雪莲花黄酮含量测定(附件)
目的对乌鲁木齐雪莲、西宁雪莲及拉萨雪莲中总黄酮含量及其抗氧化活性进行研究。方法采用70 %的甲醇对3地雪莲的总黄酮进行提取，以芦丁为对照品，采用NaNO3-AL(NO3)3-NaOH比色法进行黄酮含量测定；以没食子酸为对照品，采用福林酚试剂法，对总酚含量进行定量测定；采用DPPH自由基清除法、超氧阴离子清除法对三者的抗氧化能力进行比较。结果乌鲁木齐雪莲、拉萨雪莲及西宁雪莲总黄酮含量分别为14.00 %、13.33 %、8.25 %，总酚酸含量分别为55.05 %、42.35 %、32.89 %；三种雪莲清除DPPH?的IC50分别为2.88、0.03、0.06 mg/mL(VC=0.02 mg/mL)；三种雪莲清除O2-?的IC50分别为6.48、5.81、3.05 mg/mL(VC=2.31 mg/mL)。结论乌鲁木齐天山雪莲总黄酮量最高，三种雪莲均具有较强的抗氧化能力。关键词 雪莲，总黄酮，含量测定，抗氧化活性
目 录
1 引言1
1.1 雪莲花总黄酮含量测定研究进展1
1.2 雪莲花抗氧化能力研究进展1
2 实验部分4
2.1 实验药材4
2.2 实验仪器4
2.3 实验设备4
2.4 实验试剂5
2.5 黄酮含量测定6
2.6 抗氧化能力测定8
3 结果与讨论8
3.1 雪莲黄酮含量测定结果8
3.2 雪莲总酚含量测定结果11
3.3 DPPH?清除能力测定结果13
3.4 超氧阴离子清除能力测定结果14
结 论15
致 谢16
参考文献17
1 引言
雪莲花Saussurea involucrata (Kar. et Kir.) Sch. Bip. 为菊科凤毛菊属雪莲亚属的草本植物[1]，生长在海拔4800 m雪山雪线附近的碎石间，具有耐低温抗风寒的特性。植株一般高达15 cm，幼时全株有香味。茎粗厚，基部有纤维状残叶基。叶密集丛生，近革质、茎叶瓦生、圆形或倒披针形、矩圆形、无柄、边有锯齿。10枚头状花序，聚生茎顶呈球形 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: #351916072#
，外包以10余片大形膜质苞叶，苞叶微透明，淡黄绿色，形如花瓣，盛开时，如大朵莲花，故名雪莲[2]。
雪莲花有20余种，绝大部分产于我国青藏高原及其毗邻地区，在我国主要分布在新疆、西藏等省区[3]。清代《本草纲目拾遗》中已有对雪莲花的记载，称雪莲“性大热，能补精益阳”[4]。现代药理学研究发现，黄酮类、生物碱类、内酯类、甾醇类、多糖及挥发油类等化合物是其主要成分，雪莲花具有抗疲劳、抗缺氧、抗肿瘤、提高免疫力及改善心血管系统等活性[5]。本文选用青海、西藏、新疆三地雪莲花，通过查找相关文献，对三种不同产地雪莲总黄酮的含量及抗氧化能力进行总结研究，旨在比较不同产地雪莲的含量差异，为质量评价奠定基础。
1.1 三种雪莲花中总黄酮的含量测定
雪莲花中含有的黄酮类化合物，具有增强免疫、抗氧化、抗炎、镇痛等功效，主治炭疽、风湿性关节炎、高山反应等症[3]。马利锋[5]等以西藏雪莲为原料、乙醇为溶剂，采用总黄酮的最优超声提取工艺提取50 min，得到的黄酮含量为4.246 %。韩鸿萍[3]等用用超声波法提取青海产水母雪莲中总黄酮，并采用NaNO3AL(NO3)3NaOH体系分光光度法测定的其含量，结果测得的黄酮含量为1.0231 %。蒙萍[6]等以新疆天山雪莲为原料，采用总黄酮的超声提取工艺，用体积分数70 %的乙醇连续提取3次，结果得到总黄酮质量分数44.18 %。虽然已有很多对于不同产地雪莲黄酮含量测定的报道，但由于对不同产地雪莲黄酮含量的比较研究还并不完善，故雪莲黄酮含量测定的研究仍需继续进行。
1.2 三种雪莲花抗氧化能力的测定
1.2.1 对DPPH自由基(DPPH)清除能力的测定
DPPH自由基在有机溶剂中表现出稳定的状态，其甲醇溶液显深紫色，在517 nm波长处有强吸收峰，当其与抗自由基活性物质的孤对电子配对时，吸收消失或减弱，通过测定吸收减弱的程度，从而评价自由基清除剂清除自由基的能力[7]。马利锋[5]等研究了西藏雪莲总黄酮对DPPH的清除作用，并以Vc作为阳性对照。结果表明，西藏雪莲总黄酮对DPPH的清除效果几乎与Vc相同，量效关系良好，其最大清除率达99.5 %，说明西藏雪莲总黄酮的抗氧化性能较好。蒙萍[6]等以新疆大苞雪莲为原料，采用文献[8]的方法研究了新疆产大苞雪莲总黄酮对DPPH的清除能力，结果表明，总黄酮浓度在20 mgL1，随着大苞雪莲总黄酮浓度的增加，其对DPPH的清除作用逐渐增强，并且有较好的量效关系。史俊友等以青海产3种雪莲为原料，参照杨怀霞[9]等报道的方法，研究其对DPPH的清除能力。结果表明，在25~300 μg/mL范围内，随着总黄酮加入量的增加，该提取物对DPPH的清除率逐渐增加；当总黄酮质量浓度≥400 μg/mL时，对DPPH的清除率趋于平缓，3种雪莲粗黄酮对DPPH的清除能力均出现此种趋势[7]。
1.2.2 对超氧阴离子的清除能力(SRSA)测定
超氧阴离子自由基O2，具有很强的生物活性。适量O2对细胞的分裂、生长、消炎、解毒等起积极作用，但过剩会损伤细胞膜，导致细胞解体和死亡[10]。抗氧化剂可直接清除过剩自由基，或通过增强体内抗氧化系统起抗氧化作用[11,12]。蒙萍[6]等以新疆产大苞雪莲为原料，采用NADH/NBT/PMS体系，研究大苞雪莲对超氧阴离子的清除能力。结果表明，大苞雪莲总黄酮在50 mgL1对O2的清除呈现较好的线性关系。
1.2.3 还原力的测定
蒙萍[7]等以新疆产大苞雪莲为原料，测定其总还原力。结果表明，在大苞雪莲总黄酮质量浓度为100 mgL1时，随浓度增大吸光度提高，与VC作用趋势一致。史俊友等以青海产3种雪莲为原料，通过测定其将铁氰化钾还原成亚铁氰化钾的能力。结果表明，随着总黄酮质量浓度的增加，吸光度逐渐增大，还原力逐渐增强。3种雪莲花黄酮总还原力的大小均表现此种趋势。参考谢好贵[13]的方法白壮东[14]等以西藏产雪莲为原料，通过对Fe3+还原能力的测定是来考察其还原能力，在700 nm处的吸收值越高，表示还原能力越强。研究结果表明，天山雪莲不同部位提取物对Fe3+均有显著地还原能力。
综上所述，本文对不同产地雪莲总黄酮含量的测定和抗氧化活性研究的文献报道进行了初步总结。虽然已有很多对于不同产地雪莲黄酮含量测定的报道，但由于对不同产地、不同种类的雪莲黄酮含量的比较研究还有所欠缺，因此有关雪莲黄酮含量测定的研究还需继续进行。由于雪莲总黄酮具有抗氧化性，因此若能对雪莲总黄酮抗氧化活性进行进一步研究，将有望成为新型的天然抗氧剂，应用于食品和医药等领域。但由于对不同产地雪莲的抗氧化活性研究有所欠缺，故有关雪莲总黄酮抗氧化活性的进一步研究工作还需继续进行。
目 录
1 引言1
1.1 雪莲花总黄酮含量测定研究进展1
1.2 雪莲花抗氧化能力研究进展1
2 实验部分4
2.1 实验药材4
2.2 实验仪器4
2.3 实验设备4
2.4 实验试剂5
2.5 黄酮含量测定6
2.6 抗氧化能力测定8
3 结果与讨论8
3.1 雪莲黄酮含量测定结果8
3.2 雪莲总酚含量测定结果11
3.3 DPPH?清除能力测定结果13
3.4 超氧阴离子清除能力测定结果14
结 论15
致 谢16
参考文献17
1 引言
雪莲花Saussurea involucrata (Kar. et Kir.) Sch. Bip. 为菊科凤毛菊属雪莲亚属的草本植物[1]，生长在海拔4800 m雪山雪线附近的碎石间，具有耐低温抗风寒的特性。植株一般高达15 cm，幼时全株有香味。茎粗厚，基部有纤维状残叶基。叶密集丛生，近革质、茎叶瓦生、圆形或倒披针形、矩圆形、无柄、边有锯齿。10枚头状花序，聚生茎顶呈球形 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: #351916072#
，外包以10余片大形膜质苞叶，苞叶微透明，淡黄绿色，形如花瓣，盛开时，如大朵莲花，故名雪莲[2]。
雪莲花有20余种，绝大部分产于我国青藏高原及其毗邻地区，在我国主要分布在新疆、西藏等省区[3]。清代《本草纲目拾遗》中已有对雪莲花的记载，称雪莲“性大热，能补精益阳”[4]。现代药理学研究发现，黄酮类、生物碱类、内酯类、甾醇类、多糖及挥发油类等化合物是其主要成分，雪莲花具有抗疲劳、抗缺氧、抗肿瘤、提高免疫力及改善心血管系统等活性[5]。本文选用青海、西藏、新疆三地雪莲花，通过查找相关文献，对三种不同产地雪莲总黄酮的含量及抗氧化能力进行总结研究，旨在比较不同产地雪莲的含量差异，为质量评价奠定基础。
1.1 三种雪莲花中总黄酮的含量测定
雪莲花中含有的黄酮类化合物，具有增强免疫、抗氧化、抗炎、镇痛等功效，主治炭疽、风湿性关节炎、高山反应等症[3]。马利锋[5]等以西藏雪莲为原料、乙醇为溶剂，采用总黄酮的最优超声提取工艺提取50 min，得到的黄酮含量为4.246 %。韩鸿萍[3]等用用超声波法提取青海产水母雪莲中总黄酮，并采用NaNO3AL(NO3)3NaOH体系分光光度法测定的其含量，结果测得的黄酮含量为1.0231 %。蒙萍[6]等以新疆天山雪莲为原料，采用总黄酮的超声提取工艺，用体积分数70 %的乙醇连续提取3次，结果得到总黄酮质量分数44.18 %。虽然已有很多对于不同产地雪莲黄酮含量测定的报道，但由于对不同产地雪莲黄酮含量的比较研究还并不完善，故雪莲黄酮含量测定的研究仍需继续进行。
1.2 三种雪莲花抗氧化能力的测定
1.2.1 对DPPH自由基(DPPH)清除能力的测定
DPPH自由基在有机溶剂中表现出稳定的状态，其甲醇溶液显深紫色，在517 nm波长处有强吸收峰，当其与抗自由基活性物质的孤对电子配对时，吸收消失或减弱，通过测定吸收减弱的程度，从而评价自由基清除剂清除自由基的能力[7]。马利锋[5]等研究了西藏雪莲总黄酮对DPPH的清除作用，并以Vc作为阳性对照。结果表明，西藏雪莲总黄酮对DPPH的清除效果几乎与Vc相同，量效关系良好，其最大清除率达99.5 %，说明西藏雪莲总黄酮的抗氧化性能较好。蒙萍[6]等以新疆大苞雪莲为原料，采用文献[8]的方法研究了新疆产大苞雪莲总黄酮对DPPH的清除能力，结果表明，总黄酮浓度在20 mgL1，随着大苞雪莲总黄酮浓度的增加，其对DPPH的清除作用逐渐增强，并且有较好的量效关系。史俊友等以青海产3种雪莲为原料，参照杨怀霞[9]等报道的方法，研究其对DPPH的清除能力。结果表明，在25~300 μg/mL范围内，随着总黄酮加入量的增加，该提取物对DPPH的清除率逐渐增加；当总黄酮质量浓度≥400 μg/mL时，对DPPH的清除率趋于平缓，3种雪莲粗黄酮对DPPH的清除能力均出现此种趋势[7]。
1.2.2 对超氧阴离子的清除能力(SRSA)测定
超氧阴离子自由基O2，具有很强的生物活性。适量O2对细胞的分裂、生长、消炎、解毒等起积极作用，但过剩会损伤细胞膜，导致细胞解体和死亡[10]。抗氧化剂可直接清除过剩自由基，或通过增强体内抗氧化系统起抗氧化作用[11,12]。蒙萍[6]等以新疆产大苞雪莲为原料，采用NADH/NBT/PMS体系，研究大苞雪莲对超氧阴离子的清除能力。结果表明，大苞雪莲总黄酮在50 mgL1对O2的清除呈现较好的线性关系。
1.2.3 还原力的测定
蒙萍[7]等以新疆产大苞雪莲为原料，测定其总还原力。结果表明，在大苞雪莲总黄酮质量浓度为100 mgL1时，随浓度增大吸光度提高，与VC作用趋势一致。史俊友等以青海产3种雪莲为原料，通过测定其将铁氰化钾还原成亚铁氰化钾的能力。结果表明，随着总黄酮质量浓度的增加，吸光度逐渐增大，还原力逐渐增强。3种雪莲花黄酮总还原力的大小均表现此种趋势。参考谢好贵[13]的方法白壮东[14]等以西藏产雪莲为原料，通过对Fe3+还原能力的测定是来考察其还原能力，在700 nm处的吸收值越高，表示还原能力越强。研究结果表明，天山雪莲不同部位提取物对Fe3+均有显著地还原能力。
综上所述，本文对不同产地雪莲总黄酮含量的测定和抗氧化活性研究的文献报道进行了初步总结。虽然已有很多对于不同产地雪莲黄酮含量测定的报道，但由于对不同产地、不同种类的雪莲黄酮含量的比较研究还有所欠缺，因此有关雪莲黄酮含量测定的研究还需继续进行。由于雪莲总黄酮具有抗氧化性，因此若能对雪莲总黄酮抗氧化活性进行进一步研究，将有望成为新型的天然抗氧剂，应用于食品和医药等领域。但由于对不同产地雪莲的抗氧化活性研究有所欠缺，故有关雪莲总黄酮抗氧化活性的进一步研究工作还需继续进行。
版权保护: 本文由 hbsrm.com编辑，转载请保留链接: www.hbsrm.com/yxlw/zygc/422.html
