铁棒锤中乌头碱的含量测定研究
摘 要建立有效液相色谱法测定铁棒锤中乌头碱的含量有效方法，然后可以对方法学进行研究。色谱柱：SHIMADZU ODS C18（250mm×4.6, 5nm）250L×4.6；流动相：乙腈-二乙胺为30:50；波长为：225nm；流速：1.4ml·min-1。乌头碱可以0～24 mg/μl浓度范围之内可有良好的线性关系（r =0.9999，n=6）；精密度好，RSD=1.10%(n=5)；样品的溶液一般可以在8h内稳定；回收率100.33%，RSD=1.82%(n=5)。结论：含量测定方法简单易容易操作，结果可靠，完全适用于测陕产铁棒锤中乌头碱的含量。 目 录
引言 1
1 绪论 2
1.1 铁棒锤的来源 2
1.2 铁棒锤的药理作用 2
1.2.1 麻醉镇痛作用 2
1.2.2 抗菌消炎作用 3
1.2.3 抗肿瘤作用 3
1.2.4 心血管系统的作用 3
1.2.5 铁棒锤毒性 4
1.3 铁棒锤化学成分 4
1.3.1 根部化学成分 4
1.3.2 地上部分的化学 5
1.4 铁棒锤中生物碱的提取 5
1.4.1 提取溶剂的选择 5
1.4.2 常用的提取方法 6
2实验研究 7
2.1 实验仪器与材料 7
2.1.1 实验仪器 7
2.1.2 实验材料 7
2.1.3实验方法及结果 7
2.1.4供试品溶液的制备 7
2.2对照品溶液的制备 7
2.1.1色谱条件的确定 8
2.1.2专属性实验 8
2.1.3方法学考察 9
2.1.4 线性关系 9
2.1.5乌头碱的精密度试验 10
2.1.6溶液的稳定性试验 10
2.1.7乌头碱的重现性试验 10
2.1.8回收率的测定 11
2.1.9含量测定 11
2.3 讨论 12
3结论 13
参考文献 14
致谢 15
9
2.1.4 线性关系 9
2.1.5乌头碱的精密度试验 10
2.1.6溶液的稳定性试验 10
2.1.7乌头碱的重现性试验 10
2.1.8回收率的测定 11
2.1.9含量测定 11
2.3 讨论 12
3结论 13
参考文献 14
致谢 15
引言
铁棒锤(Aconitum pendulum Busch.)为毛茛科乌头属多年生草本植物，生长在海拔32994899m的高山草甸、山坡石隙及灌木林缘[1]。主产于青藏高原，分布陕西西部、四川西部、青海、云南西北部、甘肃南部。大部分地区用子根，少数省份用其地上部分做药材[2,3]。其子根中含有去氧乌头碱、3乙酰乌头碱、乌头碱、纳派林碱、伏乌碱等生物碱[46]。
乌头属药材药理研究是几年研究的一个热点，新闻报道的非常多，该提示出药材具有明显的临床潜能药理作用和优越的药理作用[7]。中药铁棒锤能祛风湿、温经止痛，关节痛、寒疮痛、风寒湿痹、麻醉止痛、心腹冷痛；而附子能回阳补救，助火助阳，逐风寒湿邪，可亡阳虚脱，脉微肢冷，宫冷，阳痪，心腹冷痛，阴寒水肿，阴虚外感，虚汗吐泻，寒湿痹痛等症[810]。使用前时必须煎的久一点，孕妇不能服用。加工后熟附片，可有镇痛和抗炎作用，对垂体肾上腺皮质有明显兴奋作用，对冠状血管有扩张作用，可强心。药理研究证明，大多数乌头属药材都具有免疫抑制、麻醉止痛、抗恶性肿瘤、抗炎作用[11]。生乌头块根细粉制剂可用于大量的表面粘膜麻醉。乌头属中药在临床医学上可用来治疗多种疼痛疾病、类风湿性关节炎等均有明显的疗效。
乌头类生物碱在铁棒锤药用中起着重要作用[12]。铁棒锤中含有牛七碱、乌头碱、宋果灵等生物碱、3乙酸乌头碱。目前，国内外学者对其生物碱类成分的含量测定少见报道，可运用HPLC 法测定乌头碱含量更尤为罕见，然而极大部分限制了铁棒锤药效物质基础及其作用机制的研究。
本文参照中国药典2012版一部中的方法，通过液相色谱条件，有效地对陕产铁棒锤的乌头碱进行含量测定，并且同时对方法学进行了验证，实验结果表明本实验中的HPLC方法能有效地为陕产铁棒锤的质量控制提供科学的方法，并对该中药的质量标准研究提供了参考依据。
1 绪论
1.1 铁棒锤的来源
铁棒锤虽然是中国药典未收载品种，但因其具有明确的镇痛局麻的药理作用，在西北地区民间被广泛应用。在《中华本草》、《全国中草药名鉴》、《全国中草药汇编》、《中药大辞典》、等著作中，铁棒锤Aconitum pendlum Buschs. 和伏毛铁棒锤Aconitumm flavums Hands.Mazz.被作为“雪上一枝蒿”的部分植物来源。在《中华人民共和国卫生部药品标准藏药》第2 册（1996 年版）中，伏毛铁棒锤A.flavum作为藏药“榜那”的部分植物，而以“铁棒锤”一名收录的药材为铁棒锤（Aconitum pendulumm Buschs）和伏毛铁棒锤（Aconitum flavums Hands.Mazzs）的块根和小幼苗。在《中华本草》中记载的铁棒锤的基源是毛茛科乌头属植物铁棒锤（Aconitumm szechenyianum Gay是.）和伏毛铁棒锤（Aconitum没 flavums Hands.Mazz.）的块根；在《回药本草》、《宁夏中药志》及《中华藏本草》中均记载铁棒锤为毛茛科植物伏毛铁棒锤（Acontiumm flavum Hands.Mazz.）干燥小块根。《全国中草药名鉴》载入铁棒锤以植物伏毛铁棒锤（Acontiumm flavums Hands.Mazz）块根入药。铁棒锤别名较多：一支蒿、草芽子（宁夏）、两头尖、磨三转（甘肃）、铁牛七（陕西）、乌药（青海）、八百棒、一枝箭、三转半（四川）、黑乌草、榜那、庞阿那保、雪上一枝蒿（西藏）等。由此可见，铁棒锤基源不清，同名异物、同物异名现象多见，严重影响了该药的临床疗效。
1.2 铁棒锤的药理作用
1.2.1 麻醉镇痛作用
铁棒锤无论外用或内服都具有明显镇痛作用，临床医学上可用于多种镇痛治疗，如痹痛、腿痛、头痛、癌痛等，镇痛活性成分主要为乌头生物碱。根据报道是乌头碱和次乌头碱有着明显镇痛作用。张
引言 1
1 绪论 2
1.1 铁棒锤的来源 2
1.2 铁棒锤的药理作用 2
1.2.1 麻醉镇痛作用 2
1.2.2 抗菌消炎作用 3
1.2.3 抗肿瘤作用 3
1.2.4 心血管系统的作用 3
1.2.5 铁棒锤毒性 4
1.3 铁棒锤化学成分 4
1.3.1 根部化学成分 4
1.3.2 地上部分的化学 5
1.4 铁棒锤中生物碱的提取 5
1.4.1 提取溶剂的选择 5
1.4.2 常用的提取方法 6
2实验研究 7
2.1 实验仪器与材料 7
2.1.1 实验仪器 7
2.1.2 实验材料 7
2.1.3实验方法及结果 7
2.1.4供试品溶液的制备 7
2.2对照品溶液的制备 7
2.1.1色谱条件的确定 8
2.1.2专属性实验 8
2.1.3方法学考察 9
2.1.4 线性关系 9
2.1.5乌头碱的精密度试验 10
2.1.6溶液的稳定性试验 10
2.1.7乌头碱的重现性试验 10
2.1.8回收率的测定 11
2.1.9含量测定 11
2.3 讨论 12
3结论 13
参考文献 14
致谢 15
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2.1.4 线性关系 9
2.1.5乌头碱的精密度试验 10
2.1.6溶液的稳定性试验 10
2.1.7乌头碱的重现性试验 10
2.1.8回收率的测定 11
2.1.9含量测定 11
2.3 讨论 12
3结论 13
参考文献 14
致谢 15
引言
铁棒锤(Aconitum pendulum Busch.)为毛茛科乌头属多年生草本植物，生长在海拔32994899m的高山草甸、山坡石隙及灌木林缘[1]。主产于青藏高原，分布陕西西部、四川西部、青海、云南西北部、甘肃南部。大部分地区用子根，少数省份用其地上部分做药材[2,3]。其子根中含有去氧乌头碱、3乙酰乌头碱、乌头碱、纳派林碱、伏乌碱等生物碱[46]。
乌头属药材药理研究是几年研究的一个热点，新闻报道的非常多，该提示出药材具有明显的临床潜能药理作用和优越的药理作用[7]。中药铁棒锤能祛风湿、温经止痛，关节痛、寒疮痛、风寒湿痹、麻醉止痛、心腹冷痛；而附子能回阳补救，助火助阳，逐风寒湿邪，可亡阳虚脱，脉微肢冷，宫冷，阳痪，心腹冷痛，阴寒水肿，阴虚外感，虚汗吐泻，寒湿痹痛等症[810]。使用前时必须煎的久一点，孕妇不能服用。加工后熟附片，可有镇痛和抗炎作用，对垂体肾上腺皮质有明显兴奋作用，对冠状血管有扩张作用，可强心。药理研究证明，大多数乌头属药材都具有免疫抑制、麻醉止痛、抗恶性肿瘤、抗炎作用[11]。生乌头块根细粉制剂可用于大量的表面粘膜麻醉。乌头属中药在临床医学上可用来治疗多种疼痛疾病、类风湿性关节炎等均有明显的疗效。
乌头类生物碱在铁棒锤药用中起着重要作用[12]。铁棒锤中含有牛七碱、乌头碱、宋果灵等生物碱、3乙酸乌头碱。目前，国内外学者对其生物碱类成分的含量测定少见报道，可运用HPLC 法测定乌头碱含量更尤为罕见，然而极大部分限制了铁棒锤药效物质基础及其作用机制的研究。
本文参照中国药典2012版一部中的方法，通过液相色谱条件，有效地对陕产铁棒锤的乌头碱进行含量测定，并且同时对方法学进行了验证，实验结果表明本实验中的HPLC方法能有效地为陕产铁棒锤的质量控制提供科学的方法，并对该中药的质量标准研究提供了参考依据。
1 绪论
1.1 铁棒锤的来源
铁棒锤虽然是中国药典未收载品种，但因其具有明确的镇痛局麻的药理作用，在西北地区民间被广泛应用。在《中华本草》、《全国中草药名鉴》、《全国中草药汇编》、《中药大辞典》、等著作中，铁棒锤Aconitum pendlum Buschs. 和伏毛铁棒锤Aconitumm flavums Hands.Mazz.被作为“雪上一枝蒿”的部分植物来源。在《中华人民共和国卫生部药品标准藏药》第2 册（1996 年版）中，伏毛铁棒锤A.flavum作为藏药“榜那”的部分植物，而以“铁棒锤”一名收录的药材为铁棒锤（Aconitum pendulumm Buschs）和伏毛铁棒锤（Aconitum flavums Hands.Mazzs）的块根和小幼苗。在《中华本草》中记载的铁棒锤的基源是毛茛科乌头属植物铁棒锤（Aconitumm szechenyianum Gay是.）和伏毛铁棒锤（Aconitum没 flavums Hands.Mazz.）的块根；在《回药本草》、《宁夏中药志》及《中华藏本草》中均记载铁棒锤为毛茛科植物伏毛铁棒锤（Acontiumm flavum Hands.Mazz.）干燥小块根。《全国中草药名鉴》载入铁棒锤以植物伏毛铁棒锤（Acontiumm flavums Hands.Mazz）块根入药。铁棒锤别名较多：一支蒿、草芽子（宁夏）、两头尖、磨三转（甘肃）、铁牛七（陕西）、乌药（青海）、八百棒、一枝箭、三转半（四川）、黑乌草、榜那、庞阿那保、雪上一枝蒿（西藏）等。由此可见，铁棒锤基源不清，同名异物、同物异名现象多见，严重影响了该药的临床疗效。
1.2 铁棒锤的药理作用
1.2.1 麻醉镇痛作用
铁棒锤无论外用或内服都具有明显镇痛作用，临床医学上可用于多种镇痛治疗，如痹痛、腿痛、头痛、癌痛等，镇痛活性成分主要为乌头生物碱。根据报道是乌头碱和次乌头碱有着明显镇痛作用。张
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