铁皮石斛和观赏石斛对小鼠体液免疫活性的对比研究(附件)
摘 要铁皮石斛是我国一种传统名贵的中草药，其中的多糖成分具有较好的免疫调节活性，铁皮石斛繁殖能力极低和人们对铁皮石斛的过度采集，已经导致铁皮石斛濒临灭绝，如今铁皮石斛是国家二级保护濒危植物。而现在已经有很多企业开始用观赏石斛粗多糖来代替，探索观赏石斛粗多糖能否代替铁皮石斛粗多糖在免疫调节活性上起到作用，具有重要意义。这篇文章主要研究了观赏石斛粗多糖与铁皮石斛粗多糖对小鼠体液免疫的作用药效对比。另外一点是探索观赏石斛与自然生长小鼠做对比看其是否有提高体液免疫的作用。主要内容分为以下个部分1、多糖含量的测定，以水提醇沉的方法对铁皮石斛和观赏石斛多糖进行粗糖的提取。然后用苯酚硫酸法对所提出的粗糖进行含量测定。结果测得本实验所提的铁皮石斛中多糖中多糖含量为57.58% ，观赏石斛中的多糖含量为33.67% 。 2、为小鼠口服30天增强胸腺产生T淋巴细胞和胸腺素与与血液中的B淋巴细胞产生抗体的增多，通过脏器指数来分析免疫调节活性。3、给小鼠30天口服石斛粗多糖，取眼球血，通过半数溶血值Hc50值测定血清血溶素，通过血清血溶素Hc50值比较来分析石斛粗多糖免疫调节活性。经过实验得到数据结果分析，不同浓度观赏石斛粗多糖对小鼠体液免疫有一定的抑制作用而不同浓度铁皮石斛粗多糖对小鼠体液免疫有促进作用。该结果可以为观赏石斛作为药用价值提供参考。
目 录
1绪论 1
1.1立题依据 1
1.2铁皮石斛概况 1
1.3观赏石斛概况 2
1.4石斛多糖免疫研究进展 3
2实验内容与方法 4
2.1实验内容 4
2.2实验方法 4
2.2.1实验材料 4
2.2.2铁皮石斛与观赏石斛多糖提取及含量测定 6
2.2.3石斛多糖对小鼠脏器指数及体重实验方法 8
2.2.4石斛多糖对血清血溶素实验方法 9
3 结果分析 11
3.1两只石斛多糖对小鼠体重的影响 11
3.2两钟石斛多糖对脏器指数的影响 12
3.3两种石斛多糖对小鼠血溶素的影响 15
4 结论与展望 17
参考文献 19
致谢 21
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
1 绪论
1.1立题依据
石斛属为兰科第二大属，石斛是石斛属多年生草本植物全世界有石斛多种，我国也有近多种石斛属植物其中有多种作为常用中药入药[1]。如：金铁石斛、环草石斛和铁皮石斛等较为出名，此外，享有盛誉的还有黄草石斛、霍山石斛和马鞭石斛等[2]。在我国传统医学中，石斛属植物的新鲜或干燥莲被收做药用，统称石斛[7]。我国传统中医理论认为石斛性甘、味淡、微寒，其具有益胃生津、润肺止咳、滋阴清热、明目强身等功效，石斛一直以来被视为我国传统名贵的中药材，在民间一直享有“中华仙草、植物黄金”的美誉[2]。
随着生活水平的提高，人们餐桌上对菜的美观也是要求很多，盘子上都有花朵，而这个花朵是观赏石斛的花，观赏石斛可以一年四季采摘花，而观赏石斛生长一两年后开花也少了，而种植的人会继续种植。把种植一两年的挖掉，当作垃圾来处理，这是一种对资源的浪费。而现在很多企业为了找到廉价的替代品、减少对野生资源的破坏对观赏石斛开始药用，对于这样的情况我们进一步来验证观赏石斛在药用方面有没有价值。来充分更好的利用资源。
近年来，铁皮石斛的同属石斛粗多糖的研究备受重视。寻找能代替铁皮石斛多糖的同属石斛。这已经成为保护濒危野生药材的方法之一。然而代替品在使用过程的功效程度还需要进一步验证。
现今我国很多企业为了减少企业的成本与减少资源的浪费对观赏石斛的开始药用，其中观赏石斛的药用价值在我国还没有明确的指出。石斛粗多糖提取物是否能提高体液免疫活性还是未知，而这次铁皮石斛与观赏石斛粗多糖提取物对小鼠体液免疫的比较。将会对观赏石斛药用价值与充分对资源合理的利用起到了很大的促进作用。
1.2铁皮石斛概况
铁皮石斛为兰科石斛属植物铁皮石斛的干燥茎，因表皮呈铁绿色而得名。为兰科多年生草本，是常用的名贵中药，能滋阴清热、生津益胃，常用于热病伤津、口干烦渴、病后虚热等多种病证[3]。铁皮石斛在《神农本草经》中即列为上品，在《本草纲目》中已经列为药用。由于铁皮石斛功效确切，2010版《中华人民共和国药典》（一部）将其作为新增品种单独列出，与中药石斛区别开来[4]。
铁皮石斛分布在中国秦岭淮河以南。野生铁皮石斛的生长环境比较特殊，生于1003000米之间的山地半阴湿岩石和树皮上，喜温暖半湿润的环境，不耐寒冷的气候，生长环境要求比较高，而且自然繁殖率特别低[5]。但是人们由于其药用价值对铁皮石斛过度的采挖以及自然生境的不断丧失，野生铁皮石斛数量越来越稀少[6]。
如今，人们对铁皮石斛的药理作用和化学成分进行了很多的试验研究，结果发现铁皮石斛的化学成分存在多样[2]。经过很多试验研究证明，铁皮石斛中，多糖和醇溶性物是铁皮石斛的主要成分。另外在药理方面，很多人经过药理实验研究证明,铁皮石斛的粗多糖,具有提高免疫力的功能、抗氧化的功能、抑制肿瘤和降低血糖等作用。例如：吴维佳的铁皮石斛对小鼠免疫力的影响，实验研究说明铁皮石斛有着增强机体免疫力、抗氧化、抗衰老的作用[7]。
近年来铁皮石斛的栽培虽然已经成熟[8]，但其药用价值比较高需求量很大，市场上的铁皮石斛价格还是很昂贵。人们就在思索能不能找到与铁皮石斛药效相似的的代替品，这样一来既能解决市场上需求量很大，价格昂贵的问题；又能解决对野生铁皮石斛资源的保护问题。于是就有学者开始对观赏石斛在药用价值上开始探索研究[9]。
1.3观赏石斛概况
观赏石斛花姿优美、花色鲜艳、花期长种类繁多，深受各国人们的喜爱，被称为“四大观赏洋兰”之一，还有很多国家将其定位“父亲节之花”[2]。观赏石斛主要用于装饰例如；高档插花、美食菜肴上碟子、胸花、新娘的捧花和花车的等。
在药理和化学成分的领域，人们还在进一步探讨研究。观赏石斛化学成分大多为极性大糖苷成分、3个连卞类化合物。例：廖格，张友源等人对观赏石斛与药用石斛HPLC指纹图谱及生物活性的比较，说明观赏石斛有极性大的糖苷成分、连卞类化合物?个菲类[10]。
观赏石斛的种植栽培技术在我国已经慢慢成熟[11]。但是对观赏石斛的利用还是没能充分发挥，人们还是只能将其当作一种视觉上的效果发挥[12]。而有很多的观赏石斛根茎只能当作一种垃圾处理，给种植的人带来的只是一种负担，没有利益。从自然资源来讲观赏石斛的根茎处理，是对资源的浪费，如果能更好的开发利用观赏石斛的根茎，对于种植人员来说有是一种经济来源而不是负担；从资源保护来讲是对资源的更优化利用； 从企业来讲这是一种廉价的资源利用，减少了企业的支出。
1.4石斛多糖免疫研究进展
药用石斛粗多糖在免疫调节作用上有很多实验研究证实，药用石斛粗多糖是一种免疫活性调节剂，药用石斛粗多糖主要是通过刺激各种免疫活性细胞，让免疫细胞进一步的繁殖、分化和成熟，从而来使机体各项免疫系统回复平衡或上升状态。很多实验研究证实，药用石斛粗多糖主要通过免疫调节活性表现出的药理作用，另一方面是通过免疫功能和多种细胞因子的提高增加体液免疫。药用石斛粗多糖它可以激活淋巴细胞和淋巴B细胞。例如：范益君，淳泽等人研究实验结果发现石斛多糖在体外可以显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖[13]。
药用石斛多糖可以激活补体，补体是血液中的蛋白质，这种蛋白质具有一定的酶原活性，这种蛋白质协同抗体来消灭抗原微生物和协助吞噬细胞来吞噬抗原微生物，淋巴因子和自然杀伤细胞也能促进细胞因子的生成，来活化补体，从而来对机体进行免疫活性调节[14]。促进脾淋巴细胞的增殖，使其具有一定的免疫增强功能，药用石斛多糖在免疫活性调节起到作用，已经有很多学者实验证实:如铁皮石斛迭鞘石斛多糖在免疫活性调节上起到一定作用[15]。
观赏石斛多糖在免疫调节作用的研究探索在国内目前是一个很大的空缺，这方面仍需学者们不断地探索研究。
2实验内容与方法
目 录
1绪论 1
1.1立题依据 1
1.2铁皮石斛概况 1
1.3观赏石斛概况 2
1.4石斛多糖免疫研究进展 3
2实验内容与方法 4
2.1实验内容 4
2.2实验方法 4
2.2.1实验材料 4
2.2.2铁皮石斛与观赏石斛多糖提取及含量测定 6
2.2.3石斛多糖对小鼠脏器指数及体重实验方法 8
2.2.4石斛多糖对血清血溶素实验方法 9
3 结果分析 11
3.1两只石斛多糖对小鼠体重的影响 11
3.2两钟石斛多糖对脏器指数的影响 12
3.3两种石斛多糖对小鼠血溶素的影响 15
4 结论与展望 17
参考文献 19
致谢 21
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
1 绪论
1.1立题依据
石斛属为兰科第二大属，石斛是石斛属多年生草本植物全世界有石斛多种，我国也有近多种石斛属植物其中有多种作为常用中药入药[1]。如：金铁石斛、环草石斛和铁皮石斛等较为出名，此外，享有盛誉的还有黄草石斛、霍山石斛和马鞭石斛等[2]。在我国传统医学中，石斛属植物的新鲜或干燥莲被收做药用，统称石斛[7]。我国传统中医理论认为石斛性甘、味淡、微寒，其具有益胃生津、润肺止咳、滋阴清热、明目强身等功效，石斛一直以来被视为我国传统名贵的中药材，在民间一直享有“中华仙草、植物黄金”的美誉[2]。
随着生活水平的提高，人们餐桌上对菜的美观也是要求很多，盘子上都有花朵，而这个花朵是观赏石斛的花，观赏石斛可以一年四季采摘花，而观赏石斛生长一两年后开花也少了，而种植的人会继续种植。把种植一两年的挖掉，当作垃圾来处理，这是一种对资源的浪费。而现在很多企业为了找到廉价的替代品、减少对野生资源的破坏对观赏石斛开始药用，对于这样的情况我们进一步来验证观赏石斛在药用方面有没有价值。来充分更好的利用资源。
近年来，铁皮石斛的同属石斛粗多糖的研究备受重视。寻找能代替铁皮石斛多糖的同属石斛。这已经成为保护濒危野生药材的方法之一。然而代替品在使用过程的功效程度还需要进一步验证。
现今我国很多企业为了减少企业的成本与减少资源的浪费对观赏石斛的开始药用，其中观赏石斛的药用价值在我国还没有明确的指出。石斛粗多糖提取物是否能提高体液免疫活性还是未知，而这次铁皮石斛与观赏石斛粗多糖提取物对小鼠体液免疫的比较。将会对观赏石斛药用价值与充分对资源合理的利用起到了很大的促进作用。
1.2铁皮石斛概况
铁皮石斛为兰科石斛属植物铁皮石斛的干燥茎，因表皮呈铁绿色而得名。为兰科多年生草本，是常用的名贵中药，能滋阴清热、生津益胃，常用于热病伤津、口干烦渴、病后虚热等多种病证[3]。铁皮石斛在《神农本草经》中即列为上品，在《本草纲目》中已经列为药用。由于铁皮石斛功效确切，2010版《中华人民共和国药典》（一部）将其作为新增品种单独列出，与中药石斛区别开来[4]。
铁皮石斛分布在中国秦岭淮河以南。野生铁皮石斛的生长环境比较特殊，生于1003000米之间的山地半阴湿岩石和树皮上，喜温暖半湿润的环境，不耐寒冷的气候，生长环境要求比较高，而且自然繁殖率特别低[5]。但是人们由于其药用价值对铁皮石斛过度的采挖以及自然生境的不断丧失，野生铁皮石斛数量越来越稀少[6]。
如今，人们对铁皮石斛的药理作用和化学成分进行了很多的试验研究，结果发现铁皮石斛的化学成分存在多样[2]。经过很多试验研究证明，铁皮石斛中，多糖和醇溶性物是铁皮石斛的主要成分。另外在药理方面，很多人经过药理实验研究证明,铁皮石斛的粗多糖,具有提高免疫力的功能、抗氧化的功能、抑制肿瘤和降低血糖等作用。例如：吴维佳的铁皮石斛对小鼠免疫力的影响，实验研究说明铁皮石斛有着增强机体免疫力、抗氧化、抗衰老的作用[7]。
近年来铁皮石斛的栽培虽然已经成熟[8]，但其药用价值比较高需求量很大，市场上的铁皮石斛价格还是很昂贵。人们就在思索能不能找到与铁皮石斛药效相似的的代替品，这样一来既能解决市场上需求量很大，价格昂贵的问题；又能解决对野生铁皮石斛资源的保护问题。于是就有学者开始对观赏石斛在药用价值上开始探索研究[9]。
1.3观赏石斛概况
观赏石斛花姿优美、花色鲜艳、花期长种类繁多，深受各国人们的喜爱，被称为“四大观赏洋兰”之一，还有很多国家将其定位“父亲节之花”[2]。观赏石斛主要用于装饰例如；高档插花、美食菜肴上碟子、胸花、新娘的捧花和花车的等。
在药理和化学成分的领域，人们还在进一步探讨研究。观赏石斛化学成分大多为极性大糖苷成分、3个连卞类化合物。例：廖格，张友源等人对观赏石斛与药用石斛HPLC指纹图谱及生物活性的比较，说明观赏石斛有极性大的糖苷成分、连卞类化合物?个菲类[10]。
观赏石斛的种植栽培技术在我国已经慢慢成熟[11]。但是对观赏石斛的利用还是没能充分发挥，人们还是只能将其当作一种视觉上的效果发挥[12]。而有很多的观赏石斛根茎只能当作一种垃圾处理，给种植的人带来的只是一种负担，没有利益。从自然资源来讲观赏石斛的根茎处理，是对资源的浪费，如果能更好的开发利用观赏石斛的根茎，对于种植人员来说有是一种经济来源而不是负担；从资源保护来讲是对资源的更优化利用； 从企业来讲这是一种廉价的资源利用，减少了企业的支出。
1.4石斛多糖免疫研究进展
药用石斛粗多糖在免疫调节作用上有很多实验研究证实，药用石斛粗多糖是一种免疫活性调节剂，药用石斛粗多糖主要是通过刺激各种免疫活性细胞，让免疫细胞进一步的繁殖、分化和成熟，从而来使机体各项免疫系统回复平衡或上升状态。很多实验研究证实，药用石斛粗多糖主要通过免疫调节活性表现出的药理作用，另一方面是通过免疫功能和多种细胞因子的提高增加体液免疫。药用石斛粗多糖它可以激活淋巴细胞和淋巴B细胞。例如：范益君，淳泽等人研究实验结果发现石斛多糖在体外可以显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖[13]。
药用石斛多糖可以激活补体，补体是血液中的蛋白质，这种蛋白质具有一定的酶原活性，这种蛋白质协同抗体来消灭抗原微生物和协助吞噬细胞来吞噬抗原微生物，淋巴因子和自然杀伤细胞也能促进细胞因子的生成，来活化补体，从而来对机体进行免疫活性调节[14]。促进脾淋巴细胞的增殖，使其具有一定的免疫增强功能，药用石斛多糖在免疫活性调节起到作用，已经有很多学者实验证实:如铁皮石斛迭鞘石斛多糖在免疫活性调节上起到一定作用[15]。
观赏石斛多糖在免疫调节作用的研究探索在国内目前是一个很大的空缺，这方面仍需学者们不断地探索研究。
2实验内容与方法
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