超声辅助法提取黄芪多糖的条件优选(附件)
摘 要本实验采用了超声辅助法来提取黄芪中的多糖，以多糖的得率为标准，考察了：时间、料液比、温度、超声功率四个因素对黄芪多糖提取得率的影响，确定每个因素的最佳值。依据单因素试验结果设计正交试验，试验结果表明：提取时间30min、料液比(g/mL)1:20、温度60℃、超声功率400W为最佳参数，采用最佳参数对黄芪中多糖进行提取，得到多糖得率为9.37%。目 录
1 绪论
1.1 研究背景 1
1.2 研究目的意义 1
1.3 黄芪多糖的概述 2
1.4 黄芪药理作用 2
1.4.1免疫调节作用 2
1.4.2抗疲劳作用 2
1.4.3抗衰老作用 3
1.4.4抗细菌作用 3
1.4.5抗肿瘤作用 3
1.4.6抗病毒作用 3
1.5 黄芪多糖的提取方法 3
1.5.1水提醇沉法 4
1.5.2碱水提取法 4
1.5.3微波提取法 4
1.5.4酶提取法 5
1.5.5超声辅助法 5
2 试验部分
2.1 实验材料与仪器 6
2.2 黄芪多糖的含量测定—紫外分光光度法 6
2.2.1黄芪的预处理 6
2.2.2标准溶液的制备 7
2.2.3供试品溶液的制备 7
2.2.4测定波长的选择 7
2.2.5标准曲线的制作 7
2.3 方法学考查 7
2.3.1稳定性试验 7
2.3.2精密度实验 7
2.3.3重复性实验 8
2.3.4加样回收率试验 8
2.3.5样品含量测定 8
2.4 实验方法 8
2.5 单因素实验 8
2.5.1时间对黄芪多糖得率的影响 9
2.5.2料液比对黄芪多糖得率的影响 9
2.5.3超声温度对黄芪多糖得率的影响 9
2.5.4超声功率对黄芪多糖得率的影响 9
2.6 正交试验 9
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
样回收率试验 8
2.3.5样品含量测定 8
2.4 实验方法 8
2.5 单因素实验 8
2.5.1时间对黄芪多糖得率的影响 9
2.5.2料液比对黄芪多糖得率的影响 9
2.5.3超声温度对黄芪多糖得率的影响 9
2.5.4超声功率对黄芪多糖得率的影响 9
2.6 正交试验 9
2.7 黄芪多糖得率计算 9
3 实验结果与分析
3.1 标准曲线的绘制 10
3.2 单因素试验结果与分析 10
3.2.1时间对黄芪多糖得率的影响 10
3.2.2料液比对黄芪多糖得率的影响 11
3.2.3温度对黄芪多糖得率的影响 12
3.4.4超声功率对黄芪多糖得率的影响 12
3.3 正交试验结果 13
3.3.1正交试验结果验证 15
3.4 总结 15
结论 16
参考文献 17
致谢 18
1 绪论
1.1 研究背景
黄芪，又名绵芪，其用药部位为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的根。采挖其根后需要除去须根和根头，晒干。黄芪在夏季开花，采收的季节在春季和秋季，相比而言在秋季采收的黄芪含微量元素较多质量更好。药用的黄芪性微温，味甘，归脾、肺经，有补气升阳，益卫固表，托毒生肌，利水退肿之功效[1]。不管是在临床上，还是在生活中黄芪都有着广泛的用途和积极的作用。首先黄芪能够保护肝脏功能，营养肝细胞，提高肝脏的免疫功能；其次，黄芪还有抗癌抗肿瘤的功效，而且临床上很多抗炎药物都含有黄芪，它不仅能够减轻药物的副作用，同时它还可以抵抗癌细胞；除此之外，黄芪对心脏也有保护作用，它不仅能够增强心肌能力，同时还可以增强预防心肌炎的出现。有200多种中成药都是以黄芪为原材料制作的，并且有着不同的剂型，如：丸剂、片剂 、胶囊剂等，其中的滋补药如：人参归脾丸、十全大补丸、安神养心丸、消渴丸等有着悠久的应用历史[2]。近几年以黄芪为原材料开发出许多新的药品，例如保健品和美容护肤品等，在国内外广受欢迎。科学家针对黄芪做过许多的实验，大部分的试验都是围绕着黄芪的药理作用、化学成分及临床应用进行研究的，目的是为了找出黄芪新的药理作用[3]。我国关于黄芪的提取仍然以传统提取方法为主，不仅会造成资源的浪费，而且所得到的提取物纯度和得率都不高。在这种背景条件下，采用新的提取过程，最佳条件是特别重要的。
1.2 研究目的意义
黄芪作为我国传统中药，其药用在我国已有两千多年的历史，通过药物配伍，黄芪可以发挥出其强大的药性。黄芪多糖(APS)是黄芪中最重要的天然有效成分，也是黄芪发挥作用的主要成分。近几年，随着人们针对黄芪多糖做了大量的实验研究，逐渐的发现了黄芪多糖有着多方面的药理作用，因此黄芪多糖也备受关注[4]。随着黄芪不断的开发使用，黄芪的用量日渐增大，由于长期大量采挖，野生黄芪的数量急剧减少，如果不充分的提取其有效成分，就会导致黄芪每年的消耗量远远超出黄芪的生长量，使黄芪资源逐渐枯竭。在研究报道中有着多种的提取多糖的方法，主要包括水煮醇沉法，碱水提取法，微波提取法，超声提取法等，一般的提取方法都采用水煮醇沉法，因为该方法工艺简单操作方便，但一般的水煮醇沉法都在100℃下进行，这样的提取方法对提取物的选择性不好，可能会把黄芪中的黄酮、皂苷等同时提取出来使得粗品纯度低，提取率也不高，加上其较为高的提取成本，使得黄芪多糖的开发受到限制。综上所述，黄芪的药理活性强，疗效确切，被广泛使用，但在提取其有效成分时会造成资源的浪费，所以，为了给合理用药和以后的研究提供可依据的资料，本试验立足于对黄芪多糖研究的同时，以多糖提取率为指标，通过单因素和正交实验的方法研究了超声辅助法在黄芪多糖中的应用，优选黄芪多糖的最佳提取工艺，并且对黄芪多糖提取所进行的研究，不仅扩大了药源，提高了资源利用率，也起到了资源保护的作用。
1.3 黄芪多糖的概述
黄芪多糖是黄芪通过一系列的浓缩提取而得到的水溶性杂多糖。黄芪多糖看起来呈现一种淡黄色的粉末状，并且粉末非常的细小不含有一点杂质，其组成成分为：葡萄糖、己糖醛酸、果糖、半乳糖醛酸、鼠李糖和葡萄糖醛酸等。黄芪多糖可作为免疫增强剂，同时具有抗病毒、抗衰老、抗辐射、抗应激、抗肿瘤和抗氧化等作用[4]。在医药和畜医临床上黄芪多糖的研究应用较为广泛，可作为免疫促进剂、调节剂同时具有抗病毒和抗肿瘤，抗衰老等作用。
1.4 黄芪药理作用
黄芪多糖的生理活性在研究方面引起了高度的重视，人们对其做了很多的试验研究，发现它在机体免疫调节、抗疲劳、抗衰老、抗肿瘤等方面都有较好的作用。
1.4.1 免疫调节作用
免疫调节是指系统内免疫细胞、免疫分子和其他系统相互作用起到维持自身生理稳定的一种调节方式，黄芪多糖的免疫调节作用不仅在于对非特异性免疫功能的影响和对体液免疫作用还可以起到对细胞免疫作用和对自然杀伤
1 绪论
1.1 研究背景 1
1.2 研究目的意义 1
1.3 黄芪多糖的概述 2
1.4 黄芪药理作用 2
1.4.1免疫调节作用 2
1.4.2抗疲劳作用 2
1.4.3抗衰老作用 3
1.4.4抗细菌作用 3
1.4.5抗肿瘤作用 3
1.4.6抗病毒作用 3
1.5 黄芪多糖的提取方法 3
1.5.1水提醇沉法 4
1.5.2碱水提取法 4
1.5.3微波提取法 4
1.5.4酶提取法 5
1.5.5超声辅助法 5
2 试验部分
2.1 实验材料与仪器 6
2.2 黄芪多糖的含量测定—紫外分光光度法 6
2.2.1黄芪的预处理 6
2.2.2标准溶液的制备 7
2.2.3供试品溶液的制备 7
2.2.4测定波长的选择 7
2.2.5标准曲线的制作 7
2.3 方法学考查 7
2.3.1稳定性试验 7
2.3.2精密度实验 7
2.3.3重复性实验 8
2.3.4加样回收率试验 8
2.3.5样品含量测定 8
2.4 实验方法 8
2.5 单因素实验 8
2.5.1时间对黄芪多糖得率的影响 9
2.5.2料液比对黄芪多糖得率的影响 9
2.5.3超声温度对黄芪多糖得率的影响 9
2.5.4超声功率对黄芪多糖得率的影响 9
2.6 正交试验 9
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
样回收率试验 8
2.3.5样品含量测定 8
2.4 实验方法 8
2.5 单因素实验 8
2.5.1时间对黄芪多糖得率的影响 9
2.5.2料液比对黄芪多糖得率的影响 9
2.5.3超声温度对黄芪多糖得率的影响 9
2.5.4超声功率对黄芪多糖得率的影响 9
2.6 正交试验 9
2.7 黄芪多糖得率计算 9
3 实验结果与分析
3.1 标准曲线的绘制 10
3.2 单因素试验结果与分析 10
3.2.1时间对黄芪多糖得率的影响 10
3.2.2料液比对黄芪多糖得率的影响 11
3.2.3温度对黄芪多糖得率的影响 12
3.4.4超声功率对黄芪多糖得率的影响 12
3.3 正交试验结果 13
3.3.1正交试验结果验证 15
3.4 总结 15
结论 16
参考文献 17
致谢 18
1 绪论
1.1 研究背景
黄芪，又名绵芪，其用药部位为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的根。采挖其根后需要除去须根和根头，晒干。黄芪在夏季开花，采收的季节在春季和秋季，相比而言在秋季采收的黄芪含微量元素较多质量更好。药用的黄芪性微温，味甘，归脾、肺经，有补气升阳，益卫固表，托毒生肌，利水退肿之功效[1]。不管是在临床上，还是在生活中黄芪都有着广泛的用途和积极的作用。首先黄芪能够保护肝脏功能，营养肝细胞，提高肝脏的免疫功能；其次，黄芪还有抗癌抗肿瘤的功效，而且临床上很多抗炎药物都含有黄芪，它不仅能够减轻药物的副作用，同时它还可以抵抗癌细胞；除此之外，黄芪对心脏也有保护作用，它不仅能够增强心肌能力，同时还可以增强预防心肌炎的出现。有200多种中成药都是以黄芪为原材料制作的，并且有着不同的剂型，如：丸剂、片剂 、胶囊剂等，其中的滋补药如：人参归脾丸、十全大补丸、安神养心丸、消渴丸等有着悠久的应用历史[2]。近几年以黄芪为原材料开发出许多新的药品，例如保健品和美容护肤品等，在国内外广受欢迎。科学家针对黄芪做过许多的实验，大部分的试验都是围绕着黄芪的药理作用、化学成分及临床应用进行研究的，目的是为了找出黄芪新的药理作用[3]。我国关于黄芪的提取仍然以传统提取方法为主，不仅会造成资源的浪费，而且所得到的提取物纯度和得率都不高。在这种背景条件下，采用新的提取过程，最佳条件是特别重要的。
1.2 研究目的意义
黄芪作为我国传统中药，其药用在我国已有两千多年的历史，通过药物配伍，黄芪可以发挥出其强大的药性。黄芪多糖(APS)是黄芪中最重要的天然有效成分，也是黄芪发挥作用的主要成分。近几年，随着人们针对黄芪多糖做了大量的实验研究，逐渐的发现了黄芪多糖有着多方面的药理作用，因此黄芪多糖也备受关注[4]。随着黄芪不断的开发使用，黄芪的用量日渐增大，由于长期大量采挖，野生黄芪的数量急剧减少，如果不充分的提取其有效成分，就会导致黄芪每年的消耗量远远超出黄芪的生长量，使黄芪资源逐渐枯竭。在研究报道中有着多种的提取多糖的方法，主要包括水煮醇沉法，碱水提取法，微波提取法，超声提取法等，一般的提取方法都采用水煮醇沉法，因为该方法工艺简单操作方便，但一般的水煮醇沉法都在100℃下进行，这样的提取方法对提取物的选择性不好，可能会把黄芪中的黄酮、皂苷等同时提取出来使得粗品纯度低，提取率也不高，加上其较为高的提取成本，使得黄芪多糖的开发受到限制。综上所述，黄芪的药理活性强，疗效确切，被广泛使用，但在提取其有效成分时会造成资源的浪费，所以，为了给合理用药和以后的研究提供可依据的资料，本试验立足于对黄芪多糖研究的同时，以多糖提取率为指标，通过单因素和正交实验的方法研究了超声辅助法在黄芪多糖中的应用，优选黄芪多糖的最佳提取工艺，并且对黄芪多糖提取所进行的研究，不仅扩大了药源，提高了资源利用率，也起到了资源保护的作用。
1.3 黄芪多糖的概述
黄芪多糖是黄芪通过一系列的浓缩提取而得到的水溶性杂多糖。黄芪多糖看起来呈现一种淡黄色的粉末状，并且粉末非常的细小不含有一点杂质，其组成成分为：葡萄糖、己糖醛酸、果糖、半乳糖醛酸、鼠李糖和葡萄糖醛酸等。黄芪多糖可作为免疫增强剂，同时具有抗病毒、抗衰老、抗辐射、抗应激、抗肿瘤和抗氧化等作用[4]。在医药和畜医临床上黄芪多糖的研究应用较为广泛，可作为免疫促进剂、调节剂同时具有抗病毒和抗肿瘤，抗衰老等作用。
1.4 黄芪药理作用
黄芪多糖的生理活性在研究方面引起了高度的重视，人们对其做了很多的试验研究，发现它在机体免疫调节、抗疲劳、抗衰老、抗肿瘤等方面都有较好的作用。
1.4.1 免疫调节作用
免疫调节是指系统内免疫细胞、免疫分子和其他系统相互作用起到维持自身生理稳定的一种调节方式，黄芪多糖的免疫调节作用不仅在于对非特异性免疫功能的影响和对体液免疫作用还可以起到对细胞免疫作用和对自然杀伤
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