三七中三七总皂苷的提取分离与鉴别(附件)
摘 要 三七的最主要的入药部位是它的干燥根和根茎。只生长与我国的西南部地区,是我国自古以来比较独具特性的中药材代表之一。研究结果也显示,三七中存在多种生理活性,主要包括适用于脑血管后遗症的三七皂苷、还有在蜂胶、向天果、绿茶中也有的成分黄酮苷及多糖类成分等。其主要药理成分为皂苷类。本文采用不同的提取方法对三七中对皂苷进行优化提取,并且对提取工艺进行优化。用大孔树脂吸附法对皂苷提取液进行分离和纯化并对其进行鉴别,也描述了对其进行定性鉴别的方法:薄层色谱法。试验研究调查结果表明:采用现代提取工艺进行提取结果相对比,可得最佳提取工艺:温度设置在30℃,加入料液比为1:14,70%乙醇超声提取2次,每次40min。这篇文章采用人参皂苷Rg1作为对照品,薄层结果显示分离效果良好。在三七中所提取到的含量测定结果作为这篇文章主要的参考指标。目 录
1 绪论
1.1 研究背景 1
1.2 三七的传统研究 1
1.3 三七的现代研究 1
1.3.1 三七总皂苷的化学成分与药理学作用 1
1.3.2 三七总皂苷的研究现状 1
1.3.2.1三七皂苷提取研究 2
1.3.2.2三七皂苷分离方法研究 3
2 实验部分研究
2.1 实验药品以及仪器 4
2.1.1 药材 4
2.1.2 试剂 4
2.1.3 仪器 4
2.2 单因素水平设计 4
2.2.1 试验方法与结果 5
2.3三七皂苷提取分离 6
2.3.1 乙醇超声提取 6
2.3.2 验证试验 7
2.3.3 试验方法与结果 7
2.3.4乙醇超声提取法所得提取液的大孔树脂分离纯化 7
2.3.4.1 大孔树脂吸附法原理 7
2.4 三七皂苷的薄层鉴别 8
3 结果与讨论
3.1超声提取过程中最佳工艺的选择 10
3.1.1 提取次数的影响 10
3.1.2 乙醇用量对提取得率的影响 10
3.1.3 超声提取温度改变对提取率的影响 10
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ¥351916072¥
法所得提取液的大孔树脂分离纯化 7
2.3.4.1 大孔树脂吸附法原理 7
2.4 三七皂苷的薄层鉴别 8
3 结果与讨论
3.1超声提取过程中最佳工艺的选择 10
3.1.1 提取次数的影响 10
3.1.2 乙醇用量对提取得率的影响 10
3.1.3 超声提取温度改变对提取率的影响 10
3.1.4超声时间的影响 10
3.1.5 乙醇浓度对提取得率的影响 10
3.2 传统提取方法与现代提取方法的比较 10
3.3 大孔离子吸附树脂分离纯化工艺 11
3.3.1 洗脱剂浓度的选择 11
3.3.2 洗脱剂用量的选择 11
3.3.3 上柱液浓度的选择 11
3.3.4 重复试验及结果 11
3.4 紫外标准曲线的绘制 12
3.4.1 标准曲线的制备 12
3.5 薄层鉴别 13
3.6 讨论 13
3.6.1 三七皂苷传统提取工艺与现代提取工艺的发展前景 13
结论 15
参考文献 16
致 谢 18
1 绪论
1.1 研究背景
三七(Panax notoginseng),是我国一味比较独特的中药材。它的味道略苦且温和,有利于化瘀止血、消肿止痛[1]。
三七中的主要活性成分是皂苷类,当然,在现代科技的基础上,有很多有效的方法可以对三七的有效成分进行提取,在这次试验中我们将采用传统的提取工艺、现代的提取工艺等。对三七中有效的成分进行提取对比,使用大孔离子树脂这种方法对提取的滤液进行分离和纯化。对提取方法系统性的进行研究,确定工业生产中的最佳工艺提取率,便于生产数据参考。
1.2 三七的传统研究
三七作为我国独具性的中药材,为五加科人参属,药用为干燥根及根茎,仅且产于我国西南部,具有散瘀止血,消肿止痛等功效[2]。史载于《本草纲目》中[3],“三七近时始出,南人军中用之金疮要药,云有其功。乃阳明厥阴血分之药,故能治一切血病。”《临证指南》中对三七亦有经典性总结之言:“血病五脏、六腑皆有,三七治一切血症。”
1.3 三七的现代研究
1.3.1 三七总皂苷的化学成分与药理学作用
三七集若干重要的生物活性,主要包括三七总皂苷、黄酮苷等。现代药理学结果研究表明,三七总皂苷具有降低血压、抗AS、扩张血管、抗血栓、抗心肌、脑缺血、调节细胞免疫、抗炎、镇痛、保肝等药理作用[4]。三七皂苷除了一般比较普及的作用外,在治疗以及预防心脑血管的系统方面的疗效突出,三七在这方面的应用也比较广泛,当然在神经的系统等方面也都有一定的、比较良好的疗效。三七皂苷作为治疗心、脑血管系统方面疾病的药物,疗效非常不错。而且对于医疗和保健用药,三七也发挥了很大的疗效。同时三七还能调节新陈代谢,调理生理功能、防止老变衰、也可以预防到了老年变得痴傻痴呆、保持我们的机体发育正常 [4]。其功效对女人和运动员的效果奇佳,女人生完孩子后可以帮助女人提高身体健康,对运动员的肌肉和体能方面也有用处[5]。
1.3.2 三七总皂苷的研究现状
1.3.2.1三七皂苷提取研究
对三七总皂苷的提取工艺也有一定的研究发展。1992年,《中国中药杂志》中魏凤玲与朱春波、朱立平等,详细的记载了三七总皂苷提取方法以及结果优选验证[6]。而且,罗晓健等研究结果证明:对三七总皂苷提取率的作用影响,提取温度的改变对有效成分的溶出率作用不显著,但结合实际情况并参照均匀设计结果,提取温度的改变与溶剂用量呈一定的正相关,对提取温度的改变有了较好的参考意见。在《中国现代中药》中,丁艳芳、陈金栋等在书中详细的录入了三七总皂苷的超声波提取工艺研究,认证了高频对提取率的影响[7]。在2005年,记录了三七总皂苷的超声提取的研究的《时珍国医国药》中,非常详细的说明了超声提取法的优势,与其他常规的提取方法相比,虽然总皂苷的在三七中的提取含量没有什么差别,但它的提取时间比常规的短十几倍,其优势还是很可观的。
2009年,赵慧莹、刘艳福等在《药学实践杂志》通过对煎煮法、乙醇回流法与超声提取法的提取结果比较,三七总皂苷的提取率比较高的的是水煮法,相比之下,乙醇浸泡的提取法在三七中的的提取率就低了点,所以水煮法有一定的可取度,而对于超声提取的这种方法,跟之前相比,较为显著的是,提取的时间短,提取的效率和利用率高。在渗漉法中,闫光军等认为渗漉法设备简单、操作安全、节能减耗、减少成分破坏,是一种较好的提取方法,因此采用渗漉法对三七总皂苷进行提取,经过正交试验发现渗漉速度对提取效果的影响程度最大,乙醇用量和粉末粗细也对其有一定的影响,而乙醇浓度却影响不大,最佳提取方案为采用 15 倍量的 75%乙醇对三七中粉以 5
1 绪论
1.1 研究背景 1
1.2 三七的传统研究 1
1.3 三七的现代研究 1
1.3.1 三七总皂苷的化学成分与药理学作用 1
1.3.2 三七总皂苷的研究现状 1
1.3.2.1三七皂苷提取研究 2
1.3.2.2三七皂苷分离方法研究 3
2 实验部分研究
2.1 实验药品以及仪器 4
2.1.1 药材 4
2.1.2 试剂 4
2.1.3 仪器 4
2.2 单因素水平设计 4
2.2.1 试验方法与结果 5
2.3三七皂苷提取分离 6
2.3.1 乙醇超声提取 6
2.3.2 验证试验 7
2.3.3 试验方法与结果 7
2.3.4乙醇超声提取法所得提取液的大孔树脂分离纯化 7
2.3.4.1 大孔树脂吸附法原理 7
2.4 三七皂苷的薄层鉴别 8
3 结果与讨论
3.1超声提取过程中最佳工艺的选择 10
3.1.1 提取次数的影响 10
3.1.2 乙醇用量对提取得率的影响 10
3.1.3 超声提取温度改变对提取率的影响 10
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法所得提取液的大孔树脂分离纯化 7
2.3.4.1 大孔树脂吸附法原理 7
2.4 三七皂苷的薄层鉴别 8
3 结果与讨论
3.1超声提取过程中最佳工艺的选择 10
3.1.1 提取次数的影响 10
3.1.2 乙醇用量对提取得率的影响 10
3.1.3 超声提取温度改变对提取率的影响 10
3.1.4超声时间的影响 10
3.1.5 乙醇浓度对提取得率的影响 10
3.2 传统提取方法与现代提取方法的比较 10
3.3 大孔离子吸附树脂分离纯化工艺 11
3.3.1 洗脱剂浓度的选择 11
3.3.2 洗脱剂用量的选择 11
3.3.3 上柱液浓度的选择 11
3.3.4 重复试验及结果 11
3.4 紫外标准曲线的绘制 12
3.4.1 标准曲线的制备 12
3.5 薄层鉴别 13
3.6 讨论 13
3.6.1 三七皂苷传统提取工艺与现代提取工艺的发展前景 13
结论 15
参考文献 16
致 谢 18
1 绪论
1.1 研究背景
三七(Panax notoginseng),是我国一味比较独特的中药材。它的味道略苦且温和,有利于化瘀止血、消肿止痛[1]。
三七中的主要活性成分是皂苷类,当然,在现代科技的基础上,有很多有效的方法可以对三七的有效成分进行提取,在这次试验中我们将采用传统的提取工艺、现代的提取工艺等。对三七中有效的成分进行提取对比,使用大孔离子树脂这种方法对提取的滤液进行分离和纯化。对提取方法系统性的进行研究,确定工业生产中的最佳工艺提取率,便于生产数据参考。
1.2 三七的传统研究
三七作为我国独具性的中药材,为五加科人参属,药用为干燥根及根茎,仅且产于我国西南部,具有散瘀止血,消肿止痛等功效[2]。史载于《本草纲目》中[3],“三七近时始出,南人军中用之金疮要药,云有其功。乃阳明厥阴血分之药,故能治一切血病。”《临证指南》中对三七亦有经典性总结之言:“血病五脏、六腑皆有,三七治一切血症。”
1.3 三七的现代研究
1.3.1 三七总皂苷的化学成分与药理学作用
三七集若干重要的生物活性,主要包括三七总皂苷、黄酮苷等。现代药理学结果研究表明,三七总皂苷具有降低血压、抗AS、扩张血管、抗血栓、抗心肌、脑缺血、调节细胞免疫、抗炎、镇痛、保肝等药理作用[4]。三七皂苷除了一般比较普及的作用外,在治疗以及预防心脑血管的系统方面的疗效突出,三七在这方面的应用也比较广泛,当然在神经的系统等方面也都有一定的、比较良好的疗效。三七皂苷作为治疗心、脑血管系统方面疾病的药物,疗效非常不错。而且对于医疗和保健用药,三七也发挥了很大的疗效。同时三七还能调节新陈代谢,调理生理功能、防止老变衰、也可以预防到了老年变得痴傻痴呆、保持我们的机体发育正常 [4]。其功效对女人和运动员的效果奇佳,女人生完孩子后可以帮助女人提高身体健康,对运动员的肌肉和体能方面也有用处[5]。
1.3.2 三七总皂苷的研究现状
1.3.2.1三七皂苷提取研究
对三七总皂苷的提取工艺也有一定的研究发展。1992年,《中国中药杂志》中魏凤玲与朱春波、朱立平等,详细的记载了三七总皂苷提取方法以及结果优选验证[6]。而且,罗晓健等研究结果证明:对三七总皂苷提取率的作用影响,提取温度的改变对有效成分的溶出率作用不显著,但结合实际情况并参照均匀设计结果,提取温度的改变与溶剂用量呈一定的正相关,对提取温度的改变有了较好的参考意见。在《中国现代中药》中,丁艳芳、陈金栋等在书中详细的录入了三七总皂苷的超声波提取工艺研究,认证了高频对提取率的影响[7]。在2005年,记录了三七总皂苷的超声提取的研究的《时珍国医国药》中,非常详细的说明了超声提取法的优势,与其他常规的提取方法相比,虽然总皂苷的在三七中的提取含量没有什么差别,但它的提取时间比常规的短十几倍,其优势还是很可观的。
2009年,赵慧莹、刘艳福等在《药学实践杂志》通过对煎煮法、乙醇回流法与超声提取法的提取结果比较,三七总皂苷的提取率比较高的的是水煮法,相比之下,乙醇浸泡的提取法在三七中的的提取率就低了点,所以水煮法有一定的可取度,而对于超声提取的这种方法,跟之前相比,较为显著的是,提取的时间短,提取的效率和利用率高。在渗漉法中,闫光军等认为渗漉法设备简单、操作安全、节能减耗、减少成分破坏,是一种较好的提取方法,因此采用渗漉法对三七总皂苷进行提取,经过正交试验发现渗漉速度对提取效果的影响程度最大,乙醇用量和粉末粗细也对其有一定的影响,而乙醇浓度却影响不大,最佳提取方案为采用 15 倍量的 75%乙醇对三七中粉以 5
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