泽泻中泽泻醇b23乙酸酯提取工艺的研究
摘 要泽泻醇B23-乙酸酯是泽泻醇中主要成分之一，具有重要的药用价值。本论文选用醇提法提取泽泻醇B23-乙酸酯，设计正交实验，研究泽泻醇B23-乙酸酯提取率与乙醇浓度、提取时间、提取次数和乙醇用量四个因素之间的关系。实验结果表明，使用醇提法提取泽泻醇B23-乙酸酯，最佳提取工艺是提取时间1小时，使用七倍量的70%乙醇提取2次。在最佳的工艺条件下，泽泻醇B23-乙酸酯的提取率为0.357mg?g?1。
目 录
1 绪论 1
1.1泽泻的药用作用 1
1.1.1利尿作用 1
1.1.2降血脂作用 2
1.1.3抗肾炎活性作用 2
1.1.4抗脂肪肝作用 3
1.1.5免疫调节作用 3
1.1.6降低血糖、血脂和抗动脉粥样硬化的作用 3
1.2泽泻醇B23乙酸酯的作用 3
1.2.1诱导多种肿瘤细胞凋亡 4
1.2.2抑制抗体过敏性反应 4
1.3研究目的和意义 4
1.4研究的内容和方法 5
2实验 6
2.1实验仪器、材料及试剂 6
2.1.1实验仪器 6
2.1.2材料及试剂 6
2.1.3泽泻乙醇提取物的制备 6
2.2 泽泻醇B23乙酸酯的测定 6
2.2.1 色谱条件 7
2.2.2标准曲线 7
2.2.3精密度试验 7
2.2.4重现性试验 7
2.2.5稳定性试验 8
2.2.6加样回收率试验 8
2.2.7泽泻醇B23乙酸酯含量的测定 8
2.3泽泻提取工艺的研究 8
2.3.1试验设计 8
2.3.2试验结果 9
2.3.3试验结果分析 10
2.4工艺验证 12
2.4.1 提取次数的确定 13
2.4.2最佳工艺验证 12
结 论 13
参考文献 14 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
致 谢 16
1 绪论
泽泻是生长周期很长的草本植物，生长在沼泽中，可以入药的部分是它的干燥块茎。采摘季节应该在冬季，并且应该处于茎叶刚开始枯萎的状态时进行采摘。处理时先把它洗干净，然后去掉根和最外层的粗糙表皮，之后切成小薄片。该药材的外形特征基本上都是球形或者椭圆形，也有类似卵圆形的，它的表皮一般都是黄白色和淡黄棕色，并且还会有细微突起的须根痕。主要生长在贵州、福建、江西、云南、四川等地区，在这些地区中，福建和江西的质量比较好。中医曾提到，泽泻性寒味甘淡，可归肾膀胱经，该药材具备渗利水湿、通利小便、清热排毒[1]。
泽泻醇中主要含有泽泻醇B23乙酸酯，它是泽泻主要药用作用的部分，具有很好的药用价值，比如能够利尿以及降低血脂，还能抗脂肪肝和保肝，从而确定泽泻对于我们的药用价值是很高的，为了避免浪费，我们应该做到更好的节约，本文研究泽泻醇B23乙酸酯提取率，研究对于泽泻提取率是与哪些因素有关，从而确定泽泻的最优提取方案[2]。
1.1泽泻的药用作用
该中药药材的化学成分主要是多种三萜类化合物，还包括很多种分子量分大的化合物（蛋白质、淀粉等）。目前为止，参考最新文献可以发现是：泽泻二萜醇以及泽泻二萜醇苷也属于药材中多个倍半萜类成分。从泽泻中提取到的三萜，同它们的衍生物都属于原萜烷型四环三萜[3]。
而在临床中诊治急性肠炎、霍乱以及腹痛都是使用泽泻以及复方，原因是泽泻醇具有非特异性对抗组胺的功能，而可能对于预防和治疗心血管系统和排尿障碍的改善有一定作用的则是泽泻倍半萜类成分，而且报道还称，泽泻水醇提取物可以治疗高血脂症状是因为其中含有的凝集素。
1.1.1利尿作用
泽泻具有明显的利尿作用是与采摘时间、用药的地方、不同炮制法、不同的给药方法以及所试生物的种类都有关系，所以泽泻应当在冬季采集，不易在春季采集，因为这样利尿作用最强。用它的提取物（水提和醇提）以及泽泻醇A进行对人体的药理研究，发现其中具有利尿功能，在其他类似实验中，也得出相同结论，由此可得，这三类为泽泻的有效药理成分。水提物以及泽泻醇A24乙酸酯这三种提取物可以产生利尿活性，而其中的泽泻醇A24乙酸酯是泽泻中最为关键的利尿活性物质，并且可以应用于药物生产和检验当中作为泽泻的药材质量评价成分。泽泻的利尿作用研究则是用盐水负载大鼠，在口服泽泻醇A乙酸酯或者是泽泻醇B之后的盐水负载大鼠，有明显的显示出对大鼠的利尿作用是因为其钠离子的分泌均有显著的增加，以上结果可以明显的看出泽泻中的有效成分都能起到很好的利尿作用[4]。
之前就有报道向我们阐述了泽泻的利尿作用，但是对于盐炙泽泻的利尿作用从没有提起过。所以根据这个情况，曾春晖等实验研究人员对于不同地区的炮制盐炙泽泻利尿作用优良情况进行深入研究，然后发现在广西地区种植的泽泻经过炮制后得到的盐炙泽泻的利尿效果最为优秀；而进行盐炙后则发现广西和四川产的泽泻利尿作用最为优秀，同时还有意外的收获就是发现福建和江西产的泽泻具有不俗的抗利尿作用，由此我们就知道盐炙泽泻的利尿作用和产地分不开关系；而经过大量实验证明用盐炮制后，也可以对含量造成很大的影响，由此得出，二者是泽泻中主要的利尿方面[5]。
1.1.2降血脂作用
血脂是我们满足生命细胞的分裂、分化和生命代谢的必不可少的最基本条件以及所必需的，胆固醇和甘油三酯是组成它的基本化学成分，而他们的功能作用也不一样，例如：参加人体代谢的成分是甘油三酯，而在人体进行细胞浆的膜合成时，胆汁酸的合成时，起作用的为胆固醇。经过实验我们发现一个结论：它的醇提物具有降胆固醇的作用，其中泻醇A的降脂效果最好，原因是其进行人体后可以对胆固醇（外源性）和甘油三酯进行影响，结果导致他们代谢紊乱（使水解甘油三酯的速度加快），也对肝脏细胞的合成有一定的抑制影响。在进行家兔的实验时，也发现了对胆固醇有降低的作用。
它的水提物之所以可以降低体内草酸钙晶体结成的速度，是因为其中含有抑制人体尿液中某些离子的强度以及当pH值升高时，可以看出泽泻本身增强了他们的活性，这里主要为抑制作用。当我们进一步对提取物质进行分析时，活性成分最主要的是一类萜类化合物（主要是四环三萜），它可以抑制机体内草酸钙的形成。这个成分也可以抑制尿草酸钙晶体[6]。
目 录
1 绪论 1
1.1泽泻的药用作用 1
1.1.1利尿作用 1
1.1.2降血脂作用 2
1.1.3抗肾炎活性作用 2
1.1.4抗脂肪肝作用 3
1.1.5免疫调节作用 3
1.1.6降低血糖、血脂和抗动脉粥样硬化的作用 3
1.2泽泻醇B23乙酸酯的作用 3
1.2.1诱导多种肿瘤细胞凋亡 4
1.2.2抑制抗体过敏性反应 4
1.3研究目的和意义 4
1.4研究的内容和方法 5
2实验 6
2.1实验仪器、材料及试剂 6
2.1.1实验仪器 6
2.1.2材料及试剂 6
2.1.3泽泻乙醇提取物的制备 6
2.2 泽泻醇B23乙酸酯的测定 6
2.2.1 色谱条件 7
2.2.2标准曲线 7
2.2.3精密度试验 7
2.2.4重现性试验 7
2.2.5稳定性试验 8
2.2.6加样回收率试验 8
2.2.7泽泻醇B23乙酸酯含量的测定 8
2.3泽泻提取工艺的研究 8
2.3.1试验设计 8
2.3.2试验结果 9
2.3.3试验结果分析 10
2.4工艺验证 12
2.4.1 提取次数的确定 13
2.4.2最佳工艺验证 12
结 论 13
参考文献 14 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
致 谢 16
1 绪论
泽泻是生长周期很长的草本植物，生长在沼泽中，可以入药的部分是它的干燥块茎。采摘季节应该在冬季，并且应该处于茎叶刚开始枯萎的状态时进行采摘。处理时先把它洗干净，然后去掉根和最外层的粗糙表皮，之后切成小薄片。该药材的外形特征基本上都是球形或者椭圆形，也有类似卵圆形的，它的表皮一般都是黄白色和淡黄棕色，并且还会有细微突起的须根痕。主要生长在贵州、福建、江西、云南、四川等地区，在这些地区中，福建和江西的质量比较好。中医曾提到，泽泻性寒味甘淡，可归肾膀胱经，该药材具备渗利水湿、通利小便、清热排毒[1]。
泽泻醇中主要含有泽泻醇B23乙酸酯，它是泽泻主要药用作用的部分，具有很好的药用价值，比如能够利尿以及降低血脂，还能抗脂肪肝和保肝，从而确定泽泻对于我们的药用价值是很高的，为了避免浪费，我们应该做到更好的节约，本文研究泽泻醇B23乙酸酯提取率，研究对于泽泻提取率是与哪些因素有关，从而确定泽泻的最优提取方案[2]。
1.1泽泻的药用作用
该中药药材的化学成分主要是多种三萜类化合物，还包括很多种分子量分大的化合物（蛋白质、淀粉等）。目前为止，参考最新文献可以发现是：泽泻二萜醇以及泽泻二萜醇苷也属于药材中多个倍半萜类成分。从泽泻中提取到的三萜，同它们的衍生物都属于原萜烷型四环三萜[3]。
而在临床中诊治急性肠炎、霍乱以及腹痛都是使用泽泻以及复方，原因是泽泻醇具有非特异性对抗组胺的功能，而可能对于预防和治疗心血管系统和排尿障碍的改善有一定作用的则是泽泻倍半萜类成分，而且报道还称，泽泻水醇提取物可以治疗高血脂症状是因为其中含有的凝集素。
1.1.1利尿作用
泽泻具有明显的利尿作用是与采摘时间、用药的地方、不同炮制法、不同的给药方法以及所试生物的种类都有关系，所以泽泻应当在冬季采集，不易在春季采集，因为这样利尿作用最强。用它的提取物（水提和醇提）以及泽泻醇A进行对人体的药理研究，发现其中具有利尿功能，在其他类似实验中，也得出相同结论，由此可得，这三类为泽泻的有效药理成分。水提物以及泽泻醇A24乙酸酯这三种提取物可以产生利尿活性，而其中的泽泻醇A24乙酸酯是泽泻中最为关键的利尿活性物质，并且可以应用于药物生产和检验当中作为泽泻的药材质量评价成分。泽泻的利尿作用研究则是用盐水负载大鼠，在口服泽泻醇A乙酸酯或者是泽泻醇B之后的盐水负载大鼠，有明显的显示出对大鼠的利尿作用是因为其钠离子的分泌均有显著的增加，以上结果可以明显的看出泽泻中的有效成分都能起到很好的利尿作用[4]。
之前就有报道向我们阐述了泽泻的利尿作用，但是对于盐炙泽泻的利尿作用从没有提起过。所以根据这个情况，曾春晖等实验研究人员对于不同地区的炮制盐炙泽泻利尿作用优良情况进行深入研究，然后发现在广西地区种植的泽泻经过炮制后得到的盐炙泽泻的利尿效果最为优秀；而进行盐炙后则发现广西和四川产的泽泻利尿作用最为优秀，同时还有意外的收获就是发现福建和江西产的泽泻具有不俗的抗利尿作用，由此我们就知道盐炙泽泻的利尿作用和产地分不开关系；而经过大量实验证明用盐炮制后，也可以对含量造成很大的影响，由此得出，二者是泽泻中主要的利尿方面[5]。
1.1.2降血脂作用
血脂是我们满足生命细胞的分裂、分化和生命代谢的必不可少的最基本条件以及所必需的，胆固醇和甘油三酯是组成它的基本化学成分，而他们的功能作用也不一样，例如：参加人体代谢的成分是甘油三酯，而在人体进行细胞浆的膜合成时，胆汁酸的合成时，起作用的为胆固醇。经过实验我们发现一个结论：它的醇提物具有降胆固醇的作用，其中泻醇A的降脂效果最好，原因是其进行人体后可以对胆固醇（外源性）和甘油三酯进行影响，结果导致他们代谢紊乱（使水解甘油三酯的速度加快），也对肝脏细胞的合成有一定的抑制影响。在进行家兔的实验时，也发现了对胆固醇有降低的作用。
它的水提物之所以可以降低体内草酸钙晶体结成的速度，是因为其中含有抑制人体尿液中某些离子的强度以及当pH值升高时，可以看出泽泻本身增强了他们的活性，这里主要为抑制作用。当我们进一步对提取物质进行分析时，活性成分最主要的是一类萜类化合物（主要是四环三萜），它可以抑制机体内草酸钙的形成。这个成分也可以抑制尿草酸钙晶体[6]。
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