枸杞糖蛋白lbgp5b的分离纯化(附件)
摘 要枸杞是属于茄科枸杞族枸杞属植物的果实，它具有抗衰老，抗疲劳，增强免疫功能以及保护肝脏等多种药理作用，其化学成分包括多种氨基酸以及微量元素，并含有丰富的胡萝卜素，维生素等。经过科学家的研究分析发现，糖蛋白LBGP5-B是从枸杞多糖中分离纯化出来的一种糖复合物，它具有免疫调节、抗肿瘤、抗炎、降血糖、降血脂、抗氧化、防衰老等功效。其含量约占生药枸杞总含量的0.019%。目前对枸杞的研究主要集中在多糖，对枸杞糖蛋白的研究还很少。本实验以枸杞为原材料，采用水提醇沉的方法得到水溶性枸杞粗多糖，同时从生药枸杞中提取了LBP，对LBP进行了多次的分离纯化得到了单一的糖蛋白LBGP5-B，最终通过高效液相色、气相色谱、红外光谱和分光光度计等仪器对其理化性质进行研究。最终的研究结果表明：蛋白含量与糖含量分别为56.13%和9.6%，同时，枸杞糖蛋白中主要含有岩藻糖（Fuc），木糖（Xyl），N-乙酞基葡萄糖（G1cNAc ），甘露糖（Man葡萄糖（Glc）和半乳糖（Gal ），其相对摩尔比为0.6：1：3：4.2：0.44：0.39。目 录
1 引言
1.1 选题背景与意义 1
1.2 文献综述 1
1.2.1 枸杞的研究现状 1
1.2.2 糖蛋白的研究现状 3
1.2.3 糖蛋白LBGP5B研究现状 5
2 枸杞糖蛋白LBGP5B的分离纯化实验
2.1 实验材料、试剂及仪器 6
2.1.1 材料 6
2.1.2 试剂 6
2.1.3 仪器 6
2.2 实验方法 7
2.2.1 枸杞的预处理 7
2.2.2 枸杞粗多糖的分离提取 7
2.2.3 枸杞糖蛋白的分离纯化 8
2.2.4枸杞糖蛋白的基本理化性质检测 8
2.3 实验结果与分析 10
2.3.1 枸杞粗多糖的分离提取 10
2.3.2 枸杞糖蛋白LBGP5B的分离纯化 12
2.3.3 枸杞糖蛋白的基本理化性质分析 14
结论 17
参考文献 18
致谢 21
1 引言
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/> 2.2.4枸杞糖蛋白的基本理化性质检测 8
2.3 实验结果与分析 10
2.3.1 枸杞粗多糖的分离提取 10
2.3.2 枸杞糖蛋白LBGP5B的分离纯化 12
2.3.3 枸杞糖蛋白的基本理化性质分析 14
结论 17
参考文献 18
致谢 21
1 引言
1.1 选题背景与意义
枸杞，古称天精、地仙。因它有抗衰老作用，故又称“却老”。枸杞隶属于茄科枸杞族枸杞属植物的果实。随着枸杞药理研究的深入进行，新的药理作用不断被发现.现代医学研究证明：枸杞有免疫调节、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、抗疲劳、降血糖、降血压、补肾、保肝、明目、抗辐射损伤等功效[1]。目前对枸杞糖蛋白的研究还很少，所以选取一种高效、省时、节能的提取方式就显得尤为重要。现代医学证明，枸杞子具有抗疲劳、抗衰老、增强兔疫功能以及保护肝脏等多种药理作用。
我们常见的枸杞子形态一般呈长卵形或者是椭圆形，长度一般在0.62cm之间，直径约38mm。枸杞子一般无气味或者气微，味道稍甜、微酸。我们在挑选枸杞子食用的时候一般选择其颗粒比较饱满，色泽较红润、肉质比较厚、质柔较润、子少、味甜的枸杞子为佳。
本项目系统研究了枸杞糖蛋白LBGP5B的提取工艺以及水提醇沉提取的技术路线；研究枸杞糖蛋白LBGP5B的分离和纯化工艺，在此基础上，研究枸杞糖蛋白LBGP5B的生物活性研究，为进一步了解枸杞糖蛋白的药理作用与生物活性研究具有重要意义。通过研究枸杞糖蛋白LBGP5B生物活性，为枸杞糖蛋白的开发利用提供理论依据该研究成果对提升枸杞产业价值，拓展枸杞深加工途径具有重要的理论和实践价值。
本文通过水提醇沉的方法得到水溶性枸杞粗多糖，并从枸杞多糖中提取了LBP，对LBP进行了多次的分离纯化得到了单一的糖蛋白LBGP5B，并对其理化性质进行研究。
1.2 文献综述
1.2.1 枸杞的研究现状
枸杞子的主要成份：枸杞子的活性成份包括枸杞多糖（LBP），隐黄质、玉米黄质、酸浆果红素、甜菜碱、东食若碱、牛磺酸、Y氨基丁酸等[1]。现代医学研究表明，糖类约占枸杞干果的40 %，为枸杞子的主要成分。枸杞子糖类组成中又包括果糖、葡萄糖和木糖3种游离单糖，其含量分别为7.49% 、5.73% 、0.43 %。借助于现代化学分析技术，枸杞子化学成分中的多种氨基酸及微量元素钾、钠、钙、镁、铜、铁、镁、锌等。并且含有丰富的胡萝卜素、维生素A1，B1，B2，C以及钙、铁等健康眼睛的必需营养，有“明眼子”之称[2]。
枸杞所含营养成份非常丰富，每百克枸杞果中含粗蛋白4. 49克，粗脂肪2. 33克，碳水化合物：9. 12克，类胡萝卜素96毫克，硫胺素0. 053毫克，核黄素：0. 137毫克，抗坏血酸19. 8毫克，甜菜碱0. 26毫克，还含有：丰富的钾、钠、钙、镁、铁、铜、锰、锌等元素，以及22种氨基酸和多种维生素[3]。
本文主要对以下几种药用成分进行简单的分析：
（1）枸杞多糖（LBP）
枸杞多糖（LBP）是枸杞子调节免疫、延缓衰老的主要活性成分，可改善老年人易疲劳、食欲不振和视力模糊等症状，并具有降而脂、降血糖、抗脂肪肝、抗衰老、抗肿瘤等作用[4]。
（2）牛磺酸
牛磺酸是一种含硫R氨基酸，是机体内含量最高的游离氨基酸。牛磺酸具有抗运动性疲劳的作用，对神经组织缺血、缺氧及缺血再灌注损伤具有明显的防治作用[5]。
（3）甜菜碱
甜菜碱在化学结构上与氨基酸相似，属于季胺碱类物质，主要存在于甜菜糖的糖蜜中，在动植物体内也普遍存在，并在物质代谢中起重要作用，如体内必需物质的合成、脂肪和氮的代谢、脂肪转移运输等[6]。
其中，枸杞多糖是枸杞子调节免疫、延缓衰老的主要活性成分，可改善老年人易疲劳、食欲不振和视力模糊等症状，并具有降血脂、抗脂肪肝、抗衰老等作用，被广大人们所欢迎。香港大学的Yu等研究发现，枸杞提取物可以通过抵抗神经细胞内质网应激水平而起到神经保护作用，枸杞多糖对淀粉样肽引起的神经毒性有保护作用[7]。枸杞多糖可抑制淀粉样肽蛋白酶的活性，降低RNA依赖性蛋白激酶（ PKR）磷酸化，从而起到神经保护的作用，在老年痴呆症的发生中起一定作用。科技一直在发展，时代一直在进步，枸杞糖蛋白也将发挥更大的价值[8]。
枸杞子是一种常见的营养滋补，在民间用于烹饪，沸腾的奶油，酿酒，食品或其他药物同食。枸杞具有丰富的营养价值吃法：
第一种方法是吃零食：枸杞可以和喜欢吃葡萄干，枸杞原料味道很不错，但不能太多，否则容易上火。
第二种方法是泡成酒：中国枸杞酒饮用可增强细胞介导的免疫，促进造血功能，能保护肝脏，抗衰老，降血糖，以及视力下降，头晕能起到一定的效果[9]。
第三种方法是自制菊花枸杞茶：取菊花3到5朵，枸杞一小撮放入沸水泡10分钟即可饮用。它可以明目、养肝、抗衰老、防皱纹、降血糖血压，适合工作繁重、长期要对着计算机工作的人[10]
1 引言
1.1 选题背景与意义 1
1.2 文献综述 1
1.2.1 枸杞的研究现状 1
1.2.2 糖蛋白的研究现状 3
1.2.3 糖蛋白LBGP5B研究现状 5
2 枸杞糖蛋白LBGP5B的分离纯化实验
2.1 实验材料、试剂及仪器 6
2.1.1 材料 6
2.1.2 试剂 6
2.1.3 仪器 6
2.2 实验方法 7
2.2.1 枸杞的预处理 7
2.2.2 枸杞粗多糖的分离提取 7
2.2.3 枸杞糖蛋白的分离纯化 8
2.2.4枸杞糖蛋白的基本理化性质检测 8
2.3 实验结果与分析 10
2.3.1 枸杞粗多糖的分离提取 10
2.3.2 枸杞糖蛋白LBGP5B的分离纯化 12
2.3.3 枸杞糖蛋白的基本理化性质分析 14
结论 17
参考文献 18
致谢 21
1 引言
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/> 2.2.4枸杞糖蛋白的基本理化性质检测 8
2.3 实验结果与分析 10
2.3.1 枸杞粗多糖的分离提取 10
2.3.2 枸杞糖蛋白LBGP5B的分离纯化 12
2.3.3 枸杞糖蛋白的基本理化性质分析 14
结论 17
参考文献 18
致谢 21
1 引言
1.1 选题背景与意义
枸杞，古称天精、地仙。因它有抗衰老作用，故又称“却老”。枸杞隶属于茄科枸杞族枸杞属植物的果实。随着枸杞药理研究的深入进行，新的药理作用不断被发现.现代医学研究证明：枸杞有免疫调节、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、抗疲劳、降血糖、降血压、补肾、保肝、明目、抗辐射损伤等功效[1]。目前对枸杞糖蛋白的研究还很少，所以选取一种高效、省时、节能的提取方式就显得尤为重要。现代医学证明，枸杞子具有抗疲劳、抗衰老、增强兔疫功能以及保护肝脏等多种药理作用。
我们常见的枸杞子形态一般呈长卵形或者是椭圆形，长度一般在0.62cm之间，直径约38mm。枸杞子一般无气味或者气微，味道稍甜、微酸。我们在挑选枸杞子食用的时候一般选择其颗粒比较饱满，色泽较红润、肉质比较厚、质柔较润、子少、味甜的枸杞子为佳。
本项目系统研究了枸杞糖蛋白LBGP5B的提取工艺以及水提醇沉提取的技术路线；研究枸杞糖蛋白LBGP5B的分离和纯化工艺，在此基础上，研究枸杞糖蛋白LBGP5B的生物活性研究，为进一步了解枸杞糖蛋白的药理作用与生物活性研究具有重要意义。通过研究枸杞糖蛋白LBGP5B生物活性，为枸杞糖蛋白的开发利用提供理论依据该研究成果对提升枸杞产业价值，拓展枸杞深加工途径具有重要的理论和实践价值。
本文通过水提醇沉的方法得到水溶性枸杞粗多糖，并从枸杞多糖中提取了LBP，对LBP进行了多次的分离纯化得到了单一的糖蛋白LBGP5B，并对其理化性质进行研究。
1.2 文献综述
1.2.1 枸杞的研究现状
枸杞子的主要成份：枸杞子的活性成份包括枸杞多糖（LBP），隐黄质、玉米黄质、酸浆果红素、甜菜碱、东食若碱、牛磺酸、Y氨基丁酸等[1]。现代医学研究表明，糖类约占枸杞干果的40 %，为枸杞子的主要成分。枸杞子糖类组成中又包括果糖、葡萄糖和木糖3种游离单糖，其含量分别为7.49% 、5.73% 、0.43 %。借助于现代化学分析技术，枸杞子化学成分中的多种氨基酸及微量元素钾、钠、钙、镁、铜、铁、镁、锌等。并且含有丰富的胡萝卜素、维生素A1，B1，B2，C以及钙、铁等健康眼睛的必需营养，有“明眼子”之称[2]。
枸杞所含营养成份非常丰富，每百克枸杞果中含粗蛋白4. 49克，粗脂肪2. 33克，碳水化合物：9. 12克，类胡萝卜素96毫克，硫胺素0. 053毫克，核黄素：0. 137毫克，抗坏血酸19. 8毫克，甜菜碱0. 26毫克，还含有：丰富的钾、钠、钙、镁、铁、铜、锰、锌等元素，以及22种氨基酸和多种维生素[3]。
本文主要对以下几种药用成分进行简单的分析：
（1）枸杞多糖（LBP）
枸杞多糖（LBP）是枸杞子调节免疫、延缓衰老的主要活性成分，可改善老年人易疲劳、食欲不振和视力模糊等症状，并具有降而脂、降血糖、抗脂肪肝、抗衰老、抗肿瘤等作用[4]。
（2）牛磺酸
牛磺酸是一种含硫R氨基酸，是机体内含量最高的游离氨基酸。牛磺酸具有抗运动性疲劳的作用，对神经组织缺血、缺氧及缺血再灌注损伤具有明显的防治作用[5]。
（3）甜菜碱
甜菜碱在化学结构上与氨基酸相似，属于季胺碱类物质，主要存在于甜菜糖的糖蜜中，在动植物体内也普遍存在，并在物质代谢中起重要作用，如体内必需物质的合成、脂肪和氮的代谢、脂肪转移运输等[6]。
其中，枸杞多糖是枸杞子调节免疫、延缓衰老的主要活性成分，可改善老年人易疲劳、食欲不振和视力模糊等症状，并具有降血脂、抗脂肪肝、抗衰老等作用，被广大人们所欢迎。香港大学的Yu等研究发现，枸杞提取物可以通过抵抗神经细胞内质网应激水平而起到神经保护作用，枸杞多糖对淀粉样肽引起的神经毒性有保护作用[7]。枸杞多糖可抑制淀粉样肽蛋白酶的活性，降低RNA依赖性蛋白激酶（ PKR）磷酸化，从而起到神经保护的作用，在老年痴呆症的发生中起一定作用。科技一直在发展，时代一直在进步，枸杞糖蛋白也将发挥更大的价值[8]。
枸杞子是一种常见的营养滋补，在民间用于烹饪，沸腾的奶油，酿酒，食品或其他药物同食。枸杞具有丰富的营养价值吃法：
第一种方法是吃零食：枸杞可以和喜欢吃葡萄干，枸杞原料味道很不错，但不能太多，否则容易上火。
第二种方法是泡成酒：中国枸杞酒饮用可增强细胞介导的免疫，促进造血功能，能保护肝脏，抗衰老，降血糖，以及视力下降，头晕能起到一定的效果[9]。
第三种方法是自制菊花枸杞茶：取菊花3到5朵，枸杞一小撮放入沸水泡10分钟即可饮用。它可以明目、养肝、抗衰老、防皱纹、降血糖血压，适合工作繁重、长期要对着计算机工作的人[10]
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