超声辅助提取丁香中丁香酚的工艺研究(附件)
摘 要丁香是桃金娘科（Eugenia caryophyllata Thunb）植物，在我国主要生长于广东和广西，主要入药部位是花蕾。丁香酚是丁香油中的主要提取物，含量高至80%，一般药用均为人工合成的。而天然丁香酚优于人工丁香酚，随着丁香的药用价值被研究发现，丁香酚的药用价值也进一步提高。目前国内对超声辅助提取丁香的研究还比较少见，因此本文就丁香酚的提取方法作为研究对象。为了能更好的提取丁香中的有效成分丁香酚固选用超声辅助法对丁香进行提取。希望通过超声辅助提取丁香酚的研究成果为丁香制剂工艺提供一定的理论和实验依据。实验采用超声辅助法提取丁香酚，选取超声频率、提取时间、提取温度、料也比、乙醇浓度等单因素为提取因素，正交实验优选丁香酚的提取因素，优化丁香酚的提取工艺。实验结果表明：筛选超声频率、提取时间、料液比对丁香酚的提取影响更加明显。因此选用超声频率、提取时间、料液比做正交实验，结果表明超声频率为60khz，提取时间为60min，料也比为1:25时丁香酚的提取率最佳。目 录
1 绪论 1
1.1丁香概述 1
1.1.1 丁香简介 1
1.1.2 丁香功效 1
1.2 丁香酚的概述 1
1.3 丁香酚的药理作用 2
1.3.1 抑菌作用 2
1.3.2 麻醉效果 2
1.3.3 对中枢神经的作用 3
1.3.4 抗氧化性 3
1.3.5 抗肿瘤作用 3
1.3.6 促进透皮吸收作用 3
1.3.7 驱蚊作用 3
1.4 发展趋势 4
1.5 究本课题的目的和意义 4
2 实验与结果 5
2.1 实验材料 5
2.2 丁香预处理 5
2.3 丁香酚的提取及测定 5
2.3.1 丁香酚的提取 5
2.3.2 含量测定 5
2.4 系统适用性实验 5
2.5 制标准曲线 7
2.6 方法学考察 7
2.6.1 精密度检测 7
2.6.2 稳定性实验 8
2.6.3 重现性实验 8
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
丁香预处理 5
2.3 丁香酚的提取及测定 5
2.3.1 丁香酚的提取 5
2.3.2 含量测定 5
2.4 系统适用性实验 5
2.5 制标准曲线 7
2.6 方法学考察 7
2.6.1 精密度检测 7
2.6.2 稳定性实验 8
2.6.3 重现性实验 8
2.7 加样回收试剂 8
2.8 单因素实验 8
2.8.1 提取溶剂（乙醇）对丁香酚提取的影响 8
2.8.2 提取时间对丁香酚提取的影响 9
2.8.3 料液比对丁香酚提取的影响 9
2.8.4 提取温度次数对丁香酚提取的影响 9
2.8.5 超声频率对丁香酚提取的影响 9
2.8.6 单因素实验结论与分析 10
2.9 正交试验 10
2.9.1 实验结果及分析 11
2.10 方差分析 11
2.11 含量测定及验证试验 12
2.11.1 含量测定 12
2.11.2 验证试验 12
2.12 讨论 12
结 论 13
参考文献 14
致 谢 17
1 绪论
1.1丁香概述
1.1.1 丁香简介
桃金娘科植物的丁香其主要成份是丁香酚，干燥花蕾为其主要的药用部位[1]。主要以常绿的乔木存在，高十多米，树皮光滑常伴有白色，最早生长在印尼的摩鹿加岛以及坦桑尼亚的桑哈巴尔岛。目前在印尼的苏门塔腊、越南和大洋洲等地区均生长。在我国海南省、广东、广西等南部地区生长。全球范围内，丁香作为药材利用，主要是生产在马来西亚、坦桑尼亚和印度尼西亚[2]。
丁香用途非常广泛，通常用于食品的烹饪，药品，在香烟中也有使用到[3]。具有很高的药用价值，且经济价值由于用量的加大，经济价值还在不断地提升。在调料中一直担任辛香料的角色，能对食材带来特别的香气，以至增加人的食欲[4]。与此相比，医学上的药用价值更高一些，具有杀菌，抗肿瘤，对治疗心血管疾病有重大意义[5]。
1.1.2 丁香功效
丁香始载于《药性论》，是常用中药材，我国传统进口中药，是“南药”中的一味，味辛性，温肾助阳。具有良好的抑菌及驱虫作用，水煎丁香具有杀灭蛔虫的功效，并且对胃病，腹痛、呕吐、神经痛、牙痛等疾病具有显著的效果。丁香因为其固有的香气，且作用持久常用做生产名贵的香料。
1.2 丁香酚的概述
丁香酚的分子式是：C10H12O2，中文名：丁香酚，又名为丁子香酚；化学学名：2甲氧基4(2丙烯基)苯酚，不溶于水，易溶于乙醇和乙醚等有机物。药用价值主要用于抗菌，降血压，目前也适用于心血管疾病方向。丁香酚的挥发性使其散发出丁香的香气，并且还具有辛香味。依据此物理性质，常被用于香水香精以及各种化妆品香精和皂用香精的制作，同时也是香水制作的主要成分，还可以用于食用香精的调配[6]。
丁香酚颜色为淡黄色的微稠厚状液体。标准大气压下，沸点为250℃至255℃，相对密度为1.064至1.068，折射率中间值为1.541，上下幅度为0.001，可溶于体积为60%乙醇和油类物质，有甘甜的淡花香和辛香。有香石竹香味，又具有丁香油香气。丁香酚的香味气势较强，透发力强，且持久性强。
丁香酚杀菌效果很强烈，且由于是天然的药材，因此对机体无害，可用于减轻局部疼痛，例如可减轻龋齿的疼痛，同时还有局部防腐功效。丁香酚是其他一些香料的主要成分，在一种重要的人造调味剂中担任主要成分。丁香酚还可以治疗肺结核，是特效药异烟肼的制造必须品[6]。
研究发现，丁香酚的生物学活性多样，可对较常见的一些细菌产生抑制作用，并且能抑制霉菌的繁殖生长，因此对于防止农产品的霉变具有很好的促进作用，可以延长农产品的保质期，且无毒副作用[7]。
1.3 丁香酚的药理作用
1.3.1 抑菌作用
1.3.1.1 对细菌的抑制作用
周建新等[8]的研究表明丁香中富集着大量的抑菌成分，且抑菌成分主要为丁香酚。章明美等[9]在生药提取物抑制病菌的筛选中对体外抑菌活性中观察发现：丁香酚对一些细菌具有高度的敏感性。显微镜（油镜）下观察发现，金黄色葡萄球菌、痤疮短棒菌和表面葡萄球菌抑制后较抑制前的有明显的减少，由此可见大部分细菌被消灭，观察还发现部分细菌形态有明显不同，由此认为丁香酚可导致细菌的致病性可能会有相应的下降。李鸣宇等[10]研究表明丁香酚不仅可以抑菌，而且对变形链球菌细胞外水溶性以及水不溶性葡聚糖的抑制作用比较明显，起到了很好的抑制作用。
1.3.1.2 对真菌的抑制作用
研究表明丁香酚是一种很好的防腐剂，它对食物中的常见霉菌（烟曲菌、黄曲菌、枯青霉、产黄青霉、粘红酵母）的生长都存在着不同程度的抑制作用[11]。丁香还被运用于牙科疾病的治疗，并用于牙齿根管的填充剂，其主要表现为丁香酚具有很好的抗真菌效果[12]。宋军等[13]的研究表明丁香酚对羊毛状小孢子军、石膏样小孢子菌、猪小孢子菌、红色毛菌，黄菌、粉小孢子菌等多达18种真菌有明显的抑制作用。研究发现随着丁香酚的浓度升高，丁香酚通过抑制细胞的分裂能发挥抗真菌的作用[14]。
1.3.2 麻醉效果
实验发现通过用不同浓度丁香酚对质量为150g左右的黄腊鰺
1 绪论 1
1.1丁香概述 1
1.1.1 丁香简介 1
1.1.2 丁香功效 1
1.2 丁香酚的概述 1
1.3 丁香酚的药理作用 2
1.3.1 抑菌作用 2
1.3.2 麻醉效果 2
1.3.3 对中枢神经的作用 3
1.3.4 抗氧化性 3
1.3.5 抗肿瘤作用 3
1.3.6 促进透皮吸收作用 3
1.3.7 驱蚊作用 3
1.4 发展趋势 4
1.5 究本课题的目的和意义 4
2 实验与结果 5
2.1 实验材料 5
2.2 丁香预处理 5
2.3 丁香酚的提取及测定 5
2.3.1 丁香酚的提取 5
2.3.2 含量测定 5
2.4 系统适用性实验 5
2.5 制标准曲线 7
2.6 方法学考察 7
2.6.1 精密度检测 7
2.6.2 稳定性实验 8
2.6.3 重现性实验 8
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
丁香预处理 5
2.3 丁香酚的提取及测定 5
2.3.1 丁香酚的提取 5
2.3.2 含量测定 5
2.4 系统适用性实验 5
2.5 制标准曲线 7
2.6 方法学考察 7
2.6.1 精密度检测 7
2.6.2 稳定性实验 8
2.6.3 重现性实验 8
2.7 加样回收试剂 8
2.8 单因素实验 8
2.8.1 提取溶剂（乙醇）对丁香酚提取的影响 8
2.8.2 提取时间对丁香酚提取的影响 9
2.8.3 料液比对丁香酚提取的影响 9
2.8.4 提取温度次数对丁香酚提取的影响 9
2.8.5 超声频率对丁香酚提取的影响 9
2.8.6 单因素实验结论与分析 10
2.9 正交试验 10
2.9.1 实验结果及分析 11
2.10 方差分析 11
2.11 含量测定及验证试验 12
2.11.1 含量测定 12
2.11.2 验证试验 12
2.12 讨论 12
结 论 13
参考文献 14
致 谢 17
1 绪论
1.1丁香概述
1.1.1 丁香简介
桃金娘科植物的丁香其主要成份是丁香酚，干燥花蕾为其主要的药用部位[1]。主要以常绿的乔木存在，高十多米，树皮光滑常伴有白色，最早生长在印尼的摩鹿加岛以及坦桑尼亚的桑哈巴尔岛。目前在印尼的苏门塔腊、越南和大洋洲等地区均生长。在我国海南省、广东、广西等南部地区生长。全球范围内，丁香作为药材利用，主要是生产在马来西亚、坦桑尼亚和印度尼西亚[2]。
丁香用途非常广泛，通常用于食品的烹饪，药品，在香烟中也有使用到[3]。具有很高的药用价值，且经济价值由于用量的加大，经济价值还在不断地提升。在调料中一直担任辛香料的角色，能对食材带来特别的香气，以至增加人的食欲[4]。与此相比，医学上的药用价值更高一些，具有杀菌，抗肿瘤，对治疗心血管疾病有重大意义[5]。
1.1.2 丁香功效
丁香始载于《药性论》，是常用中药材，我国传统进口中药，是“南药”中的一味，味辛性，温肾助阳。具有良好的抑菌及驱虫作用，水煎丁香具有杀灭蛔虫的功效，并且对胃病，腹痛、呕吐、神经痛、牙痛等疾病具有显著的效果。丁香因为其固有的香气，且作用持久常用做生产名贵的香料。
1.2 丁香酚的概述
丁香酚的分子式是：C10H12O2，中文名：丁香酚，又名为丁子香酚；化学学名：2甲氧基4(2丙烯基)苯酚，不溶于水，易溶于乙醇和乙醚等有机物。药用价值主要用于抗菌，降血压，目前也适用于心血管疾病方向。丁香酚的挥发性使其散发出丁香的香气，并且还具有辛香味。依据此物理性质，常被用于香水香精以及各种化妆品香精和皂用香精的制作，同时也是香水制作的主要成分，还可以用于食用香精的调配[6]。
丁香酚颜色为淡黄色的微稠厚状液体。标准大气压下，沸点为250℃至255℃，相对密度为1.064至1.068，折射率中间值为1.541，上下幅度为0.001，可溶于体积为60%乙醇和油类物质，有甘甜的淡花香和辛香。有香石竹香味，又具有丁香油香气。丁香酚的香味气势较强，透发力强，且持久性强。
丁香酚杀菌效果很强烈，且由于是天然的药材，因此对机体无害，可用于减轻局部疼痛，例如可减轻龋齿的疼痛，同时还有局部防腐功效。丁香酚是其他一些香料的主要成分，在一种重要的人造调味剂中担任主要成分。丁香酚还可以治疗肺结核，是特效药异烟肼的制造必须品[6]。
研究发现，丁香酚的生物学活性多样，可对较常见的一些细菌产生抑制作用，并且能抑制霉菌的繁殖生长，因此对于防止农产品的霉变具有很好的促进作用，可以延长农产品的保质期，且无毒副作用[7]。
1.3 丁香酚的药理作用
1.3.1 抑菌作用
1.3.1.1 对细菌的抑制作用
周建新等[8]的研究表明丁香中富集着大量的抑菌成分，且抑菌成分主要为丁香酚。章明美等[9]在生药提取物抑制病菌的筛选中对体外抑菌活性中观察发现：丁香酚对一些细菌具有高度的敏感性。显微镜（油镜）下观察发现，金黄色葡萄球菌、痤疮短棒菌和表面葡萄球菌抑制后较抑制前的有明显的减少，由此可见大部分细菌被消灭，观察还发现部分细菌形态有明显不同，由此认为丁香酚可导致细菌的致病性可能会有相应的下降。李鸣宇等[10]研究表明丁香酚不仅可以抑菌，而且对变形链球菌细胞外水溶性以及水不溶性葡聚糖的抑制作用比较明显，起到了很好的抑制作用。
1.3.1.2 对真菌的抑制作用
研究表明丁香酚是一种很好的防腐剂，它对食物中的常见霉菌（烟曲菌、黄曲菌、枯青霉、产黄青霉、粘红酵母）的生长都存在着不同程度的抑制作用[11]。丁香还被运用于牙科疾病的治疗，并用于牙齿根管的填充剂，其主要表现为丁香酚具有很好的抗真菌效果[12]。宋军等[13]的研究表明丁香酚对羊毛状小孢子军、石膏样小孢子菌、猪小孢子菌、红色毛菌，黄菌、粉小孢子菌等多达18种真菌有明显的抑制作用。研究发现随着丁香酚的浓度升高，丁香酚通过抑制细胞的分裂能发挥抗真菌的作用[14]。
1.3.2 麻醉效果
实验发现通过用不同浓度丁香酚对质量为150g左右的黄腊鰺
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