酸枣仁总皂苷的提取工艺优化
摘 要本实验采取乙醇回流提取法提取酸枣仁总皂苷，采用紫外分光光度法检测酸枣仁总皂苷的含量，检测波长为543 nm。在单因素试验的基础上，运用正交试验考察提取温度、乙醇浓度、料液比和提取时间对酸枣仁总皂苷提取工艺的影响。通过方差分析得到最佳提取条件最适料液比为1:20，加入80%的乙醇，最适提取温度为70 ℃，回流提取2.0 h。在这个条件下进行了三次验证试验，最终得到酸枣仁总皂苷的平均含量为0.861 mg/g，表明该工艺稳定，易于工业化放大。
目 录
1 绪论 1
1.1 药材简介 1
1.2 化学成分研究 1
1.2.1 皂苷类 1
1.2.2 黄酮类 2
1.2.3 三萜类 2
1.2.4 生物碱类 2
1.2.5 脂肪酸类 2
1.2.6 其他 2
1.3 药理作用研究 3
1.3.1 镇静催眠 3
1.3.2 降低血压 3
1.3.3 保护心肌细胞 3
1.3.4 抗惊厥作用 3
1.3.5 降血脂和防治动脉粥样硬化 4
1.3.6 抗心律失常 4
1.3.7 增强免疫力 4
1.3.8 抗肿瘤作用 4
1.4 临床应用 4
1.4.1 神经类疾病 5
1.4.2 神经系统疾病 5
1.4.3 循环系统疾病 5
1.5 研究的目的及意义 5
2 实验内容 7
2.1 材料与仪器 7
2.1.1 材料 7
2.1.2 仪器 7
2.2 实验方法 7
2.2.1 酸枣仁总皂苷的含量测定 7
2.2.2 单因素实验 8
2.2.3 正交试验 9
3 实验结果与分析 10
3.1 酸枣仁总皂苷含量测定 10
3.1.1 测定最大吸收波长 10
3.1.2 标准曲线的绘制 10
3.1.3 精密度试验结果 11
3.1.4 稳定性试验结 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: #351916072#
果 11
3.1.5 重复性试验结果 11
3.1.6 加样回收率试验结果 11
3.2 单因素试验结果与分析 12
3.2.1 提取温度 12
3.2.2 乙醇浓度 13
3.2.3 料液比 13
3.2.4 提取时间 14
3.3 正交试验设计与方差分析 14
3.4 最优提取条件的验证 16
结 论 17
参考文献 19
致 谢 21
1 绪论
1.1 药材简介
酸枣仁（Semen Ziziphi Spinosae）是鼠李科（Rhamnaceae）植物酸枣的干燥成熟种子[1]，又名枣仁、酸枣核、山枣仁等。酸枣仁大部分表面光滑，表面为褐色椭圆形，少数有点裂纹。酸枣仁九月底十月初采收，先将酸枣在水中泡一晚上，捞出后去掉最外层的果肉，然后将果核捣碎，最后取出种子，晒干即可。酸枣为多年生灌木，生长在向阳的山坡上或干燥不肥沃的土壤处，主要分布于我国北方各个省份，大致范围在北纬23°~43°之间。酸枣仁最外层的表皮较脆，胚为乳白色，且为油性物质。本品的味道比较甘甜，药性温和，入心、脾、肝、胆经。酸枣仁具有补肝、宁心安神、收敛虚汗和滋养津液的功效；常用于治疗虚烦引起的失眠，惊恐和体虚导致的多梦，津液散失使人口渴等症。
从古至今，酸枣仁作为医药领域当中重点研究对象之一，在多部医学典籍当中都曾有过记载。最先记载于《神农百草经》中，在本书里，论述了酸枣仁主要用于心腹寒热、邪结气聚病症以及四肢酸痛、湿痹等症状，若长期服用，不但能调理五脏，还能起到延年益寿、轻身健体的作用；在《本草纲目》中记载，将酸枣仁熟服可治疗胆虚引起的失眠、烦躁干渴以及盗汗等症；将其生服可以治疗胆热引起的神疲多睡之症；而在《名医别录》当中，论证了酸枣仁具有治疗心中烦闷不安、急躁易怒，气机阻滞所致的血虚和补肝益气之功效，使人身强体壮。
1.2 化学成分研究
此药材中主要含有皂苷类、黄酮类化合物、三萜类、生物碱和脂肪酸等化学成分。
1.2.1 皂苷类
从期刊中得知，此药材中含有的皂苷类化合物具有很好的催眠作用，现在有很多的酸枣仁被制成中成药，对治疗各个年龄阶段的失眠均有效。另外，它还有镇静作用，在临床上经常被用作治疗精神方面的疾病。目前，从此药材中分离的皂苷类物质有酸枣仁皂苷A、B，乙酰酸枣仁皂苷、酸枣仁皂苷C等[2]。这些物质都是由酸枣仁皂苷元连接不同种类的糖基团组成的。
1.2.2 黄酮类
经资料查询，从酸枣仁中分离得到的黄酮类物质主要有6"芥子酰斯皮诺素、6"阿魏酰斯皮诺素、葛根素、异牡荆素、黄酮苷、槲皮素和芦丁等[3]。黄酮类化合物还具有较强的药用和保健作用，现已成为保健食品研究中的热点之一。而且近年来，在各种回归大自然的心理影响下，我们越来越向往健康的生活方式。人们懂得养生，使用何种保健类药品能让我们的皮肤看起来白里透红，更有光泽，对使用的抗氧化药物是否为天然物质格外关注，因此这类天然化合物具有广阔的发展空间。
1.2.3 三萜类
酸枣仁中含有的三萜主要类型有：羽扇豆烷型、齐墩果烷型及Ceanothane型。目前，从酸枣仁中提取的三萜类化合物有白桦脂酸、白桦脂醇、齐墩果酸和美洲茶酸等。通过大量的实验表明，白桦脂醇不仅有消除炎症的作用，还具有对抗病毒的功效；白桦脂酸可以杀死恶性肿瘤细胞，因此能够治疗脑瘤以及白血病等疾病，但它不会杀害健康细胞。
1.2.4 生物碱类
尹升镇等[4]人从酸枣仁中提取得到丙酮和四氢呋喃甲醇两种化合物，由核磁共振和核磁共振氢谱共同检测，通过分析数据发现这两种物质是生物碱类化合物。有研究者用大孔吸附树脂分离出换环肽生物碱成分mucronine J，并且通过实验发现酸枣仁生物碱具有抗惊厥作用。
1.2.5 脂肪酸类
酸枣仁中含油量约为31.6%，主要含有油酸、亚油酸、十四酸、棕榈酸、9十六碳烯酸、13甲基十二酸等17种脂肪酸，这些占酸枣仁脂肪酸的比例较大，其中不饱和脂肪酸占总量的80%以上（其中油酸和亚油酸的含量较高），是人体不能合成，但又是人体不能缺少的物质[5]。并且每克中的维生素E有0.1867毫克，所以酸枣仁油的氧化稳定性较强。
目 录
1 绪论 1
1.1 药材简介 1
1.2 化学成分研究 1
1.2.1 皂苷类 1
1.2.2 黄酮类 2
1.2.3 三萜类 2
1.2.4 生物碱类 2
1.2.5 脂肪酸类 2
1.2.6 其他 2
1.3 药理作用研究 3
1.3.1 镇静催眠 3
1.3.2 降低血压 3
1.3.3 保护心肌细胞 3
1.3.4 抗惊厥作用 3
1.3.5 降血脂和防治动脉粥样硬化 4
1.3.6 抗心律失常 4
1.3.7 增强免疫力 4
1.3.8 抗肿瘤作用 4
1.4 临床应用 4
1.4.1 神经类疾病 5
1.4.2 神经系统疾病 5
1.4.3 循环系统疾病 5
1.5 研究的目的及意义 5
2 实验内容 7
2.1 材料与仪器 7
2.1.1 材料 7
2.1.2 仪器 7
2.2 实验方法 7
2.2.1 酸枣仁总皂苷的含量测定 7
2.2.2 单因素实验 8
2.2.3 正交试验 9
3 实验结果与分析 10
3.1 酸枣仁总皂苷含量测定 10
3.1.1 测定最大吸收波长 10
3.1.2 标准曲线的绘制 10
3.1.3 精密度试验结果 11
3.1.4 稳定性试验结 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: #351916072#
果 11
3.1.5 重复性试验结果 11
3.1.6 加样回收率试验结果 11
3.2 单因素试验结果与分析 12
3.2.1 提取温度 12
3.2.2 乙醇浓度 13
3.2.3 料液比 13
3.2.4 提取时间 14
3.3 正交试验设计与方差分析 14
3.4 最优提取条件的验证 16
结 论 17
参考文献 19
致 谢 21
1 绪论
1.1 药材简介
酸枣仁（Semen Ziziphi Spinosae）是鼠李科（Rhamnaceae）植物酸枣的干燥成熟种子[1]，又名枣仁、酸枣核、山枣仁等。酸枣仁大部分表面光滑，表面为褐色椭圆形，少数有点裂纹。酸枣仁九月底十月初采收，先将酸枣在水中泡一晚上，捞出后去掉最外层的果肉，然后将果核捣碎，最后取出种子，晒干即可。酸枣为多年生灌木，生长在向阳的山坡上或干燥不肥沃的土壤处，主要分布于我国北方各个省份，大致范围在北纬23°~43°之间。酸枣仁最外层的表皮较脆，胚为乳白色，且为油性物质。本品的味道比较甘甜，药性温和，入心、脾、肝、胆经。酸枣仁具有补肝、宁心安神、收敛虚汗和滋养津液的功效；常用于治疗虚烦引起的失眠，惊恐和体虚导致的多梦，津液散失使人口渴等症。
从古至今，酸枣仁作为医药领域当中重点研究对象之一，在多部医学典籍当中都曾有过记载。最先记载于《神农百草经》中，在本书里，论述了酸枣仁主要用于心腹寒热、邪结气聚病症以及四肢酸痛、湿痹等症状，若长期服用，不但能调理五脏，还能起到延年益寿、轻身健体的作用；在《本草纲目》中记载，将酸枣仁熟服可治疗胆虚引起的失眠、烦躁干渴以及盗汗等症；将其生服可以治疗胆热引起的神疲多睡之症；而在《名医别录》当中，论证了酸枣仁具有治疗心中烦闷不安、急躁易怒，气机阻滞所致的血虚和补肝益气之功效，使人身强体壮。
1.2 化学成分研究
此药材中主要含有皂苷类、黄酮类化合物、三萜类、生物碱和脂肪酸等化学成分。
1.2.1 皂苷类
从期刊中得知，此药材中含有的皂苷类化合物具有很好的催眠作用，现在有很多的酸枣仁被制成中成药，对治疗各个年龄阶段的失眠均有效。另外，它还有镇静作用，在临床上经常被用作治疗精神方面的疾病。目前，从此药材中分离的皂苷类物质有酸枣仁皂苷A、B，乙酰酸枣仁皂苷、酸枣仁皂苷C等[2]。这些物质都是由酸枣仁皂苷元连接不同种类的糖基团组成的。
1.2.2 黄酮类
经资料查询，从酸枣仁中分离得到的黄酮类物质主要有6"芥子酰斯皮诺素、6"阿魏酰斯皮诺素、葛根素、异牡荆素、黄酮苷、槲皮素和芦丁等[3]。黄酮类化合物还具有较强的药用和保健作用，现已成为保健食品研究中的热点之一。而且近年来，在各种回归大自然的心理影响下，我们越来越向往健康的生活方式。人们懂得养生，使用何种保健类药品能让我们的皮肤看起来白里透红，更有光泽，对使用的抗氧化药物是否为天然物质格外关注，因此这类天然化合物具有广阔的发展空间。
1.2.3 三萜类
酸枣仁中含有的三萜主要类型有：羽扇豆烷型、齐墩果烷型及Ceanothane型。目前，从酸枣仁中提取的三萜类化合物有白桦脂酸、白桦脂醇、齐墩果酸和美洲茶酸等。通过大量的实验表明，白桦脂醇不仅有消除炎症的作用，还具有对抗病毒的功效；白桦脂酸可以杀死恶性肿瘤细胞，因此能够治疗脑瘤以及白血病等疾病，但它不会杀害健康细胞。
1.2.4 生物碱类
尹升镇等[4]人从酸枣仁中提取得到丙酮和四氢呋喃甲醇两种化合物，由核磁共振和核磁共振氢谱共同检测，通过分析数据发现这两种物质是生物碱类化合物。有研究者用大孔吸附树脂分离出换环肽生物碱成分mucronine J，并且通过实验发现酸枣仁生物碱具有抗惊厥作用。
1.2.5 脂肪酸类
酸枣仁中含油量约为31.6%，主要含有油酸、亚油酸、十四酸、棕榈酸、9十六碳烯酸、13甲基十二酸等17种脂肪酸，这些占酸枣仁脂肪酸的比例较大，其中不饱和脂肪酸占总量的80%以上（其中油酸和亚油酸的含量较高），是人体不能合成，但又是人体不能缺少的物质[5]。并且每克中的维生素E有0.1867毫克，所以酸枣仁油的氧化稳定性较强。
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