大豆疫霉rxlr效应分子avh94互作靶标的筛选

疫霉属(Phytophthora)是一类重要的植物病原菌,该属的70多个种中绝大多数可以侵染双子叶植物,给农业生产和生态环境造成严重破坏[1]。其中大豆疫霉(P. sojae)侵染大豆引起的疫霉根腐病是大豆生产上的一种毁灭性病害,导致全球每年高达十几亿美元的直接经济损失[2]。为了建立侵染关系,大豆疫霉菌通过分泌效应分子来抑制或干扰植物的免疫反应,从而创造有利于自身侵染并繁殖的环境。大豆疫霉分泌的RxLR类效应分子Avh94 是能够抑制Bax(老鼠细胞凋亡前体蛋白)以及Avh238、Avh241等效应分子引起的植物细胞坏死反应,但其与寄主植物的互作靶标尚不清楚。本研究利用酵母双杂交的方法筛选并发现Avh94 可以与寄主植物大豆中的eIF-3f蛋白互作,该结果对认识大豆疫病的致病分子机理乃至设计作物疫病的防治策略具有理论和实践意义。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1 供试材料 2
1.1.1 供试菌株2
1.1.2 实验所需培养基2
1.1.3 供试载体质粒3
1.1.4 抗生素和主要试剂3
1.2 酵母双杂载体构建3
1.2.1 大豆疫霉基因组DNA提取3
1.2.2 构建酵母筛库表达载体4
1.2.3 实验载体名称及用途4
1.3 Avh 94毒性与自激活活性检测4
1.3.1 酵母感受态细胞的制备及转化4
1.3.2 Western Blot 检测 Avh94 蛋白在酵母体内表达5
1.3.3 自激活验证5
1.4 酵母筛库5
1.5 一对一验证6
2 结果与分析6
2.1 基因克隆和载体构6
2.2 Avh94 无毒性无自激活活性6
2.3 酵母双杂交筛库结果7
2.4 一对一验证筛库结果7
3 讨论8
致谢9
参考文献9
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Avh94互作靶标的筛选

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