黑腹果蝇对9种农药的敏感性测定
随着农药广泛而大量的使用，害虫抗药性问题越来越严峻，目前，转基因果蝇在研究害虫抗药性问题上取得重大突破，本实验采用毒饲料法测定9种杀虫剂（烯啶虫胺、吡虫啉、噻虫嗪、呋虫胺、氟啶虫胺腈、氯虫苯甲酰胺、氟虫双酰胺、毒死蜱和氟啶虫酰胺）对黑腹果蝇成虫和幼虫的杀虫活性。结果表明毒死蜱对黑腹果蝇幼虫和成虫杀虫活性最大,LC50值分别为0.222mg·L－1和0.330mg·L－1，仅为氟啶虫酰胺的1/52，为氟苯虫酰胺的1/949。呋虫胺、噻虫嗪对黑腹果蝇的幼虫和成虫均表现出一定的生物活性，且对幼虫的杀虫活性高于成虫。
目录
摘要 1
关键词1
Abstract 1
Key words 1
引言 1
1材料与方法2
1.1材料 2
1.1.1供试药剂2
1.1.2供试虫源2
1.1.3仪器设备2
1.2 方法 2
1.2.1果蝇饲料配方 2
1.2.2毒饲料配方 3
1.2.3 杀虫剂对黑腹果蝇成虫的生物活性3
1.2.4杀虫剂对黑腹果蝇幼虫的生物活性3
1.3 数据统计与分析3
2结果与分析3
2.1 杀虫剂对黑腹果蝇成虫的生物活性3
2.2 杀虫剂对黑腹果蝇幼虫的生物活性4
3 讨论5
致谢 6
参考文献 6
表1供试药剂及提供企业3
表2 9种杀虫剂对黑腹果蝇成虫的生物活性 4
表3 9种杀虫剂对黑腹果蝇幼虫的生物活性 4
黑腹果蝇对9种农药的敏感性测定
引言
引言
农业害虫抗药性问题已成为当今世界农作物化学保护工作中面临的一大难题。目前对于害虫的防治主要包括化学防治、物理防治、生物防治等。其中化学防治发挥着主要作用，但是随着化学药剂长期的、大量的不合理使用， 害虫抗药性变得日趋复杂。害虫在几年内就可能对新型杀虫剂产生至高水平抗药性，它不仅干扰了农药的研发、生产和销售,同时妨碍了害虫的综合治理。
9种常规杀虫剂（呋虫胺、烯啶虫 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
胺、噻虫嗪、毒死蜱、氟啶虫酰胺、吡虫啉、氟啶虫胺腈、氟虫双酰胺、氯虫苯甲酰胺）分别属于新烟碱类、生长调节剂类、有机磷类、双酰胺类，对水稻害虫具有良好的防治效果。由于它们的长期大量使用，害虫抗药性也随之产生。有报道称褐飞虱对吡虫啉、噻虫嗪等新烟碱类杀虫剂产生抗药性的原因与体内过表达的P450代谢酶有关，但产生抗性的具体机制尚不明确。由于害虫对杀虫剂的抗性受到许多因素的影响，因此害虫的抗药性机理显得较为复杂，直接对害虫抗药性机理进行研究也较为困难。LAMP技术在检测杀菌剂靶标突变中发挥巨大作用，但遗憾是由于害虫的遗传背景的复杂性并未得到有效应用。由于大量的潜在候选基因和所涉及到的基因家族是快速发展的，同时等位基因个体基因的识别参与对杀虫剂产生抗药性的代谢解毒研究也很难。各种方法也曾被用来确定候选基因参与杀虫剂抗药性当中，大多数情况下，已经使用PCR的方法或转录水平比较微阵列，尽管这些技术很快被RNAseq所取代。由于模式生物黑腹果蝇生长周期短，易繁殖，遗传背景简单等原因，在研究杀虫剂问题中也发挥也来越大的作用。利用转基因果蝇技术可将其他昆虫与抗药性相关的候选基因在其体内进行超表达，揭示其杀虫剂抗性功能，从而有助于深入探索杀虫剂抗药性机理。目前，转基因果蝇已在许多研究领域受到青睐，如发育生物学领域、神经生物学领域和人类疾病等。如Daborn 等于2002年将抗DDT果蝇品系中的与抗性相关的 Cyp6g1基因转移到果蝇中来检测这个基因是否过转录等[1]。
因此，在实验中，我们以模式生物黑腹果蝇为研究对象，测定其对常用杀虫剂的抗药性。实验结果可为进一步研究杀虫剂抗性机制的探索和新型杀虫剂开发奠定基础。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试药剂
供试原药（表1）均先以丙酮为溶剂配制成母液， 试验时用丙酮倍比稀释成56个浓度梯度。
1.1.2 供试虫源
黑腹果蝇：W118品系来源于东南大学生命科学研究院潘玉峰课题组
1.1.3仪器设备
恒温箱、电子天平、微波炉、生化培养箱等。
1.2 方法
1.2.1 果蝇饲料配方
100mL体系中，5g红糖、0.5g琼脂，11g红糖，2.5g酵母，加入无菌水至100mL，用微波炉煮沸后，冷却至50℃，后加入0.6mL丙酸，制成果蝇饲料。
表1 供试药剂及提供企业
Table 1 Trial fungicides and Provide enterprise
杀虫剂
Insecticide
有效成分含量
A.I. %
药剂类型
Insecticide group
生产厂家
Manufacturer
呋虫胺Dinotefuran
95%
新烟碱类
江阴苏利化学股份有限公司
烯啶虫胺Nitenpyram
95%
烟碱类
南京南农农药
噻虫嗪Thiamethoxam
98%
烟碱类
利民化工有限公司
毒死蜱Chlorpyrifos
95%
有机磷类
南京红太阳集团
氟啶虫酰胺Cyflumetofen
95%
生长调节剂类
日本石原农药
吡虫啉Chlorpyrifos
97%
烟碱类
河北威远农化有限公司
氟啶虫胺腈Sulfoxaflor
95%
烟碱类
美国陶氏化学
氟虫双酰胺flubendiamide
95%
目录
摘要 1
关键词1
Abstract 1
Key words 1
引言 1
1材料与方法2
1.1材料 2
1.1.1供试药剂2
1.1.2供试虫源2
1.1.3仪器设备2
1.2 方法 2
1.2.1果蝇饲料配方 2
1.2.2毒饲料配方 3
1.2.3 杀虫剂对黑腹果蝇成虫的生物活性3
1.2.4杀虫剂对黑腹果蝇幼虫的生物活性3
1.3 数据统计与分析3
2结果与分析3
2.1 杀虫剂对黑腹果蝇成虫的生物活性3
2.2 杀虫剂对黑腹果蝇幼虫的生物活性4
3 讨论5
致谢 6
参考文献 6
表1供试药剂及提供企业3
表2 9种杀虫剂对黑腹果蝇成虫的生物活性 4
表3 9种杀虫剂对黑腹果蝇幼虫的生物活性 4
黑腹果蝇对9种农药的敏感性测定
引言
引言
农业害虫抗药性问题已成为当今世界农作物化学保护工作中面临的一大难题。目前对于害虫的防治主要包括化学防治、物理防治、生物防治等。其中化学防治发挥着主要作用，但是随着化学药剂长期的、大量的不合理使用， 害虫抗药性变得日趋复杂。害虫在几年内就可能对新型杀虫剂产生至高水平抗药性，它不仅干扰了农药的研发、生产和销售,同时妨碍了害虫的综合治理。
9种常规杀虫剂（呋虫胺、烯啶虫 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
胺、噻虫嗪、毒死蜱、氟啶虫酰胺、吡虫啉、氟啶虫胺腈、氟虫双酰胺、氯虫苯甲酰胺）分别属于新烟碱类、生长调节剂类、有机磷类、双酰胺类，对水稻害虫具有良好的防治效果。由于它们的长期大量使用，害虫抗药性也随之产生。有报道称褐飞虱对吡虫啉、噻虫嗪等新烟碱类杀虫剂产生抗药性的原因与体内过表达的P450代谢酶有关，但产生抗性的具体机制尚不明确。由于害虫对杀虫剂的抗性受到许多因素的影响，因此害虫的抗药性机理显得较为复杂，直接对害虫抗药性机理进行研究也较为困难。LAMP技术在检测杀菌剂靶标突变中发挥巨大作用，但遗憾是由于害虫的遗传背景的复杂性并未得到有效应用。由于大量的潜在候选基因和所涉及到的基因家族是快速发展的，同时等位基因个体基因的识别参与对杀虫剂产生抗药性的代谢解毒研究也很难。各种方法也曾被用来确定候选基因参与杀虫剂抗药性当中，大多数情况下，已经使用PCR的方法或转录水平比较微阵列，尽管这些技术很快被RNAseq所取代。由于模式生物黑腹果蝇生长周期短，易繁殖，遗传背景简单等原因，在研究杀虫剂问题中也发挥也来越大的作用。利用转基因果蝇技术可将其他昆虫与抗药性相关的候选基因在其体内进行超表达，揭示其杀虫剂抗性功能，从而有助于深入探索杀虫剂抗药性机理。目前，转基因果蝇已在许多研究领域受到青睐，如发育生物学领域、神经生物学领域和人类疾病等。如Daborn 等于2002年将抗DDT果蝇品系中的与抗性相关的 Cyp6g1基因转移到果蝇中来检测这个基因是否过转录等[1]。
因此，在实验中，我们以模式生物黑腹果蝇为研究对象，测定其对常用杀虫剂的抗药性。实验结果可为进一步研究杀虫剂抗性机制的探索和新型杀虫剂开发奠定基础。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试药剂
供试原药（表1）均先以丙酮为溶剂配制成母液， 试验时用丙酮倍比稀释成56个浓度梯度。
1.1.2 供试虫源
黑腹果蝇：W118品系来源于东南大学生命科学研究院潘玉峰课题组
1.1.3仪器设备
恒温箱、电子天平、微波炉、生化培养箱等。
1.2 方法
1.2.1 果蝇饲料配方
100mL体系中，5g红糖、0.5g琼脂，11g红糖，2.5g酵母，加入无菌水至100mL，用微波炉煮沸后，冷却至50℃，后加入0.6mL丙酸，制成果蝇饲料。
表1 供试药剂及提供企业
Table 1 Trial fungicides and Provide enterprise
杀虫剂
Insecticide
有效成分含量
A.I. %
药剂类型
Insecticide group
生产厂家
Manufacturer
呋虫胺Dinotefuran
95%
新烟碱类
江阴苏利化学股份有限公司
烯啶虫胺Nitenpyram
95%
烟碱类
南京南农农药
噻虫嗪Thiamethoxam
98%
烟碱类
利民化工有限公司
毒死蜱Chlorpyrifos
95%
有机磷类
南京红太阳集团
氟啶虫酰胺Cyflumetofen
95%
生长调节剂类
日本石原农药
吡虫啉Chlorpyrifos
97%
烟碱类
河北威远农化有限公司
氟啶虫胺腈Sulfoxaflor
95%
烟碱类
美国陶氏化学
氟虫双酰胺flubendiamide
95%
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