农药残留检测试纸条在基质中的稳定性测试

本论文利用胶体金标记快速检测技术,开展胶体金试纸条在基质中的稳定性研究。试验中,用胶体金试纸条对农药稀释液进行检测,同时将农药稀释液加入实际样品中用胶体金试纸条进行残留检测。观测胶体金试纸条的消线情况,研究胶体金试纸条在基质中的稳定性。试验结果表明胶体金试纸条在基质中的消线情况与农药稀释液检测中的消线情况相近,证明其在基质中的检测结果稳定可靠,可以作为一种简便、快捷的就地检测方法用于农产品中农药残留的检测。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1实验器材与仪器 2
1.2实验方法 2
1.2.1百菌清胶体金试纸条检测2
1.2.2实际样品(白菜)百菌清胶体金试纸条检测2
1.2.3乙草胺稀释液胶体金试纸条检测3
1.2.4实际样品(花生)乙草胺胶体金试纸条检测3
1.2.5甲霜灵稀释液胶体金试纸条检测3
1.2.6实际样品(黄瓜)甲霜灵胶体金试纸条检测3
1.2.7甲草胺稀释液胶体金试纸条检测3
1.2.8实际样品(花生)甲草胺胶体金试纸条检测4
1.2.9除草定稀释液胶体金试纸条检测4
1.2.10甲萘威稀释液胶体金试纸条检测4
1.2.11实际样品(白菜)甲萘威胶体金试纸条检测4
1.2.12吡虫啉稀释液胶体金试纸条检测4
1.2.13实际样品(白菜、黄瓜)吡虫啉胶体金试纸条检测5
1.2.14西玛津稀释液胶体金试纸条检测5
1.2.15实际样品(玉米)西玛津胶体金试纸条检测5
2结果与分析5
2.1百菌清胶体金试纸条测试5
2.2乙草胺胶体金试纸条测试6
2.3甲霜灵胶体金试纸条测试7
2.4甲草胺胶体金试纸条测试8
2.5除草定胶体金试纸条测试9
2.6甲萘威胶体金试纸条测试9
2.7吡虫啉胶体金试纸条测试10
2.8西玛津胶体金试纸条测试11
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致谢13
参考文献13
农药残留检测试纸条在基质中的稳定性测试
引言
引言
化学农药是一类能够有效防治植物病虫害、草害和控制植物生长发育的化学药剂,在防治植物病虫草害,提升农作物产量和保护林牧业生产等方面具有非常重要的作用[1]。在农业生产中,人们大量使用化学农药,在其制造、转运、销售、使用、搁置和处理的过程中产生了严重的环境问题,造成了难以挽回的损失[2]。同时,化学农药残留引起了许多食品安全事件,近些年受到广泛关注。因此,农药残留检测对于环境安全和人类健康具有重要意义。
在进行农药残留检测时,传统分析仪器检测结果较为准确,但也具有很大的局限性,在需要就地快速检测大量样品时不实用[3]。当前,很多适用于现场快速检测的新的检测方法正在被大力开发[4]。免疫分析技术是近年来发展起来的新技术。其利用抗体与抗原的特异性识别和结合反应,对待测物质进行定性和定量分析。这项技术具有检测时间短、结果准确、分析量大、使用过程简单、检测费用低等许多优点[5]。免疫分析方法受到各国科技工作者的认可,与高效液相色谱法、气相色谱法被美国化学学会列为农药残留分析的三大核心技术[6]。在实际应用中,这项技术具有很大的发展和应用潜力[7][8]。
胶体金免疫技术是引入胶体金标记物的免疫分析技术,凭借独特的优势,这项技术在近几年快速发展, 已经发展成为一项高效、高灵敏度的免疫检测技术[9]。目前,胶体金免疫层析技术已在动物疾病检测、毒物及药物残留检测、重金属离子监测等方面广泛应用[10]。
胶体金免疫层析技术利用胶体金作为标记物,将其与抗体结合。利用胶体金标记,对抗体与抗原和二抗的免疫反应进行示踪,在试纸条上显现红色线条或消线现象,以此判断待测物的性质。根据胶体金标记目标物的不同,可分为夹心法、间接法和竞争抑制法,本试验使用的是竞争法免疫层析试纸条。其原理是用硝酸纤维素膜(NC膜)作为试纸条的载体,将人工抗原和二抗包被到NC膜上作为检测线和质控线,待测物在流动的过程中与胶体金标记的单克隆抗体结合,抗体和NC膜检测线上人工抗原也会结合, 金标抗体结合位点有限,两个结合反应相竞争,竞争使得待测物浓度与金标抗体结合少时,检测线会显红色;待测物与金标抗体大量结合时,检测线出现消线现象。没有跟检测线包被的人工抗原结合的金标抗体会继续向上流动至质控线与二抗结合,使质控线显红色,若质控线不显红色,则试纸条检测失效。
免疫分析方法在应用中难免会受到基质影响。实际样品及其提取物中常含重金属离子、腐殖质和色素等杂质,这些杂质能干扰免疫反应。免疫分析方法受基质影响会降低稳定性、灵敏度,甚至影响到试验结果[11]。因此,在胶体金免疫试纸条研发过程中进行其在基质中的稳定性测试,以确保试纸条检测结果的稳定可靠。
1 材料与方法
1.1 实验材料与仪器
百菌清、乙草胺、甲霜灵、甲草胺、除草定、甲萘威、吡虫啉、西玛津等农药来自上海农科院。白菜、花生、黄瓜、玉米等采购自南京周边菜市场。百菌清胶体金试纸条、乙草胺胶体金试纸条、甲霜灵胶体金试纸条、甲草胺胶体金试纸条、除草定胶体金试纸条、甲萘威胶体金试纸条、吡虫啉胶体金试纸条、西玛津胶体金试纸条由实验室自行研制。5%甲醇的PBST溶液、80%甲醇溶液、100%甲醇溶液、100%丙酮溶液、80%丙酮溶液、10%丙酮溶液、5%丙酮溶液等试剂为分析纯试剂。冰箱、培养皿、剪刀、研钵、振荡器等仪器由实验室提供。
1.2 实验方法
1.2.1 百菌清胶体金试纸条检测

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