枇杷核中总黄酮和总多酚的含量及其抗氧活性研究
摘 要枇杷核是枇杷果实加工的副产品。本文主要通过不同溶剂对枇杷核总黄酮和总多酚的提取研究及提取物的抗氧化能力研究，从而确定提取溶剂，为枇杷核提取溶剂的选择提供理论基础。本次实验依次选用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇这四种有机溶剂来提取枇杷核中的总黄酮和总多酚，制备枇杷核提取液备用，采用紫外分光光度法依次测量这四种不同极性溶剂萃取的枇杷核提取液中总黄酮还有总多酚的含量，石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇的黄酮含量依次是90.91mg/g、41.67mg/g、53.57mg/g、8.95mg/g；总多酚含量依次是74.66mg/g、126.27mg/g、178.01mg/g、52.92mg/g并对其DPPH、ABTS自由基清除率进行考察，并对比其结果。发现萃取部位的浓度越高其抗氧化能力越强，VC抗氧化能力>EtOAc部位>nBuOH部位>CHCL3部位，本文通过测定枇杷核中不同提取溶剂中总黄酮和总多酚的含量，并测定相关提取部位的抗氧化活性，以期为未来对于枇杷核的提取研究提供一个理论基础。
目 录
1 绪论 1
1.1 我国总黄酮和总多酚的研究现状 1
1.2 枇杷核的成分研究 1
1.3 枇杷核药理作用研究 1
1.3.1 抗炎、止咳作用 1
1.3.2 降血糖作用 2
1.3.3 抗病毒作用 2
1.3.4 抗瘤作用 3
1.3.5 其他药理作用 3
1.4 枇杷核中总黄酮、总多酚的研究 3
1.5 抗氧化活性的研究现状 3
1.5.1 DPPH自由基清除能力的测定 3
1.5.2 总还原能力的测定 3
1.5.3 羟自由基（OH）和超氧自由基（O2）清除率的测定 4
1.5.4 ABTS自由基清楚能力的测定 4
1.6 课题目的意义 4
2 实验部分 5
2.1 实验准备 5
2.1.1 试验材料 5
2.1.2 试验仪器 5
2.2 枇杷核提取物样品的制备 5
2.2.1 枇杷核提取液预处理 5
2.2.2 萃取物的制备 6 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
2.3枇杷核提取物中的含量测定 6
2.3.1总黄酮含量测定 6
2.3.2 枇杷核提取物中总多酚的含量测定 8
2.4 抗氧活性的研究方法 11
2.4.1 供试品溶液 11
2.4.2 VC溶液配置 11
2.4.3 抗氧化方法 11
2.5 结果与分析 12
2.5.1 对DPPH自由基的清除作用 12
2.5.2 对ABTS自由基的清除作用 13
3 结论与讨论 15
3.1 结论 15
3.2 讨论 15
3.2.1四种极性溶剂的确定 15
3.2.2供试品溶液的制备 16
3.2.3 取样量的确定 16
3.2.4 黄酮显色试剂量的确定 16
3.2.5 含量测定方法的确定 16
参考文献 18
致 谢 20
1 绪论
1.1 我国总黄酮和总多酚的研究现状
黄酮[1]是一类相对分子质量较低，其主要分布在植物中，为黄色或淡黄色的次生代谢物。近年来，运用的黄酮化合物的茶叶、牙膏和口香糖等产品在国内外都有发展。因此，其在食品、医药等方面具有很高的应用价值。
多酚化合物[2]是一种含有多种羟基自由基和芳香基团的物质，酚类化合物在自然界中，具有6500种，包括其衍生物。其广泛的存在于水果蔬菜中，在人类每天的生活中必不可缺，同时，多酚是人类每天摄入的最多的抗氧化物，能提高血管壁的弹性、促进肠胃消化、降低血脂、提高人体免疫力、防止动脉硬化、并抗拮细菌和癌症的生长。
经研究发现植物多酚，具有强烈生理功能，如自由基的清除和阻断自由基的链式反应等，在医疗上表现出了很强的抗氧化活性。冯航[3]等人在研究证明枇杷中的多酚类化合物含量与清除DPPH自由基的能力呈明显的正相关性。
1.2 枇杷核的成分研究
大量的研究说明枇杷核[4]中富含很多成分，如淀粉、蛋白质、等非常营养的成分，枇杷核中还含有很多多酚元素及苦杏仁苷、黄酮等多种生物活性物质，枇杷核有很好的药理作用，如增强免疫功能、抗衰老、抗炎、降血糖等多种功效。
1.3 枇杷核药理作用研究
1.3.1 抗炎、止咳作用
李鹰[5]等人证实，通过分别对小鼠灌胃枇杷核提取的枇杷核提取物（50、150和450mg/kg），可以降低AA小鼠足部的初级和二级肿胀程度，减少多发性关节炎的整体疾病情况。说明枇杷核的提取物对于对大鼠AA的药理作用，以及能够对其致病因素有抗拮作用，对其中的机制进行研究，这是可能与枇杷核提取物可增强脾淋巴细胞增殖的功能，增强脾淋巴细胞的分泌能力，从而促进淋巴细胞的增殖。
王小燕[6]通过对枇杷核中成分的药理作用研究，发现枇杷核提取物，能够改善慢性支气管炎。这是因为，灌胃途径给药能够有效促进肺泡环境改善，同时通过灌胃给药，能够使得大鼠的支气管灌洗液中的中性粒细胞的水平得到降低，并且还能够提高大鼠的支气管灌洗液中的肺泡巨噬细胞的比例，通过这种方式延长大鼠的OS值，同时它能够使支气管炎模型大鼠的支气管分泌物减少，清除内分泌物；同时由于支气管炎会导致支气管炎模型大鼠的支气管黏膜上皮细胞的脱落等组织学问题。通过对支气管炎模型大鼠进行枇杷核提取物的灌胃给药，能够缓解支气管黏膜上皮的细胞的脱落的情况；另外由于炎症因子对于机体的刺激，从而刺激机体上皮细胞的增生，而通过为支气管炎模型大鼠灌胃给药，能够有效地缓解支气管黏膜上皮增生，从而达到支气管内径，使通气量增加，缓解呼吸困难的症状。对该机制进行研究，认为可能是由于同时通过灌胃给药，能够使得大鼠支气管的中性粒细胞的水平得到降低，并且还能够提高大鼠的支气管灌洗液中的肺泡巨噬细胞的比例，通过这种方式可以显著的延长大鼠的PFS值。
冯航[7]等研究了枇杷的药理作用，发现枇杷能够抑制咳嗽反射，同时能够增强肺部的纤毛的运动，通过小鼠镇咳的研究，观察祛痰作用后，结果表明，枇杷能明显减少咳嗽，并且减少小鼠器官的痰液分泌。说明枇杷中的成分其有很好的镇咳和祛痰功效。
辛松林[8]等研究了枇杷核水煮液，采用浓氨水致咳，生理盐水对照，发现枇杷水煮液能够止咳，并且在研究时，通过对比老幼枇杷核的效果发现，幼年枇杷核的药理效果较弱。
目 录
1 绪论 1
1.1 我国总黄酮和总多酚的研究现状 1
1.2 枇杷核的成分研究 1
1.3 枇杷核药理作用研究 1
1.3.1 抗炎、止咳作用 1
1.3.2 降血糖作用 2
1.3.3 抗病毒作用 2
1.3.4 抗瘤作用 3
1.3.5 其他药理作用 3
1.4 枇杷核中总黄酮、总多酚的研究 3
1.5 抗氧化活性的研究现状 3
1.5.1 DPPH自由基清除能力的测定 3
1.5.2 总还原能力的测定 3
1.5.3 羟自由基（OH）和超氧自由基（O2）清除率的测定 4
1.5.4 ABTS自由基清楚能力的测定 4
1.6 课题目的意义 4
2 实验部分 5
2.1 实验准备 5
2.1.1 试验材料 5
2.1.2 试验仪器 5
2.2 枇杷核提取物样品的制备 5
2.2.1 枇杷核提取液预处理 5
2.2.2 萃取物的制备 6 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
2.3枇杷核提取物中的含量测定 6
2.3.1总黄酮含量测定 6
2.3.2 枇杷核提取物中总多酚的含量测定 8
2.4 抗氧活性的研究方法 11
2.4.1 供试品溶液 11
2.4.2 VC溶液配置 11
2.4.3 抗氧化方法 11
2.5 结果与分析 12
2.5.1 对DPPH自由基的清除作用 12
2.5.2 对ABTS自由基的清除作用 13
3 结论与讨论 15
3.1 结论 15
3.2 讨论 15
3.2.1四种极性溶剂的确定 15
3.2.2供试品溶液的制备 16
3.2.3 取样量的确定 16
3.2.4 黄酮显色试剂量的确定 16
3.2.5 含量测定方法的确定 16
参考文献 18
致 谢 20
1 绪论
1.1 我国总黄酮和总多酚的研究现状
黄酮[1]是一类相对分子质量较低，其主要分布在植物中，为黄色或淡黄色的次生代谢物。近年来，运用的黄酮化合物的茶叶、牙膏和口香糖等产品在国内外都有发展。因此，其在食品、医药等方面具有很高的应用价值。
多酚化合物[2]是一种含有多种羟基自由基和芳香基团的物质，酚类化合物在自然界中，具有6500种，包括其衍生物。其广泛的存在于水果蔬菜中，在人类每天的生活中必不可缺，同时，多酚是人类每天摄入的最多的抗氧化物，能提高血管壁的弹性、促进肠胃消化、降低血脂、提高人体免疫力、防止动脉硬化、并抗拮细菌和癌症的生长。
经研究发现植物多酚，具有强烈生理功能，如自由基的清除和阻断自由基的链式反应等，在医疗上表现出了很强的抗氧化活性。冯航[3]等人在研究证明枇杷中的多酚类化合物含量与清除DPPH自由基的能力呈明显的正相关性。
1.2 枇杷核的成分研究
大量的研究说明枇杷核[4]中富含很多成分，如淀粉、蛋白质、等非常营养的成分，枇杷核中还含有很多多酚元素及苦杏仁苷、黄酮等多种生物活性物质，枇杷核有很好的药理作用，如增强免疫功能、抗衰老、抗炎、降血糖等多种功效。
1.3 枇杷核药理作用研究
1.3.1 抗炎、止咳作用
李鹰[5]等人证实，通过分别对小鼠灌胃枇杷核提取的枇杷核提取物（50、150和450mg/kg），可以降低AA小鼠足部的初级和二级肿胀程度，减少多发性关节炎的整体疾病情况。说明枇杷核的提取物对于对大鼠AA的药理作用，以及能够对其致病因素有抗拮作用，对其中的机制进行研究，这是可能与枇杷核提取物可增强脾淋巴细胞增殖的功能，增强脾淋巴细胞的分泌能力，从而促进淋巴细胞的增殖。
王小燕[6]通过对枇杷核中成分的药理作用研究，发现枇杷核提取物，能够改善慢性支气管炎。这是因为，灌胃途径给药能够有效促进肺泡环境改善，同时通过灌胃给药，能够使得大鼠的支气管灌洗液中的中性粒细胞的水平得到降低，并且还能够提高大鼠的支气管灌洗液中的肺泡巨噬细胞的比例，通过这种方式延长大鼠的OS值，同时它能够使支气管炎模型大鼠的支气管分泌物减少，清除内分泌物；同时由于支气管炎会导致支气管炎模型大鼠的支气管黏膜上皮细胞的脱落等组织学问题。通过对支气管炎模型大鼠进行枇杷核提取物的灌胃给药，能够缓解支气管黏膜上皮的细胞的脱落的情况；另外由于炎症因子对于机体的刺激，从而刺激机体上皮细胞的增生，而通过为支气管炎模型大鼠灌胃给药，能够有效地缓解支气管黏膜上皮增生，从而达到支气管内径，使通气量增加，缓解呼吸困难的症状。对该机制进行研究，认为可能是由于同时通过灌胃给药，能够使得大鼠支气管的中性粒细胞的水平得到降低，并且还能够提高大鼠的支气管灌洗液中的肺泡巨噬细胞的比例，通过这种方式可以显著的延长大鼠的PFS值。
冯航[7]等研究了枇杷的药理作用，发现枇杷能够抑制咳嗽反射，同时能够增强肺部的纤毛的运动，通过小鼠镇咳的研究，观察祛痰作用后，结果表明，枇杷能明显减少咳嗽，并且减少小鼠器官的痰液分泌。说明枇杷中的成分其有很好的镇咳和祛痰功效。
辛松林[8]等研究了枇杷核水煮液，采用浓氨水致咳，生理盐水对照，发现枇杷水煮液能够止咳，并且在研究时，通过对比老幼枇杷核的效果发现，幼年枇杷核的药理效果较弱。
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