石斛抗菌活性研究(附件)

摘 要为充分发掘观赏石斛的药用潜能,本课题以铁皮石斛为对照研究观赏石斛是否具有抑菌作用,以及哪个部位的抑菌作用最好。试验中对观赏石斛秋石斛中的索菲娅(Sonya)的抗菌活性部位进行研究,提取观赏石斛的水提液,高浓度醇提液,低浓度醇提液,分离活性部位后进行抗菌实验。研究结果表明观赏石斛对大肠埃希菌具有抗菌活性,且正丁醇部位抗菌活性最佳,抑菌活性高于铁皮石斛,约为铁皮石斛抗菌活性的1.06倍。此外,观赏石斛对枯草芽孢杆菌同样具有抗菌活性,且石油醚部位抗菌活性最佳,其抑菌活性高于铁皮石斛,为铁皮石斛的1.5倍。
目 录
1 绪论 1
1.1 研究背景 1
1.2 研究目的意义 1
1.2.1 观赏石斛的栽培日渐成熟却只用于观赏造成资源浪费 1
1.2.2 观赏石斛的开发利用还可深入 1
1.2.3 研究抗菌部位的意义 2
1.3 石斛的概述 2
1.3.1 石斛药理作用 3
2 实验部分 5
2.1 试验材料与仪器 5
2.2 实验方法 7
2.2.1 实验前处理 7
2.2.2 抗菌活性部位的提取分离 7
2.2.3 培养基的制备 7
2.2.4 无菌体系的建立 8
2.2.5 复溶冻干粉末 8
2.2.6 菌种培养 8
2.4.4 菌悬液制备 9
2.4.5 准备抗菌滤纸片 9
2.4.6 抗菌体系建立 9
3 实验结果与分析 11
3.1 实验结果概述 11
3.2 观赏石斛各部位对大肠埃希菌抗菌活性分析 12
3.3 观赏石斛各部位对枯草芽孢杆菌抗菌活性分析 13
3.4 观赏石斛各部位对白色念珠菌抗菌活性分析 15
3.5 观赏石斛各部位对金黄色葡萄球菌抗菌活性分析 15
3.6 总结 15
结论 17
参考文献 18
致谢 19
1 绪论
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1.1 研究背景
铁皮石斛为兰科植物 Dendrobium officinale Kimura et Migo 的干燥茎[1]石斛,味甘,微寒。归胃、肾经。用药历史悠久,现代药理学研究表明,石斛对非特异性及特异性免疫均有增强作用。此外还能抗氧化,促消化,促进唾液分泌,降血糖,降血压,抗肝损伤,抗肿瘤其营养价值和药用价值已逐步被人们发现和认可。随着科学技术的提高,石斛的用途日益广泛,对石斛的需求缺口很大,而观赏石斛与铁皮石斛同出一脉,只用于观赏造成浪费,挖掘观赏石斛的药用价值,填补中药石斛资源短缺的空白,减少资源上的浪费显得尤为重要。对其进行深层次的研究与开发,使其更好的为临床服务,具有更广阔的应用前景。
1.2 研究目的意义
1.2.1 观赏石斛的栽培日渐成熟却只用于观赏造成资源浪费
石斛不仅具有药用和食用价值,同时兼具观赏性。观赏石斛由于花形花姿优美、花色鲜艳、种类繁多、花期长,石斛兰深受各国人们的喜爱,被誉为“四大观赏洋兰”之一,石斛兰既可用作高档的插花,也可用于菜肴上碟的装饰花材,还可用作贵宾胸花、花环、新娘捧花,花车装饰等,其用途极为广泛,实用价值很高,世界经济的发展和人们生活水平的不断提高,有力地推动了观赏石斛的生产和消费,观赏石斛的育种技术已成为研究者关注的重点和热点,现已取得一定成果[3]。与此同时,观赏石斛作为盆景和鲜切花,多为2~3年生,花败后其老茎将被丢弃,造成一定程度上的资源浪费。另一方面,中药石斛由于临床用量大,加之过度开采、自然繁殖率低下、生长缓慢等因素,野生资源枯竭等问题日益突出。由此,开发观赏石斛的药用价值,使其填补中药石斛资源短缺的空白,减少资源上的浪费显得尤为重要。
1.2.2 观赏石斛的开发利用还可深入
有研究建立了对以春石斛和秋石斛为代表的观赏石斛和以铁皮石斛、金钗石斛、鼓槌石斛和叠鞘石斛为代表的药用石斛的抗菌模型,抑菌活性结果表明,春石斛‘920’和铁皮石斛的乙酸乙酯萃取物对5种农业病原真菌均有一定程度的抑制活性,尤其对胶胞炭疽菌有较强的抑制活性[2]。而对细菌的作用未见报道,为充分发掘观赏石斛的药用潜能,本课题以铁皮石斛为对照,对观赏石斛秋石斛中的索尼娅(Sonia)的抗菌活性部位进行研究,分离观赏石斛中的成分来做抗菌活性实验,以期对观赏石斛有进一步的认识,为观赏石斛的开发和利用提供科学的依据。
1.2.3 研究抗菌部位的意义
市场上的抗菌药物以西药占据主导地位,人们青睐西药疗效快的特点,但随着社会的发展,人们越来越多的认识到抗生素滥用的严重后果,与此同时,中药抗菌被越来越重视,开发利用中药的抗菌作用显得尤为重要。而分离出中药的抗菌活性部位来对症使用能够减少中药的副作用。
综上所述,由于石斛药用历史悠久且目前观赏石斛栽培日渐成熟,然而数量渐多却只用于观赏造成资源浪费,开发观赏石斛的药用价值,使其填补中药石斛资源短缺的空白,减少资源上的浪费显得尤为重要。
1.3 石斛的概述
铁皮石斛为兰科植物Dendrobium officinale Kimura et Migo的干燥茎[1]。味甘,微 寒。归胃、肾经。药用历史悠久,早在秦汉时期的《神农本草经》就有的记载。石斛抗疲劳,有强身健体之效,益胃,生津。在《日华子本草》中记载石斛“治虚损劳弱,壮筋骨”,《药性论》“养肾气,益力”,《本草纲目拾遗》“已劳损”,《本草备要》“补虚劳”都说明石斛具有抗疲劳、强身健体之功效。《神农本草经》有“久服厚肠胃”的记载”。《名医别录》、《本草衍义》、《本草纲目》、《本草再新》等中医药古籍也有“平胃气”,“治胃中虚热”等类似记载,称石斛为“肠胃药”。“生津”是铁皮石斛的一大功效《本草纲目拾遗》记载石斛能“清胃,除虚热,生津”。“生津”。如今对于石斛的研究越来越深入,现代药理学研究表明,石斛对非特异性及特异性免疫均有增强作用。此外还能抗氧化,促消化,促进唾液分泌,降血糖,降血压, 抗 肝损伤,抗肿瘤。其中,铁皮石斛为兰科植物 Dendrobium officinale Kimura et Migo的干燥茎[1],自 1963年《中国药典》以“耳环石斛”收载以来,历经 1977—2005年共计6版的变革,铁皮石斛始终为石斛项下品种。铁皮石斛在民间素有“救命仙草”之称,具有“滋阴清热,益胃生津”之功效,成书于1000多年前的《道藏》尊其为“中华九大仙草”之首。由于其全面的滋阴补益作用和广泛的保健功效,铁皮石斛一直被视为石斛中的珍品,2010年版《中国药典》将铁皮石斛单列而区别于其他石斛[3]。

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