稻瘟病菌精氨酸合成相关基因mocpa2的功能分析

摘要：稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)是水稻生产上最具破坏性的病原菌之一，由其引起的稻瘟病严重威胁着全球水稻的生产安全。本实验室前期研究发现，8个G蛋白信号调控因子(Regulators of G-protein signaling, RGS) MoRgs1-8参与调控稻瘟病菌的营养生长、无性/有性繁殖、附着胞分化、细胞壁完整性及致病性等过程。为进一步了解MoRgs蛋白的分子调控机制，采用双向电泳技术在?Morgs突变体中鉴定到76个差异表达蛋白，其中10个参与氨基酸代谢过程。本课题对其中一个精氨酸合成相关基因MoCPA2 (Carbamyl Phosphate synthetase A，MGG_04503)进行了功能分析。该基因在?Morgs1突变体中显著下调表达。采用同源重组技术对其进行敲除突变发现，与野生型Guy11比较，?Mocpa2突变体生长减慢、产孢和致病能力均显著下降。进一步分析发现，该突变体在基本培养基MM上不能生长，添加外源的精氨酸可恢复突变体的致病能力，表明MoCPA2通过参与精氨酸的合成从而调控病菌的生长发育和致病过程。研究结果对深入了解稻瘟病菌的致病分子机制及开发新型农药提供潜在靶标具有重要的理论指导意义。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言2
1 材料与方法.2
1.1 材料..2
1.1.1供试的菌株和培养基2
1.1.2酵母菌株及培养条件3
1.2 方法3
1.2.1敲除载体的制备3
1.2.2稻瘟病菌的原生质体转化3
1.2.3目的基因片段和载体的酵母转化4
1.2.4阳性酵母质粒的大肠杆菌转化4
1.2.5互补菌株的获得4
1.2.6突变体的菌落形态和营养生长测定....4
1.2.7突变体的产孢测定4
1.2.8致病性测定4
1.2.9大麦撕皮观察测定5
2 结果与分析.5
2.1敲除载体及互补载体的构建.... ..5
2.2 MoCPA2参与调控营养生长....5
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2.3 MoCPA2参与稻瘟病菌的产孢过程6
2.4 MoCPA2参与稻瘟病菌的致病过程7
2.5 MoCPA2参与侵染过程7
3 讨论.8
致谢.9
参考文献.9稻瘟病菌精氨酸合成相关基因MoCPA2的功能分析

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