超声波协同微波法提取贯叶连翘花中挥发油的研究(附件)
摘 要本课题以贯叶连翘花为研究对象，采用超声波协同微波法提取贯叶连翘花挥发油的工艺条件进行优化研究。在单因素基础上结合正交实验对影响挥发油提取率的主要因素进行分析，确定的最佳工艺条件为：超声功率400W，微波功率200W，提取15min，该条件下挥发油的提取率为0.348%。本研究为贯叶连翘花的开发研究提供参考。目 录
1 绪论
1.1研究目的及意义 1 1.2贯叶连翘研究 1
1.2.1贯叶连翘挥发油研究 2 1.2.2贯叶连翘挥发油提取研究 2
1.3贯叶连翘药理作用 4 1.3.1 抗抑郁 4 1.3.2 抗病毒 5
1.3.3 抗肿瘤 5 1.4 研究主要内容 5
2 实验部分
2.1 实验材料与仪器 6
2.1.1 主要材料与试剂 6
2.1.2 仪器与设备 6
2.2 贯叶连翘挥发性成分的提取 6
2.2.1微波提取法 6
2.2.2超声波提取法 6
2.2.3贯叶连翘花中挥发油的提取 7
2.3单因素实验 7
2.3.1不同溶剂提取 7
2.3.2超声功率 7
2.3.3提取时间 8
2.3.4微波功率 9
2.4正交试验 10
2.5验证实验结果 10
2.5.1正交实验结果 10
2.5.2验证实验结果 11
结论 12
参考文献 13
致谢 15
1绪论
1.1 研究目的及意义
贯叶连翘花(Hypericum perforatum L.)，藤黄科金丝桃属多年生草本植物的花蕾，具有清心明目、抗菌消炎、镇静、调经止血、抗病毒、抗炎及抗肿瘤等功效，其药用历史已有两千多年之久。贯叶连翘花中富含多种有效成分，均具有广泛的药理作用。目前对于贯叶连翘及其花的研究主要建立在对其活性成分金丝桃素、黄酮类等的研究上，而对其活性成分挥发油的研究还较少。
基于超声波协同微波提取法具有提取效率高，节能，省时和操作简单等优点，本研究以超声波协同微波对传统中药贯叶连翘花中
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
植物的花蕾，具有清心明目、抗菌消炎、镇静、调经止血、抗病毒、抗炎及抗肿瘤等功效，其药用历史已有两千多年之久。贯叶连翘花中富含多种有效成分，均具有广泛的药理作用。目前对于贯叶连翘及其花的研究主要建立在对其活性成分金丝桃素、黄酮类等的研究上，而对其活性成分挥发油的研究还较少。
基于超声波协同微波提取法具有提取效率高，节能，省时和操作简单等优点，本研究以超声波协同微波对传统中药贯叶连翘花中挥发油，在单因素基础上结合正交实验对影响挥发油提取率的主要因素进行分析，以确定的最佳的提取工艺参数，为贯叶连翘及其药用部位的研究和开发提供实验数据支撑。
1.2 贯叶连翘的研究
贯叶连翘（Hypericum perforatum Linn）具有清热解毒、收敛止血、利湿之功效，主要用于止血、抗炎、妇科病等方面，全草含双蒽酮化合物、蒽酚化合物、黄酮化合物、挥发油、胡萝卜素、维生素C及鞣质等，与其在国外的主要应用领域有一定差异。
贯叶连翘含有金丝桃苷（hyperoside）、槲皮素（quercetin）、槲皮苷（quercitrin）、绿原酸（chlorogenic acid）、咖啡酸（caffein acid）、衣马宁（imanin）、金丝桃素（hypericin）及挥发油（volatile oil）等成分。近年来国内对其化学成分研究最新进展如下：
据文献报道，贯叶连翘全草含双蒽酮化合物:金丝桃素、伪金丝桃素、原金丝桃素等，其主要成分金丝桃素具有广泛的药理作用，具有对人体激活白细胞的免疫功能有抑制作用，在体内、体外均有抗逆转录病毒的作用，对艾滋病(HIV)早期复制有较强的抑制作用；有抑制中枢神经和镇静作用，用作中枢神经抑制剂和抗抑郁症药物。谢羽能等对贯叶连翘丙酮提取部位的成分进行分离、鉴定，从该部位分得两个化合物，山柰酚30βD半乳糖为首次从该植物中分得[1]。
卢艳花等从贯叶连翘地上部分的80%正己烷提取物中分离得到1个新的黄酮苷和6个已知黄酮类化合物[2]。殷志琦等采用反复硅胶柱层析分离纯化，通过理化性质和光谱分析鉴定其化学结构，从贯叶连翘中分离得到6个化合物，其中乙酰金丝桃苷、表乌苏酸为首次从该植物中分离得到。有报道从贵州产贯叶连翘中经提取分离和鉴定，可得到8个化合物，1，7二羟基酮（1，7dihydroxyxanthone），2,5二甲基7羟基色原酮（2,5dimethyl hydroxychromone）和香草酸（vanillic acid）为首次从贯叶连翘中分离得到[3]。
从目前的工作进展看，研究贯叶连翘的活性成分主要是对金丝桃素、黄酮类上，而对花中有效成分如挥发油的研究较少；今后应当加强这方面的研究，为贯叶连翘花的未来发展提供有利条件。
1.2.1 贯叶连翘挥发油研究
贯叶连翘中挥发油含量比贯叶连翘果皮高。贯叶连翘种子挥发油中含有a旅烯、茨烯等单菇类化合物，脂肪族类化合物，及香叶醛、龙脑、a菇品醇等醛、酮类化合物。
贯叶连翘含有的挥发油成分，具有清热解毒、抗菌止血、抗氧化等作用。Schwob等[4]对产自法国东南部的6种贯叶连翘进行了挥发油成分分析，研究显示不同产地或不同时期的贯叶连翘挥发油成分及其含量具有一定差异。
在借鉴国外成果的基础上，国内学者也对贯叶连翘挥发油进行了一系列的研究。刘国声等[5]利用气相色谱质谱联用分析连翘子挥发油，其主要成分及其百分含量分别是1p旅烯（60.2%）.a派烯（15.79%）、伞花烃（、芳樟醇（6.0%）。徐植灵等[6]。
1.2.2 贯叶连翘挥发油提取研究
现代天然药物科学研究的发展趋势[7] ，要求明确天然产物的成分，从中分离出主要活性成分并去掉某些无效或者有害成分，甚至从中分离出化合物单体，以达到高效利用天然药物的目的[8]，利用现代科学技术手段和仪器，可以初步达到这种要求。但是同一植物通过不同的提取方法所获得成分及相对含量也有一定差别，甚至差别较大。
挥发油提取方法较多，例如：水蒸气蒸馏法[9]、微波提取法、超临界二氧化碳提取法提取等，由于植物生长地不同，土壤环境不同，气候不同，部位不同，对提取挥发油效果有很大差异。
挥发油最常提取方法是水蒸气蒸馏法[10]，此方法操作简单、效率高，对中药挥发性成分的研制中具有广泛应用。但水蒸气蒸馏法也有明显的缺陷，提取过程中需要较高温度，耗时较长，容易破坏挥发油中的易氧化物质，而对高沸点物质又不易蒸出，低沸点物质流失，不能够完整的提取挥发油成分，从而使出油率较低。李惠成和张宾[11]对利用水蒸气蒸馏法对采集于甘肃的贯叶连翘全草进行研究文献报道；曾虹燕和周朴华采用水蒸气蒸馏法对湖南长沙产贯叶连翘的叶进行挥发油成分研究，发现果叶连翘全草的挥发油成分主要为单萜和倍半萜。王小芳，董晓宁采用水蒸气蒸馏法提取中草药贯叶连翘全草的挥发油。通过气相色谱/质谱联用技术测定了挥发油的化学成分，从中鉴定出75种化合物，其中百里香酚、桉油精、丁香油酚等酚类物质为首次检出[12]。结果表明，贯叶连翘因产地不同、部位不同，其挥发油的成分有较大的差别。向华莉等人考察兽用双黄连滴
1 绪论
1.1研究目的及意义 1 1.2贯叶连翘研究 1
1.2.1贯叶连翘挥发油研究 2 1.2.2贯叶连翘挥发油提取研究 2
1.3贯叶连翘药理作用 4 1.3.1 抗抑郁 4 1.3.2 抗病毒 5
1.3.3 抗肿瘤 5 1.4 研究主要内容 5
2 实验部分
2.1 实验材料与仪器 6
2.1.1 主要材料与试剂 6
2.1.2 仪器与设备 6
2.2 贯叶连翘挥发性成分的提取 6
2.2.1微波提取法 6
2.2.2超声波提取法 6
2.2.3贯叶连翘花中挥发油的提取 7
2.3单因素实验 7
2.3.1不同溶剂提取 7
2.3.2超声功率 7
2.3.3提取时间 8
2.3.4微波功率 9
2.4正交试验 10
2.5验证实验结果 10
2.5.1正交实验结果 10
2.5.2验证实验结果 11
结论 12
参考文献 13
致谢 15
1绪论
1.1 研究目的及意义
贯叶连翘花(Hypericum perforatum L.)，藤黄科金丝桃属多年生草本植物的花蕾，具有清心明目、抗菌消炎、镇静、调经止血、抗病毒、抗炎及抗肿瘤等功效，其药用历史已有两千多年之久。贯叶连翘花中富含多种有效成分，均具有广泛的药理作用。目前对于贯叶连翘及其花的研究主要建立在对其活性成分金丝桃素、黄酮类等的研究上，而对其活性成分挥发油的研究还较少。
基于超声波协同微波提取法具有提取效率高，节能，省时和操作简单等优点，本研究以超声波协同微波对传统中药贯叶连翘花中
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
植物的花蕾，具有清心明目、抗菌消炎、镇静、调经止血、抗病毒、抗炎及抗肿瘤等功效，其药用历史已有两千多年之久。贯叶连翘花中富含多种有效成分，均具有广泛的药理作用。目前对于贯叶连翘及其花的研究主要建立在对其活性成分金丝桃素、黄酮类等的研究上，而对其活性成分挥发油的研究还较少。
基于超声波协同微波提取法具有提取效率高，节能，省时和操作简单等优点，本研究以超声波协同微波对传统中药贯叶连翘花中挥发油，在单因素基础上结合正交实验对影响挥发油提取率的主要因素进行分析，以确定的最佳的提取工艺参数，为贯叶连翘及其药用部位的研究和开发提供实验数据支撑。
1.2 贯叶连翘的研究
贯叶连翘（Hypericum perforatum Linn）具有清热解毒、收敛止血、利湿之功效，主要用于止血、抗炎、妇科病等方面，全草含双蒽酮化合物、蒽酚化合物、黄酮化合物、挥发油、胡萝卜素、维生素C及鞣质等，与其在国外的主要应用领域有一定差异。
贯叶连翘含有金丝桃苷（hyperoside）、槲皮素（quercetin）、槲皮苷（quercitrin）、绿原酸（chlorogenic acid）、咖啡酸（caffein acid）、衣马宁（imanin）、金丝桃素（hypericin）及挥发油（volatile oil）等成分。近年来国内对其化学成分研究最新进展如下：
据文献报道，贯叶连翘全草含双蒽酮化合物:金丝桃素、伪金丝桃素、原金丝桃素等，其主要成分金丝桃素具有广泛的药理作用，具有对人体激活白细胞的免疫功能有抑制作用，在体内、体外均有抗逆转录病毒的作用，对艾滋病(HIV)早期复制有较强的抑制作用；有抑制中枢神经和镇静作用，用作中枢神经抑制剂和抗抑郁症药物。谢羽能等对贯叶连翘丙酮提取部位的成分进行分离、鉴定，从该部位分得两个化合物，山柰酚30βD半乳糖为首次从该植物中分得[1]。
卢艳花等从贯叶连翘地上部分的80%正己烷提取物中分离得到1个新的黄酮苷和6个已知黄酮类化合物[2]。殷志琦等采用反复硅胶柱层析分离纯化，通过理化性质和光谱分析鉴定其化学结构，从贯叶连翘中分离得到6个化合物，其中乙酰金丝桃苷、表乌苏酸为首次从该植物中分离得到。有报道从贵州产贯叶连翘中经提取分离和鉴定，可得到8个化合物，1，7二羟基酮（1，7dihydroxyxanthone），2,5二甲基7羟基色原酮（2,5dimethyl hydroxychromone）和香草酸（vanillic acid）为首次从贯叶连翘中分离得到[3]。
从目前的工作进展看，研究贯叶连翘的活性成分主要是对金丝桃素、黄酮类上，而对花中有效成分如挥发油的研究较少；今后应当加强这方面的研究，为贯叶连翘花的未来发展提供有利条件。
1.2.1 贯叶连翘挥发油研究
贯叶连翘中挥发油含量比贯叶连翘果皮高。贯叶连翘种子挥发油中含有a旅烯、茨烯等单菇类化合物，脂肪族类化合物，及香叶醛、龙脑、a菇品醇等醛、酮类化合物。
贯叶连翘含有的挥发油成分，具有清热解毒、抗菌止血、抗氧化等作用。Schwob等[4]对产自法国东南部的6种贯叶连翘进行了挥发油成分分析，研究显示不同产地或不同时期的贯叶连翘挥发油成分及其含量具有一定差异。
在借鉴国外成果的基础上，国内学者也对贯叶连翘挥发油进行了一系列的研究。刘国声等[5]利用气相色谱质谱联用分析连翘子挥发油，其主要成分及其百分含量分别是1p旅烯（60.2%）.a派烯（15.79%）、伞花烃（、芳樟醇（6.0%）。徐植灵等[6]。
1.2.2 贯叶连翘挥发油提取研究
现代天然药物科学研究的发展趋势[7] ，要求明确天然产物的成分，从中分离出主要活性成分并去掉某些无效或者有害成分，甚至从中分离出化合物单体，以达到高效利用天然药物的目的[8]，利用现代科学技术手段和仪器，可以初步达到这种要求。但是同一植物通过不同的提取方法所获得成分及相对含量也有一定差别，甚至差别较大。
挥发油提取方法较多，例如：水蒸气蒸馏法[9]、微波提取法、超临界二氧化碳提取法提取等，由于植物生长地不同，土壤环境不同，气候不同，部位不同，对提取挥发油效果有很大差异。
挥发油最常提取方法是水蒸气蒸馏法[10]，此方法操作简单、效率高，对中药挥发性成分的研制中具有广泛应用。但水蒸气蒸馏法也有明显的缺陷，提取过程中需要较高温度，耗时较长，容易破坏挥发油中的易氧化物质，而对高沸点物质又不易蒸出，低沸点物质流失，不能够完整的提取挥发油成分，从而使出油率较低。李惠成和张宾[11]对利用水蒸气蒸馏法对采集于甘肃的贯叶连翘全草进行研究文献报道；曾虹燕和周朴华采用水蒸气蒸馏法对湖南长沙产贯叶连翘的叶进行挥发油成分研究，发现果叶连翘全草的挥发油成分主要为单萜和倍半萜。王小芳，董晓宁采用水蒸气蒸馏法提取中草药贯叶连翘全草的挥发油。通过气相色谱/质谱联用技术测定了挥发油的化学成分，从中鉴定出75种化合物，其中百里香酚、桉油精、丁香油酚等酚类物质为首次检出[12]。结果表明，贯叶连翘因产地不同、部位不同，其挥发油的成分有较大的差别。向华莉等人考察兽用双黄连滴
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