微生物。近年来研究表明,植物体内存在大量对防治植物病害有较好效果的内生细菌,尤其是当化学药剂难以发挥作用时，对植物土传病害、维管束病害和系统性病害的防治具有其独特的优势。这些内生细菌在植物体内定殖,受外界环境的影响较小,作用效果较持久,而且许多内生细菌具有固氮、促生、抗旱等生物功能,具有良好开发利用前景[16][17]。
解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)为芽孢杆菌属，是一种与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)亲缘性很高的细菌，其在生长过程中能够产生一系列能够抑制真菌和细菌活性的代谢物[18]。因此是一种应用较为广泛、效果较好的拮抗细菌。
有益细菌在植物根际的定殖既与细菌本身的遗传特性息息相关，还与细菌所处的环境有重要关系，如植物根际土著微生物的种类与数量、土壤有益细菌与其他微生物间的竞争作用，其适应环境胁迫的能力也影响在根际的定殖。另外,土壤本身的性状也会影响有益细菌在植物根际的定殖能力,从而影响有益细菌在植物根际发挥作用[19]。
1 材料与方法
1.1 供试材料
1.1.1 供试菌种
拮抗菌株为解淀粉芽孢杆菌SQY12，病原菌为R. solanacearum ZJ3721均由本实验室提供。
1.1.2 供试土壤
番茄盆栽用土采自麒麟门水稻田，风干过筛备用。其基本性质为：有机质16.34g/kg，全氮630.63mg/kg，速效磷(P)14.24 mg/kg，速效钾112.78 mg/kg，pH为6.61。
1.1.3 供试有机肥
猪肉氨基酸水解液和腐熟的鸡粪均由江阴联业生物科技有限公司提供。
1.1.4 培养基和试剂
1.1.4.1 培养基
NA培养基：葡萄糖 10g，蛋白胨 5g，酵母粉 0.5g ,牛肉膏 3g，蒸馏水 1000mL
V8培养基（芽孢杆菌选择性培养基）：V8 326mL ，NaCl 33g ，葡萄糖 0.8g，溶解后用水补足至1000mL，倒平板前加入放线菌酮45g，多粘菌素B 22.5g
1.1.5.1 试剂
多粘菌素B
放线菌酮
淀粉
1.2 试验方法
1.2.1接种菌液的制备
将拮抗菌SQY12在NA液体培养基里摇瓶培养。拮抗菌SQY12按过夜培养的种子液的2%量接种，于30℃，170 rpm震荡培养3天，8000 rpm离心10 min收集菌体，用水重悬，浓度为108 CFU/mL。
1.2.2 SQY12在不同堆肥中的定殖能力
试验方案:
处理1：SQY12菌悬液+猪粪
处理2：SQY12菌悬液+鸡粪
处理3：SQY12菌悬液+牛粪
向不同肥料中接入同等浓度的拮抗菌菌悬液(10%接种量)，控制好适宜的堆肥温度和湿度，发酵6天后用V8培养基，稀释涂布测定拮抗菌的数量，筛选出拮抗菌定殖效果最好的肥料。
1.2.3 不同猪肉氨基酸水解液的比例对SQY12在堆肥中的定殖的影响
目录
摘要 2
关键词 2
Abstract 2
Key Words 2
引言 2
1材料与方法 3
1.1 供试材料 3
1.1.1供试菌种 3
1.1.2供试土壤 3
1.1.3供试有机肥 3
1.1.4培养基和试剂 3
1. 2 试验方法 3
1.2.1 接种菌液的制备 3
1.2.2 SQY12在不同堆肥中的定殖能力 4
1.2.3 不同猪肉氨基酸水解液的比例对SQY12在堆肥中的定殖的影响 4
1.2.4 不同接种方式对SQY12在土壤中的定殖能力的影响 4
1.2.4.1 番茄幼苗的准备 4
1.2.4.2 番茄植株移栽和处理 4
1.2.4.3 番茄植株根际土壤拮抗菌的测定 4
1.3 数据统计与分析 5
2 结果与分析 5
2.1 SQY12在不同堆肥中的定殖能力 5
2.2 不同猪肉氨基酸水解液的比例对SQY12在堆肥中的定殖的影响 5
2.3 不同接种方式对SQY12在土壤中的定殖能力的影响 6
3.讨论 6
4.结论 7
致谢 7
参考文献 7
拮抗菌在土壤和肥料中的定殖研究
农业资源与环境 宋宇琦
引言
引言
番茄青枯病是
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: %3^5`1^9`1^6^0`7^2#
由茄科雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum）引起的，是一种在世界范围普遍流行的细菌性土传病害[1]，严重危害番茄的生长过程。病原菌主要随植株病残体在田间越冬，并通过流水传播，在植株病残体根部或茎基部通过伤口侵入寄主，进入维管束内繁殖生长，堵塞导管进而影响营养和水分的运输，同时也可通过导管入侵细胞壁，使植株茎部出现不规则的病斑。番茄青枯病的发生在高温和高湿条件下会得到促进，久雨或雨后初晴，气温急剧升高时，通常会大规模发生病害[2]。
常用防治番茄青枯病的措施包括喷洒农药、改良土壤、嫁接、轮作等，但效果并不十分稳定[3][4][5]，而且化学农药的施用易造成环境的污染，影响人们的身体健康。生物防治因其环境友好而受到高度重视。目前报道的生防菌资源包括无（弱）致病力青枯菌[6]、芽孢杆菌属[4,7,8]、假单胞菌属[9,10]、嗜麦芽寡养假单胞菌[5]、不动杆菌属和肠杆菌属[11]、寡雄腐霉[12]和链霉菌属[3,13]等。生防菌的定殖是其与根围土壤土著微生物(包括病原菌)相互竞争营养及空间位点的过程［14][15］。
拮抗菌是能够抑制病原菌生长的一类有益微生物。近年来研究表明,植物体内存在大量对防治植物病害有较好效果的内生细菌,尤其是当化学药剂难以发挥作用时，对植物土传病害、维管束病害和系统性病害的防治具有其独特的优势。这些内生细菌在植物体内定殖,受外界环境的影响较小,作用效果较持久,而且许多内生细菌具有固氮、促生、抗旱等生物功能,具有良好开发利用前景[16][17]。
解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)为芽孢杆菌属，是一种与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)亲缘性很高的细菌，其在生长过程中能够产生一系列能够抑制真菌和细菌活性的代谢物[18]。因此是一种应用较为广泛、效果较好的拮抗细菌。
有益细菌在植物根际的定殖既与细菌本身的遗传特性息息相关，还与细菌所处的环境有重要关系，如植物根际土著微生物的种类与数量、土壤有益细菌与其他微生物间的竞争作用，其适应环境胁迫的能力也影响在根际的定殖。另外,土壤本身的性状也会影响有益细菌在植物根际的定殖能力,从而影响有益细菌在植物根际发挥作用[19]。
1 材料与方法
1.1 供试材料
1.1.1 供试菌种
拮抗菌株为解淀粉芽孢杆菌SQY12，病原菌为R. solanacearum ZJ3721均由本实验室提供。
1.1.2 供试土壤
番茄盆栽用土采自麒麟门水稻田，风干过筛备用。其基本性质为：有机质16.34g/kg，全氮630.63mg/kg，速效磷(P)14.24 mg/kg，速效钾112.78 mg/kg，pH为6.61。
1.1.3 供试有机肥
猪肉氨基酸水解液和腐熟的鸡粪均由江阴联业生物科技有限公司提供。
1.1.4 培养基和试剂
1.1.4.1 培养基
NA培养基：葡萄糖 10g，蛋白胨 5g，酵母粉 0.5g ,牛肉膏 3g，蒸馏水 1000mL
V8培养基（芽孢杆菌选择性培养基）：V8 326mL ，NaCl 33g ，葡萄糖 0.8g，溶解后用水补足至1000mL，倒平板前加入放线菌酮45g，多粘菌素B 22.5g
1.1.5.1 试剂
多粘菌素B
放线菌酮
淀粉
1.2 试验方法
1.2.1接种菌液的制备
将拮抗菌SQY12在NA液体培养基里摇瓶培养。拮抗菌SQY12按过夜培养的种子液的2%量接种，于30℃，170 rpm震荡培养3天，8000 rpm离心10 min收集菌体，用水重悬，浓度为108 CFU/mL。
1.2.2 SQY12在不同堆肥中的定殖能力
试验方案:
处理1：SQY12菌悬液+猪粪
处理2：SQY12菌悬液+鸡粪
处理3：SQY12菌悬液+牛粪
向不同肥料中接入同等浓度的拮抗菌菌悬液(10%接种量)，控制好适宜的堆肥温度和湿度，发酵6天后用V8培养基，稀释涂布测定拮抗菌的数量，筛选出拮抗菌定殖效果最好的肥料。
1.2.3 不同猪肉氨基酸水解液的比例对SQY12在堆肥中的定殖的影响
版权保护: 本文由 hbsrm.com编辑，转载请保留链接: www.hbsrm.com/hxycl/hxyhj/358.html
