辣椒疫霉效应分子rxlr103的基因沉默与稳定转化
疫霉属微生物可以引起多种毁灭性的植物病害，它可以分泌大量的效应分子干扰寄主植物的防卫反应，从而促进其侵染。然而目前我们对绝大多数疫霉菌效应分子的功能和作用机制还知之甚少。RxLR效应分子是一类胞内效应分子，这类效应分子能从病原菌分泌到细胞外后被转运进入寄主植物的细胞中。本研究从辣椒疫霉菌中成功克隆了RxLR103效应分子基因，并将其构建到植物表达载体pFAST/G01中，通过农杆菌介导的遗传转化体系，对野生型拟南芥Col-0进行稳定转化。随后筛选成功转化的拟南芥幼苗，获得RxLR103稳定转化的拟南芥株系，并通过PFG介导的疫霉转化技术在辣椒疫霉中将RxLR103沉默，得到若干个沉默转化子并测定了其在致病性方面的影响。初步明确了其参与辣椒疫霉菌侵染寄主的功能。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1材料2
1.1.1供试菌株2
1.1.2供试植物2
1.1.3试验用培养基2
1.1.4试验用仪器3
1.2方法 3
1.2.1辣椒疫霉RNA的提取与cDNA的合成3
1.2.2大肠杆菌DH5α感受态细胞和农杆菌GV3101感受态细胞的制备4
1.2.3 RxLR103沉默转化子的获得与鉴定4
1.2.4效应分子基因克隆及重组质粒的构建8
1.2.5拟南芥的转化与筛选10
2结果与分析11
2.1 RxLR103沉默转化子的获得与鉴定12
2.2RxLR103沉默转化子在烟草上致病性检测12
2.3RxLR103转基因拟南芥生长情况12
3讨论 13
致谢13
参考文献14
辣椒疫霉效应分子RxLR103的基因沉默与稳定转化
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1材料2
1.1.1供试菌株2
1.1.2供试植物2
1.1.3试验用培养基2
1.1.4试验用仪器3
1.2方法 3
1.2.1辣椒疫霉RNA的提取与cDNA的合成3
1.2.2大肠杆菌DH5α感受态细胞和农杆菌GV3101感受态细胞的制备4
1.2.3 RxLR103沉默转化子的获得与鉴定4
1.2.4效应分子基因克隆及重组质粒的构建8
1.2.5拟南芥的转化与筛选10
2结果与分析11
2.1 RxLR103沉默转化子的获得与鉴定12
2.2RxLR103沉默转化子在烟草上致病性检测12
2.3RxLR103转基因拟南芥生长情况12
3讨论 13
致谢13
参考文献14
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