不同炮制方法对酸枣仁中酸枣仁皂苷含量的影响
摘 要酸枣是鼠李科植物落叶灌木或小乔木酸枣的成熟种子，含有皂苷类、脂肪、油脂、黄酮类物质以及丰富的维生素和多种氨基酸。其中酸枣仁的有效成分酸枣仁皂苷A的含量与其炮制方法及其炮制工艺条件有明显关系。一直以来，酸枣仁都用的是炒法，为开发探寻更多样更灵活的酸枣仁的炮制方法，本文以酸枣仁为原料，通过不同方法的实验验证、选择比较，证实了蒸制法基于破壁膨胀利于溶解扩散，利于有效成分的提出，也是一种可行的具有一定优点的炮制酸枣仁的方法。故本文探索蒸制法对酸枣仁进行蒸制可行性的研究。以酸枣仁皂苷A的含量为评价指标，优化蒸制的最佳工艺并采用紫外分光光度法测定酸枣仁皂苷A的总含量。结果确立了蒸制酸枣仁的最佳蒸制工艺为蒸制时间40 min，蒸制温度100 ℃，最佳升温时间30 min。酸枣仁蒸制工艺合理可行、稳定可靠，可为酸枣仁炮制新方法提供新途径；为酸枣仁的衍生品、保健品以及药品的开发利用提供参考、奠定基础。
Key words:Zizyphus jujube; jujuboside a; Orthogonal experiment; steaming 目 录
1 绪论 1
1.1 酸枣仁 1
1.1.1 酸枣仁简介 1
1.1.2 酸枣仁化学成分 1
1.1.3 酸枣仁药理作用 3
1.2 炮制方法 4
1.3 提取方法 5
1.4 研究目的及意义 6
1.4.1 研究目的 6
1.4.2 研究意义 6
2 实验部分 7
2.1 实验材料与仪器 7
2.2.2波长的选择 8
2.2.3标准曲线的绘制 8
2.3 含量测定 9
2.4 炮制方法探索比较 9
2.5 单因素考察 10
2.6 正交实验 14
3 结 论 15
参考文献 16
致 谢 18
1 绪论
1.1 酸枣仁
1.1.1 酸枣仁简介
酸枣仁是鼠李科植 物落叶灌木 酸枣的成熟种子，一般在秋季的末尾，冬天的开始采收，采收到酸枣后，把果肉刮去，留 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072#
下果核，将 果核压碎、把种 子取出来，将种子晒干后就是酸枣仁。酸枣在我国有特别丰富的资源，它的主要分布中心是华北黄土高原，同时在河南、山西、山东、陕西、河北、湖北、安徽等 地也都有分布。酸 枣大多生长在海 拔250500米高的 向阳山坡或丘陵地带。酸枣喜欢阳光充沛的地方且其抵抗寒冷的能力比较强、耐受干旱、害怕水涝。酸枣的繁殖主要靠地下横走，茎向周围延伸，钻出地面 形成新的生命。
酸枣仁具有使心神安宁、生 津 止渴、抗氧 化、保肝等多种药 理作用。中医普遍认 为酸枣仁性平，味甘，入心、肝、胆经。是养心、补肝、坚筋骨的良药。
1.1.2 酸枣仁化学成分
目前，学者已经从酸枣仁中分离 得 到很多种化学物，其中包含的不仅有黄 酮 类物质、皂苷类物质、萜类物质、生物碱类物质还有脂肪油等多种化学物质。
（1）皂苷类。皂苷（Saponin）是一类糖苷，它的苷元是三萜或者是螺旋甾烷 类化合 ，一般 陆地高等植物分布的较多，在海洋生物中有少量的存在。皂苷不仅能够解热、抗菌、镇 静，还 能够抗癌。酸枣仁皂苷是酸枣仁中含量较高的物质，它的化学成分非常复杂、药理作用也特别广泛。其中最主要的成分就是达 玛烷型三萜皂苷类化合物，这之中包括酸枣仁皂苷A、B和B1。
目前，从酸枣仁中已经鉴定出来很多种皂苷类化学物有，其中包括酸枣仁皂苷B、酸枣仁皂苷A1和乙酰酸枣仁皂苷B。八十年代，从酸枣仁中就分离得到原酸枣仁皂苷A1、原酸枣仁皂苷B1和原酸枣仁皂苷B。王建忠[1]等通过硅胶柱分离纯化的方法的同时，结合运用现代波谱技术，从酸枣仁中先后得到新的酮基达玛烷型三萜皂苷，并将其分别命名为酸枣仁皂苷H和G，另外还有报道用多种色谱法从酸仁中分离得到酸枣仁皂苷D和E
（2）黄酮类。黄酮类化合物泛指通过三个碳原子连接两个苯环而成的一系列化合物，具有非常好的药理作用，随着技术的发展进步，人类已经可以对黄酮类物质进行人工合成，它的展现形式基本上都是灰黄色至黄色的固体结晶。天然黄酮类化合物具有延迟衰老，清除炎症，增强自身免疫，抗肿瘤等功效。黄酮类化合物因其具有较强的生物活性，故在医疗以及食品领域中具有广阔的应用前景。早期就有外国学者won.sick.woo[2]首次从酸枣仁的甲醇提取物中分离得到斯皮诺黄酮碳苷，并确定它的结构形式。现在经过学者们的多年探索和研究，已经从酸枣仁中逐渐分离得到更多的黄酮类物质，如当药素、葛根素、酸枣黄素、异斯皮诺素等16个黄酮碳苷类化合物。郭胜民[3]等对酸枣仁的乙醇提取物中总黄酮进行聚酞胺柱层析，得到两种黄酮苷，经鉴定为斯皮诺素和酸枣黄素。王少敏[4]等在酸枣仁中分离得到了一个新的角型呋喃黄酮鼠李糖苷，将其命名为斯皮诺素鼠李糖苷。
（3）生物碱类。生物碱是一种具有很多明显的生物活性功能的碱性化合物，这种物质广泛分布于植物中，是中草药中非常重要的有效成分之一，所以又将其称为“植物碱”，生物碱一般都含有碳、氢、氧和氮4种元素，只有极少一部分不含氧元素。氮元素一般都包含在环内，有很明显的生物活性。目前发现的生物碱已有大约一万种左右，有一些生物碱的结构式到目前为止还没有完全确定。
尹升镇[5]等从酸枣仁中分到生物碱和阿魏酸这两种生物碱。另外发现的生物碱还有荷叶碱、原荷叶碱、酸枣仁碱、去甲异紫堇定、右旋衡州乌药碱、酸李碱、酸枣仁碱B、酸枣仁碱F、酸枣仁碱G1、酸枣仁碱G2、酸枣仁环肽安木菲宾碱等。
（4）脂肪油。酸枣仁中含32%的脂肪油，其中已经检验出41种成分，鉴定出来的有24种，大部分为脂肪酸类物质，如：己酸甲酯、庚酸甲酯、辛酸甲酯、壬酸甲酯、葵酸甲酯等等。
（5）三萜类。数个异戊二烯去掉羟基之后首尾相连所构成的化学物质就叫做三萜类化合物，又叫做灵芝酸，它在自然界中的分布很广泛。三萜类成分有两种，五环三萜和四环三萜，三萜类化合物具有极其广泛的生理活性，比如溶血、抗癌、抗炎、抗菌、抗病毒、降低胆固醇、杀软体动物的同时还具有抗生育等生物活性。
酸枣仁中三萜类主要成分是羽扇豆烷型三萜类化学物，曾路[6]能从酸枣仁分离得到化合物白桦脂酸、白桦脂醇、美洲茶酸以及麦珠子酸；何峰[7]从酸枣仁中分离到罗珠子酸甲酯。除此之外，曹琴[8]从酸枣仁分离得到齐燉果烷型三萜化合物并为其命名为齐燉果酸。
1.1.3 酸枣仁药理作用
随着技术的不断发展，中医中药已经走出了国门，走向了世界，越来越多的国内外科学家医学工作者对中国神奇的中草药进行更深层次的研究。随着对中药材化学成分探索，对先关粗提物、单体化合物的药理活性筛选的研究也越来越详细。酸枣仁也是如此。
（1）镇静催眠作用。研究显示，连续给小白鼠注射用酸枣仁熬的汤，小白鼠表现出的反应和巴比妥类药物表现出的反应雷同，也就是小白鼠的自主活动次数减少，入睡准备时间缩短。酸枣仁的镇静催眠作用主要是通过抑制中枢神经而达到的。Zhang[9]等利用微透析技术研究酸枣仁皂苷A对小白鼠大脑中谷氨酸水平的影响。结果显示大剂量的酸枣仁皂苷A能够明显使海马谷氨酸的上升变慢，说明可以影响小白鼠海马区兴奋性信号的通道。Chen[10]等认为酸枣仁皂苷A水解后成为了苷元，酸枣仁皂苷元可以透过 血脑 屏障，与关键残基 结合形成氢键，说明了它是具有镇 静催眠作用的。Cao[11]等通过大鼠的脑电图观察大鼠睡眠参数，发现酸枣仁总皂苷可以明显的影响大鼠的睡眠时间。
Key words:Zizyphus jujube; jujuboside a; Orthogonal experiment; steaming 目 录
1 绪论 1
1.1 酸枣仁 1
1.1.1 酸枣仁简介 1
1.1.2 酸枣仁化学成分 1
1.1.3 酸枣仁药理作用 3
1.2 炮制方法 4
1.3 提取方法 5
1.4 研究目的及意义 6
1.4.1 研究目的 6
1.4.2 研究意义 6
2 实验部分 7
2.1 实验材料与仪器 7
2.2.2波长的选择 8
2.2.3标准曲线的绘制 8
2.3 含量测定 9
2.4 炮制方法探索比较 9
2.5 单因素考察 10
2.6 正交实验 14
3 结 论 15
参考文献 16
致 谢 18
1 绪论
1.1 酸枣仁
1.1.1 酸枣仁简介
酸枣仁是鼠李科植 物落叶灌木 酸枣的成熟种子，一般在秋季的末尾，冬天的开始采收，采收到酸枣后，把果肉刮去，留 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072#
下果核，将 果核压碎、把种 子取出来，将种子晒干后就是酸枣仁。酸枣在我国有特别丰富的资源，它的主要分布中心是华北黄土高原，同时在河南、山西、山东、陕西、河北、湖北、安徽等 地也都有分布。酸 枣大多生长在海 拔250500米高的 向阳山坡或丘陵地带。酸枣喜欢阳光充沛的地方且其抵抗寒冷的能力比较强、耐受干旱、害怕水涝。酸枣的繁殖主要靠地下横走，茎向周围延伸，钻出地面 形成新的生命。
酸枣仁具有使心神安宁、生 津 止渴、抗氧 化、保肝等多种药 理作用。中医普遍认 为酸枣仁性平，味甘，入心、肝、胆经。是养心、补肝、坚筋骨的良药。
1.1.2 酸枣仁化学成分
目前，学者已经从酸枣仁中分离 得 到很多种化学物，其中包含的不仅有黄 酮 类物质、皂苷类物质、萜类物质、生物碱类物质还有脂肪油等多种化学物质。
（1）皂苷类。皂苷（Saponin）是一类糖苷，它的苷元是三萜或者是螺旋甾烷 类化合 ，一般 陆地高等植物分布的较多，在海洋生物中有少量的存在。皂苷不仅能够解热、抗菌、镇 静，还 能够抗癌。酸枣仁皂苷是酸枣仁中含量较高的物质，它的化学成分非常复杂、药理作用也特别广泛。其中最主要的成分就是达 玛烷型三萜皂苷类化合物，这之中包括酸枣仁皂苷A、B和B1。
目前，从酸枣仁中已经鉴定出来很多种皂苷类化学物有，其中包括酸枣仁皂苷B、酸枣仁皂苷A1和乙酰酸枣仁皂苷B。八十年代，从酸枣仁中就分离得到原酸枣仁皂苷A1、原酸枣仁皂苷B1和原酸枣仁皂苷B。王建忠[1]等通过硅胶柱分离纯化的方法的同时，结合运用现代波谱技术，从酸枣仁中先后得到新的酮基达玛烷型三萜皂苷，并将其分别命名为酸枣仁皂苷H和G，另外还有报道用多种色谱法从酸仁中分离得到酸枣仁皂苷D和E
（2）黄酮类。黄酮类化合物泛指通过三个碳原子连接两个苯环而成的一系列化合物，具有非常好的药理作用，随着技术的发展进步，人类已经可以对黄酮类物质进行人工合成，它的展现形式基本上都是灰黄色至黄色的固体结晶。天然黄酮类化合物具有延迟衰老，清除炎症，增强自身免疫，抗肿瘤等功效。黄酮类化合物因其具有较强的生物活性，故在医疗以及食品领域中具有广阔的应用前景。早期就有外国学者won.sick.woo[2]首次从酸枣仁的甲醇提取物中分离得到斯皮诺黄酮碳苷，并确定它的结构形式。现在经过学者们的多年探索和研究，已经从酸枣仁中逐渐分离得到更多的黄酮类物质，如当药素、葛根素、酸枣黄素、异斯皮诺素等16个黄酮碳苷类化合物。郭胜民[3]等对酸枣仁的乙醇提取物中总黄酮进行聚酞胺柱层析，得到两种黄酮苷，经鉴定为斯皮诺素和酸枣黄素。王少敏[4]等在酸枣仁中分离得到了一个新的角型呋喃黄酮鼠李糖苷，将其命名为斯皮诺素鼠李糖苷。
（3）生物碱类。生物碱是一种具有很多明显的生物活性功能的碱性化合物，这种物质广泛分布于植物中，是中草药中非常重要的有效成分之一，所以又将其称为“植物碱”，生物碱一般都含有碳、氢、氧和氮4种元素，只有极少一部分不含氧元素。氮元素一般都包含在环内，有很明显的生物活性。目前发现的生物碱已有大约一万种左右，有一些生物碱的结构式到目前为止还没有完全确定。
尹升镇[5]等从酸枣仁中分到生物碱和阿魏酸这两种生物碱。另外发现的生物碱还有荷叶碱、原荷叶碱、酸枣仁碱、去甲异紫堇定、右旋衡州乌药碱、酸李碱、酸枣仁碱B、酸枣仁碱F、酸枣仁碱G1、酸枣仁碱G2、酸枣仁环肽安木菲宾碱等。
（4）脂肪油。酸枣仁中含32%的脂肪油，其中已经检验出41种成分，鉴定出来的有24种，大部分为脂肪酸类物质，如：己酸甲酯、庚酸甲酯、辛酸甲酯、壬酸甲酯、葵酸甲酯等等。
（5）三萜类。数个异戊二烯去掉羟基之后首尾相连所构成的化学物质就叫做三萜类化合物，又叫做灵芝酸，它在自然界中的分布很广泛。三萜类成分有两种，五环三萜和四环三萜，三萜类化合物具有极其广泛的生理活性，比如溶血、抗癌、抗炎、抗菌、抗病毒、降低胆固醇、杀软体动物的同时还具有抗生育等生物活性。
酸枣仁中三萜类主要成分是羽扇豆烷型三萜类化学物，曾路[6]能从酸枣仁分离得到化合物白桦脂酸、白桦脂醇、美洲茶酸以及麦珠子酸；何峰[7]从酸枣仁中分离到罗珠子酸甲酯。除此之外，曹琴[8]从酸枣仁分离得到齐燉果烷型三萜化合物并为其命名为齐燉果酸。
1.1.3 酸枣仁药理作用
随着技术的不断发展，中医中药已经走出了国门，走向了世界，越来越多的国内外科学家医学工作者对中国神奇的中草药进行更深层次的研究。随着对中药材化学成分探索，对先关粗提物、单体化合物的药理活性筛选的研究也越来越详细。酸枣仁也是如此。
（1）镇静催眠作用。研究显示，连续给小白鼠注射用酸枣仁熬的汤，小白鼠表现出的反应和巴比妥类药物表现出的反应雷同，也就是小白鼠的自主活动次数减少，入睡准备时间缩短。酸枣仁的镇静催眠作用主要是通过抑制中枢神经而达到的。Zhang[9]等利用微透析技术研究酸枣仁皂苷A对小白鼠大脑中谷氨酸水平的影响。结果显示大剂量的酸枣仁皂苷A能够明显使海马谷氨酸的上升变慢，说明可以影响小白鼠海马区兴奋性信号的通道。Chen[10]等认为酸枣仁皂苷A水解后成为了苷元，酸枣仁皂苷元可以透过 血脑 屏障，与关键残基 结合形成氢键，说明了它是具有镇 静催眠作用的。Cao[11]等通过大鼠的脑电图观察大鼠睡眠参数，发现酸枣仁总皂苷可以明显的影响大鼠的睡眠时间。
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