大豆疫霉具有核定位信号的几个效应分子的克隆和亚细胞定位
:大豆疫霉（Phytophthora sojae）隶属于茸鞭生物界卵菌门疫霉属，能够侵染大豆，引起大豆根腐病，是大豆生产上毁灭性病害之一。大豆疫霉和大豆的互作符合“基因对基因”假说，合理利用大豆抗病基因是控制大豆疫病的最有效措施。研究大豆疫霉侵染大豆（Glycine max）过程中效应分子的作用机制对于进一步揭示病原菌的侵染机制有非常重要的作用。效应分子在植物细胞中的亚细胞定位则初步揭示了其作用位点。已有研究发现有些效应分子具有核定位信号的功能，核定位信号对于效应蛋白入寄主细胞核起着重要的引导作用。本研究综合之前对于大豆疫霉效应分子功能的大规模筛选结果，挑选出了具有核定位信号的几个代表性的RxLR效应分子，进行在植物体内进行亚细胞定位实验。我们对这几个效应分子在植物中亚细胞定位实验，实验发现，该些效应分子定位于植物细胞的细胞核内，有助于进一步分析核定位信号在病原菌与植物互作机制中所起到的重要作用。
目录
摘要 .....................................................................................1
关键词..................................................................................1
Abstract.1
Key words......................................................................................................1
引言.............................................................................................................2
1材料与方法 ..........................................................................................3
1.1 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: #351916072#
基本材料 .....................3
1.2具有NLS信号的效应分子的克隆与重组质粒的构建 ....................................................3
1.2.1具有核定位信号的几个效应分子的克隆........................................................................3
1.2.2目的片段与质粒载体连接，构建载体............................................................................5
1.3 大肠杆菌与农杆菌转化......................................................................................................5
1.3.1大肠杆菌JM109感受态细胞的制备...............................................................................5
1.3.2农杆菌GV3101 感受态细胞的制备...............................................................................5
1.3.3热激法转化大肠杆菌........................................................................................................6
1.3.4电击转化农杆菌................................................................................................................6
1.4农杆菌注射烟草片...............................................................................................................7
1.5 烟草瞬时表达融合蛋白的定位观察................................................................................7
2结果..................................................................................................7
2.1具有NLS的几个效应分子在植物细胞中的亚细胞定位..........7
2.2具有NLS的效应分子Avh52的功能分析......................................8
3讨论.................................................................................................8
致谢.................................................................................................10
参考文献.............................................................................................10
大豆疫霉具有核定位信号的几个效应分子的克隆
与亚细胞定位
目录
摘要 .....................................................................................1
关键词..................................................................................1
Abstract.1
Key words......................................................................................................1
引言.............................................................................................................2
1材料与方法 ..........................................................................................3
1.1 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: #351916072#
基本材料 .....................3
1.2具有NLS信号的效应分子的克隆与重组质粒的构建 ....................................................3
1.2.1具有核定位信号的几个效应分子的克隆........................................................................3
1.2.2目的片段与质粒载体连接，构建载体............................................................................5
1.3 大肠杆菌与农杆菌转化......................................................................................................5
1.3.1大肠杆菌JM109感受态细胞的制备...............................................................................5
1.3.2农杆菌GV3101 感受态细胞的制备...............................................................................5
1.3.3热激法转化大肠杆菌........................................................................................................6
1.3.4电击转化农杆菌................................................................................................................6
1.4农杆菌注射烟草片...............................................................................................................7
1.5 烟草瞬时表达融合蛋白的定位观察................................................................................7
2结果..................................................................................................7
2.1具有NLS的几个效应分子在植物细胞中的亚细胞定位..........7
2.2具有NLS的效应分子Avh52的功能分析......................................8
3讨论.................................................................................................8
致谢.................................................................................................10
参考文献.............................................................................................10
大豆疫霉具有核定位信号的几个效应分子的克隆
与亚细胞定位
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