超声波法辅助提取茯苓中多糖的工艺优化研究
摘 要本实验以水为溶剂，利用超声波辅助技术优化茯苓多糖的提取工艺。使用正交试验设计，把茯苓中多糖的含量当做考察指标，对料液比、提取功率、提取时间、提取温度进行考察，用苯酚-浓硫酸比色法测定茯苓多糖的含量，最后对其正交分析，得到提取茯苓多糖工艺的最佳条件料液比1:25（g/mL），提取功率150 W，提取时间1 h，提取温度90 ℃。茯苓中多糖的含量是3.4240%。
目 录
1 绪论 1
1.1 研究背景 1
1.2 化学成分研究 1
1.3 药理作用 1
1.3.1 抗氧化、抗衰老作用 1
1.3.2 增强免疫力作用 2
1.3.3 抗肿瘤作用 2
1.3.4 对肝脏的保护作用 2
1.3.5 抗糖尿病作用 2
1.4 临床应用 2
1.4.1 治疗水肿 2
1.4.2 治疗胃下垂及急性肠胃炎 3
1.4.3 治疗精神分裂 3
1.4.4 治疗肝病 3
1.5 茯苓多糖的提取方法 3
1.5.1 水提醇沉法 3
1.5.2 酸、碱液提取法 3
1.5.3 微波提取法 3
1.5.4 超声波提取法 4
1.6 研究目的和意义 4
2 研究方法 5
2.1 原料、试剂 5
2.2 主要仪器 5
2.3 实验方法 5
2.3.1 前期预处理 5
2.3.2 茯苓中多糖的提取 5
2.3.3 茯苓多糖的含量测定 6
2.3.4 单因素实验 7
2.3.5 正交试验 8
3 结果与分析 9
3.1 标准曲线测定结果 9
3.2 精密度试验结果分析 9
3.3 稳定性试验结果分析 9
3.4 重复性试验结果分析 10
3.5 加样回收率试验结果分析 10
3.6 单因素实验结果分析 10
3.6.1 料液比对茯苓多糖含量的影响 10
3. *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
6.2 提取功率对茯苓多糖含量的影响 11
3.6.3 提取时间对茯苓多糖含量的影响 11
3.6.4 提取温度对茯苓多糖含量的影响 12
3.7 茯苓多糖提取工艺条件优化试验结果 13
3.8 工艺验证试验 14
结 论 15
参考文献 17
致 谢 19
1 绪论
1.1 研究背景
生物体中普遍存在的重要生物大分子，有多糖、蛋白质、核酸3种。在有机体内，大多以糖肽类、核糖核酸、糖脂类物质存在的是多糖，其又被叫做多聚糖，是由多个单糖被糖苷键联结组成的天然高分子多聚物，可维持生命活动正常运转[1]。在抗肿瘤方面，像灵芝多糖、人参多糖等已被应用于临床。除此以外，多糖还有抗炎、免疫调节、抗衰老等作用。茯苓含有许多活性多糖成分，且多糖毒副作用小，茯苓多糖研究便成了医药界的研究热点。
茯苓是干燥后茯苓菌核，又名玉灵、茯灵等。安徽、云南等地多产。常伴随于松树根上寄生，类似球状，外表粗糙，呈褐色，内表层粉白色。味甜，可安心神，健脾胃、祛湿、利水等[2]。被当做许多方剂和中成药的原料，因而有“十药九茯苓”之说。茯苓常被用在中西医临床，人民生活中。科学研究不断被创新，茯苓中被发现有大量多糖存在，整个菌核干重被占了约70%~90%[3]。大量研究都证明了茯苓多糖有多种药理作用，对某些疾病也有预防和治疗作用[4]。茯苓多糖的提取研究将引起更多人的重视。
1.2 化学成分研究
多糖类、三萜类化合物是茯苓中主要化学成分。尤其多糖占总含量约高达80%。以β（13）D葡聚糖为结构主链的是茯苓多糖，在水中不溶解，同时也有部分β（16）D葡聚糖及其他（D果糖、D木糖等）存在。有六种类型的三萜类化合物在茯苓中：羊毛甾烷类、齿孔甾烷类等，至今报道出69种，18个有活性。除以上化学成分外，茯苓中还含有少量其他成分，如甾醇类、挥发油、脂肪酸、蛋白质、腺嘌呤、氨基酸、胆碱以及钙、镁、铁、钾等[5]。
1.3 药理作用
1.3.1 抗氧化、抗衰老作用
茯苓多糖有抗氧化、抗衰老的作用[6]。梁亦龙等[6]以果蝇作模型，探索茯苓中多糖的活性作用，发现果蝇抵抗氧的能力被茯苓多糖加强了很多，抑制脂质被过氧化，延长寿命。程水明等[7]做了有关被修饰后的茯苓多糖总还原能力对某物质的清除作用的一项研究，其体外抗氧化被证实。
1.3.2 增强免疫力作用
免疫可以被细胞免疫还有体液免疫两种途径[8]来增强，在体液免疫中能使免疫球蛋白IgG含量呈现上升趋势；在细胞免疫中则通过Mφ被激活，来使吞噬细胞吞灭的能力被增强，进一步使得T细胞被刺激转化，诱导白介素等细胞分裂被发挥作用。羧甲基茯苓多糖有多种免疫调节、保肝降酶等作用；茯苓多糖在保障免疫器官及细胞免疫中有效，能使机体的状况得到改善，抗感染作用被加强；造血机能被茯苓多糖加快恢复，老者体质被加强，让骨髓被更好的保护，不良反应被降低。
1.3.3 抗肿瘤作用
对于网状内皮细胞以及血液系统，茯苓多糖可起到非特异性作用，抵制细胞毒素；增强机体免疫，使肿瘤因子被抑制。激活机体抗肿瘤途径有：①依赖宿主免疫系统使肿瘤被监视；②肿瘤细胞核酸合成被抑制，实现其直接杀死肿瘤细胞；③清除氧自由基等[9]。
1.3.4 对肝脏的保护作用
茯苓对CTC所引起实验鼠肝损伤有十分有效的保护作用，ALT活性在一定程度上被降低，抑制肝细胞出现病变、死亡。动物在多种复合病因刺激下患肝硬化，通过给予茯苓相关药物治疗，给药3周后其肝硬化症状被明显缓解，和对照组相比，肝内胶原蛋白含量被有效控制，低于对照组，而尿羟脯氨酸体内含量低，大部分被排出体外，得出动物肝脏蛋白被代谢，肝内纤维组织发生了重吸收。在各种肝药方剂中，仅有茯苓可减轻肝细胞肿胀，帮助它快速生长，确保肝对酶有所降解[9]。陈春霞[10]也通过试验发现了茯苓多糖的对肝有保护作用。
目 录
1 绪论 1
1.1 研究背景 1
1.2 化学成分研究 1
1.3 药理作用 1
1.3.1 抗氧化、抗衰老作用 1
1.3.2 增强免疫力作用 2
1.3.3 抗肿瘤作用 2
1.3.4 对肝脏的保护作用 2
1.3.5 抗糖尿病作用 2
1.4 临床应用 2
1.4.1 治疗水肿 2
1.4.2 治疗胃下垂及急性肠胃炎 3
1.4.3 治疗精神分裂 3
1.4.4 治疗肝病 3
1.5 茯苓多糖的提取方法 3
1.5.1 水提醇沉法 3
1.5.2 酸、碱液提取法 3
1.5.3 微波提取法 3
1.5.4 超声波提取法 4
1.6 研究目的和意义 4
2 研究方法 5
2.1 原料、试剂 5
2.2 主要仪器 5
2.3 实验方法 5
2.3.1 前期预处理 5
2.3.2 茯苓中多糖的提取 5
2.3.3 茯苓多糖的含量测定 6
2.3.4 单因素实验 7
2.3.5 正交试验 8
3 结果与分析 9
3.1 标准曲线测定结果 9
3.2 精密度试验结果分析 9
3.3 稳定性试验结果分析 9
3.4 重复性试验结果分析 10
3.5 加样回收率试验结果分析 10
3.6 单因素实验结果分析 10
3.6.1 料液比对茯苓多糖含量的影响 10
3. *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
6.2 提取功率对茯苓多糖含量的影响 11
3.6.3 提取时间对茯苓多糖含量的影响 11
3.6.4 提取温度对茯苓多糖含量的影响 12
3.7 茯苓多糖提取工艺条件优化试验结果 13
3.8 工艺验证试验 14
结 论 15
参考文献 17
致 谢 19
1 绪论
1.1 研究背景
生物体中普遍存在的重要生物大分子，有多糖、蛋白质、核酸3种。在有机体内，大多以糖肽类、核糖核酸、糖脂类物质存在的是多糖，其又被叫做多聚糖，是由多个单糖被糖苷键联结组成的天然高分子多聚物，可维持生命活动正常运转[1]。在抗肿瘤方面，像灵芝多糖、人参多糖等已被应用于临床。除此以外，多糖还有抗炎、免疫调节、抗衰老等作用。茯苓含有许多活性多糖成分，且多糖毒副作用小，茯苓多糖研究便成了医药界的研究热点。
茯苓是干燥后茯苓菌核，又名玉灵、茯灵等。安徽、云南等地多产。常伴随于松树根上寄生，类似球状，外表粗糙，呈褐色，内表层粉白色。味甜，可安心神，健脾胃、祛湿、利水等[2]。被当做许多方剂和中成药的原料，因而有“十药九茯苓”之说。茯苓常被用在中西医临床，人民生活中。科学研究不断被创新，茯苓中被发现有大量多糖存在，整个菌核干重被占了约70%~90%[3]。大量研究都证明了茯苓多糖有多种药理作用，对某些疾病也有预防和治疗作用[4]。茯苓多糖的提取研究将引起更多人的重视。
1.2 化学成分研究
多糖类、三萜类化合物是茯苓中主要化学成分。尤其多糖占总含量约高达80%。以β（13）D葡聚糖为结构主链的是茯苓多糖，在水中不溶解，同时也有部分β（16）D葡聚糖及其他（D果糖、D木糖等）存在。有六种类型的三萜类化合物在茯苓中：羊毛甾烷类、齿孔甾烷类等，至今报道出69种，18个有活性。除以上化学成分外，茯苓中还含有少量其他成分，如甾醇类、挥发油、脂肪酸、蛋白质、腺嘌呤、氨基酸、胆碱以及钙、镁、铁、钾等[5]。
1.3 药理作用
1.3.1 抗氧化、抗衰老作用
茯苓多糖有抗氧化、抗衰老的作用[6]。梁亦龙等[6]以果蝇作模型，探索茯苓中多糖的活性作用，发现果蝇抵抗氧的能力被茯苓多糖加强了很多，抑制脂质被过氧化，延长寿命。程水明等[7]做了有关被修饰后的茯苓多糖总还原能力对某物质的清除作用的一项研究，其体外抗氧化被证实。
1.3.2 增强免疫力作用
免疫可以被细胞免疫还有体液免疫两种途径[8]来增强，在体液免疫中能使免疫球蛋白IgG含量呈现上升趋势；在细胞免疫中则通过Mφ被激活，来使吞噬细胞吞灭的能力被增强，进一步使得T细胞被刺激转化，诱导白介素等细胞分裂被发挥作用。羧甲基茯苓多糖有多种免疫调节、保肝降酶等作用；茯苓多糖在保障免疫器官及细胞免疫中有效，能使机体的状况得到改善，抗感染作用被加强；造血机能被茯苓多糖加快恢复，老者体质被加强，让骨髓被更好的保护，不良反应被降低。
1.3.3 抗肿瘤作用
对于网状内皮细胞以及血液系统，茯苓多糖可起到非特异性作用，抵制细胞毒素；增强机体免疫，使肿瘤因子被抑制。激活机体抗肿瘤途径有：①依赖宿主免疫系统使肿瘤被监视；②肿瘤细胞核酸合成被抑制，实现其直接杀死肿瘤细胞；③清除氧自由基等[9]。
1.3.4 对肝脏的保护作用
茯苓对CTC所引起实验鼠肝损伤有十分有效的保护作用，ALT活性在一定程度上被降低，抑制肝细胞出现病变、死亡。动物在多种复合病因刺激下患肝硬化，通过给予茯苓相关药物治疗，给药3周后其肝硬化症状被明显缓解，和对照组相比，肝内胶原蛋白含量被有效控制，低于对照组，而尿羟脯氨酸体内含量低，大部分被排出体外，得出动物肝脏蛋白被代谢，肝内纤维组织发生了重吸收。在各种肝药方剂中，仅有茯苓可减轻肝细胞肿胀，帮助它快速生长，确保肝对酶有所降解[9]。陈春霞[10]也通过试验发现了茯苓多糖的对肝有保护作用。
版权保护: 本文由 hbsrm.com编辑，转载请保留链接: www.hbsrm.com/yxlw/zygc/107.html
