频婆叶及花粉质量标准的初步研究
摘 要本实验在现有实验条件基础上，对频婆叶及花粉依次进行各项检测，为频婆叶及花粉标准制定奠定基础。参照《中国药典》2015版第四部通则2001显微鉴别法、0502薄层色谱法、0832水分测定法、2302灰分测定法、2201浸出物测定法开展各项研究，采用紫外-可见分光光度法建立总黄酮含量测定方法。结果确定了频婆叶及花粉的性状及粉末显微特征，山奈酚薄层鉴别斑点清晰、专属性强、重复性好，频婆花粉主要含有黄酮类、蒽醌类、鞣质、糖和苷、有机酸、氨基酸、蛋白质，此外还还有少量甾体类及三萜类，几乎不含生物碱、香豆素、强心苷类。叶及花粉水分测定结果10.23%、9.57%，总灰分7.52%、8.16%，酸不溶性灰分3.32%、4.22%，以水、50%乙醇、95%乙醇为溶剂浸出物含量分别为48.06%、54.16%、41.15%，35.0%、35.86%、29.24%，频婆叶及花粉总黄酮含量分别为22.21mg/g、18.11mg/g。本实验建立的显微鉴别、薄层鉴别、各检查项检测、浸出物及总黄酮含量测定达到了对频婆叶及花粉质量初步研究的目的，为后期深入研究提供数据支撑及产品开发奠定基础。
目录
1文献综述 1
1.1简介 1
1.2频婆研究现状 1
1.2.1苹果多酚研究进展 1
1.2.2苹果多糖研究进展 2
1.2.3其他 2
1.3 花粉研究现状 2
1.3.1生物活性研究进展 2
1.3.2临床应用现状 3
1.4立体依据 3
2 实验研究 4
2.1材料与仪器 4
2.1.1试验药材 4
2.1.2试剂、仪器 4
2.2试验方法 4
2.2.1性状鉴别 4
2.2.2显微鉴别 5
2.2.3理化鉴别 6
2.2.4薄层鉴别 10
2.2.5检查 12
2.2.6浸出物 12
2.2.7总黄酮含量测定 13
2.2.8实验结果总结 17
结论 19
参考文献 20
致谢 23
1文献综述 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
1.1简介
频婆叶及花粉为蔷薇科苹果属植物苹果(Malus pumila Mill.)的叶及花粉[1]。世界上苹果共有上万个品种，常用的有40多种，如富士、嘎啦、秦冠、元帅等[13]，自然分布在海拔5002500m的平原、山坡及丘陵处。在我国，苹果主产于陕西、山西、辽宁、河北、甘肃、山东等地。
频婆叶性寒、味苦。据明代《滇南本草》中记载：“敷脐上治阴症，又治产后血迷，经水不调，蒸热发烧，服之效”，又说“贴火毒疮，烧灰调油搽之”[1]。由此可见频婆叶凉血解毒功效显著，同时即可内服又可外敷。现代研究证实，频婆叶主要化学成分包括黄酮类（芦丁、异鼠李素、槲皮素等）、有机酸类（绿原酸、苹果酸等），鞣质，糖和苷（根皮苷、芸香苷、金丝桃苷等）、蒽醌类、维生素等[2]。具有抗菌、抗病毒、增强免疫力、抗氧化、抗肿瘤、防治心血管疾病等多种药理活性[38]。
花粉是植物的雄性细胞，也被称为植物的“精子”，早在汉代《神农本草经》便将蒲黄和松黄列为上品，称之“主治心腹，邪气，利小便，消痪血久服轻身益气力，延年”，《金匮要略》中对“蒲黄”药效有了更准确的认识，其后在《唐本草》、《千金、食治》等均有关花粉药用的记录。花粉富含蛋白质、氨基酸、维生素、脂类等多种营养成分以及酶、辅酶、激素、黄酮、多肽、微量元素等生物活性物质，具有“微型营养库”之称，既可做营养保健品，同时又具有多种药用价值[9]。具有增强免疫、抗衰老、调节内分泌、抗肿瘤、养颜美容等功效；同时对心脑血管病、糖尿病、肝病、贫血等症也具有一定治疗作用[1012]。
1.2频婆研究现状
目前，国内外研究热点主要为苹果多酚(Apple Polyphenols)及苹果多糖（Apple polysaccharides）的多种药理活性研究，现总结如下：
1.2.1苹果多酚研究进展
据文献报道，苹果多酚（polyphenols)具有抗氧化、抗病毒[46]、清除自由基[7,8]、抗菌、抗肿瘤[14,15]、降血糖[16]、降血脂[17]、防治心脑血管疾病等作用。
王峰[16]等人发现苹果多酚及其活性化合物（槲皮素、绿原酸、儿茶素、根皮苷）对高脂饲料喂养的糖尿病小鼠具有明显的降糖效果，通过深入机制研究发现根皮苷可通过上调PPARγ、InsR、GLUT4基因表达，或激活丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶进而激活下游靶蛋白激酶，最终增加糖脂循环及胰岛素转导，最终是血糖降低。
胡莎[18]由苹果中特殊化合物——根皮苷为原料，以果蝇作实验对象，建立寿命试验动物模型，探究根皮苷体内抗氧化、抗衰老作用机理，结果表明，根皮苷可延长紫外线照射损伤的果蝇，及高脂食物所致果蝇的寿命，具有抗氧化，延缓衰老的作用。
廖春丽[19]等人采用滤纸片法探究苹果多酚对常见细菌（金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及枯草芽孢杆菌）的抑菌活性，结果苹果多酚显现出良好的抑菌作用。孙爱红[19]等人对上述三种常见菌、黄杆菌SHL45及荧光假单胞菌SHL5、SHL7共6中试验菌株进行抑菌作用考察，结果显示苹果多酚对6中细菌株均有较强抑菌作用。
1.2.2苹果多糖研究进展
苹果多糖具有抗病毒[20]、抗氧化[21]、抗菌、预防结肠炎癌变[2224]，肝损伤保护作用等药理作用[25]。
张典[24]等人发现苹果多糖可以预防结肠癌病变（colitisassociated colorectal cancer）的发生，其作用机理可能是抑制了炎症黏膜 TLR4 因子的表达，降低MyD88 /NFKB 信号通路活化作用。
杨素[25]研究发现苹果果皮多糖及果肉多糖对四氯化碳所致急性肝损伤小鼠均具有有效肝保护作用，且果肉多糖效果更佳。
1.2.3其他
此外，苹果果胶具有清除自由基，防癌抑菌等作用[26]，注射用苹果胶与氯化钠等组方制成代血浆亦早以应用于临床[27]。
1.3 花粉研究现状
1.3.1生物活性研究进展
目录
1文献综述 1
1.1简介 1
1.2频婆研究现状 1
1.2.1苹果多酚研究进展 1
1.2.2苹果多糖研究进展 2
1.2.3其他 2
1.3 花粉研究现状 2
1.3.1生物活性研究进展 2
1.3.2临床应用现状 3
1.4立体依据 3
2 实验研究 4
2.1材料与仪器 4
2.1.1试验药材 4
2.1.2试剂、仪器 4
2.2试验方法 4
2.2.1性状鉴别 4
2.2.2显微鉴别 5
2.2.3理化鉴别 6
2.2.4薄层鉴别 10
2.2.5检查 12
2.2.6浸出物 12
2.2.7总黄酮含量测定 13
2.2.8实验结果总结 17
结论 19
参考文献 20
致谢 23
1文献综述 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
1.1简介
频婆叶及花粉为蔷薇科苹果属植物苹果(Malus pumila Mill.)的叶及花粉[1]。世界上苹果共有上万个品种，常用的有40多种，如富士、嘎啦、秦冠、元帅等[13]，自然分布在海拔5002500m的平原、山坡及丘陵处。在我国，苹果主产于陕西、山西、辽宁、河北、甘肃、山东等地。
频婆叶性寒、味苦。据明代《滇南本草》中记载：“敷脐上治阴症，又治产后血迷，经水不调，蒸热发烧，服之效”，又说“贴火毒疮，烧灰调油搽之”[1]。由此可见频婆叶凉血解毒功效显著，同时即可内服又可外敷。现代研究证实，频婆叶主要化学成分包括黄酮类（芦丁、异鼠李素、槲皮素等）、有机酸类（绿原酸、苹果酸等），鞣质，糖和苷（根皮苷、芸香苷、金丝桃苷等）、蒽醌类、维生素等[2]。具有抗菌、抗病毒、增强免疫力、抗氧化、抗肿瘤、防治心血管疾病等多种药理活性[38]。
花粉是植物的雄性细胞，也被称为植物的“精子”，早在汉代《神农本草经》便将蒲黄和松黄列为上品，称之“主治心腹，邪气，利小便，消痪血久服轻身益气力，延年”，《金匮要略》中对“蒲黄”药效有了更准确的认识，其后在《唐本草》、《千金、食治》等均有关花粉药用的记录。花粉富含蛋白质、氨基酸、维生素、脂类等多种营养成分以及酶、辅酶、激素、黄酮、多肽、微量元素等生物活性物质，具有“微型营养库”之称，既可做营养保健品，同时又具有多种药用价值[9]。具有增强免疫、抗衰老、调节内分泌、抗肿瘤、养颜美容等功效；同时对心脑血管病、糖尿病、肝病、贫血等症也具有一定治疗作用[1012]。
1.2频婆研究现状
目前，国内外研究热点主要为苹果多酚(Apple Polyphenols)及苹果多糖（Apple polysaccharides）的多种药理活性研究，现总结如下：
1.2.1苹果多酚研究进展
据文献报道，苹果多酚（polyphenols)具有抗氧化、抗病毒[46]、清除自由基[7,8]、抗菌、抗肿瘤[14,15]、降血糖[16]、降血脂[17]、防治心脑血管疾病等作用。
王峰[16]等人发现苹果多酚及其活性化合物（槲皮素、绿原酸、儿茶素、根皮苷）对高脂饲料喂养的糖尿病小鼠具有明显的降糖效果，通过深入机制研究发现根皮苷可通过上调PPARγ、InsR、GLUT4基因表达，或激活丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶进而激活下游靶蛋白激酶，最终增加糖脂循环及胰岛素转导，最终是血糖降低。
胡莎[18]由苹果中特殊化合物——根皮苷为原料，以果蝇作实验对象，建立寿命试验动物模型，探究根皮苷体内抗氧化、抗衰老作用机理，结果表明，根皮苷可延长紫外线照射损伤的果蝇，及高脂食物所致果蝇的寿命，具有抗氧化，延缓衰老的作用。
廖春丽[19]等人采用滤纸片法探究苹果多酚对常见细菌（金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及枯草芽孢杆菌）的抑菌活性，结果苹果多酚显现出良好的抑菌作用。孙爱红[19]等人对上述三种常见菌、黄杆菌SHL45及荧光假单胞菌SHL5、SHL7共6中试验菌株进行抑菌作用考察，结果显示苹果多酚对6中细菌株均有较强抑菌作用。
1.2.2苹果多糖研究进展
苹果多糖具有抗病毒[20]、抗氧化[21]、抗菌、预防结肠炎癌变[2224]，肝损伤保护作用等药理作用[25]。
张典[24]等人发现苹果多糖可以预防结肠癌病变（colitisassociated colorectal cancer）的发生，其作用机理可能是抑制了炎症黏膜 TLR4 因子的表达，降低MyD88 /NFKB 信号通路活化作用。
杨素[25]研究发现苹果果皮多糖及果肉多糖对四氯化碳所致急性肝损伤小鼠均具有有效肝保护作用，且果肉多糖效果更佳。
1.2.3其他
此外，苹果果胶具有清除自由基，防癌抑菌等作用[26]，注射用苹果胶与氯化钠等组方制成代血浆亦早以应用于临床[27]。
1.3 花粉研究现状
1.3.1生物活性研究进展
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