柿叶多糖的体外降血脂活性研究(附件)
摘 要目的对柿叶总多糖的体外降血脂活性进行研究，为柿叶功能性保健品的开发利用提供理论依据。方法采用水提醇沉法得到三种不同醇沉柿叶多糖产物，通过体外模拟胃肠道消化环境，结合紫外分光光度法测定柿叶总多糖与牛黄胆酸钠的结合率，评价三种醇沉柿叶多糖的体外降血脂活性。结果柿叶总多糖与牛黄胆酸钠结合率越高，体外降血脂活性越好，降血脂活性强弱90%醇沉产物>80%醇沉产物>70%醇沉产物。结论90%醇沉柿叶多糖在体外与牛黄胆酸钠结合率最高，具有较好的体外降血脂活性，可进一步开发其在功能性保健品方面的应用。
目 录
1概述 1
1.1 柿叶中化学成分的研究 1
1.1.1 多糖类化合物 1
1.1.2 有机酸类化合物 1
1.1.3 三萜类化合物 1
1.1.4 黄酮类化合物 1
1.1.5 多酚类化合物 2
1.2 柿叶多糖药理作用研究 2
1.2.1 降血脂作用 2
1.2.2 抗氧化作用 2
1.2.3 抗癌作用 2
1.2.4 保护心脑血管作用 2
1.2.5 降血压作用 2
1.2.6 止血作用 3
1.2.7 抗菌作用 3
1.3 高脂血症的研究概况 3
1.3.1高血脂症的发病率及趋势 3
1.3.2 高血脂症的分类 3
1.3.3 高血脂症的常用药物及其分类 4
1.4 降血脂药物的作用机制 4
1.4.1 抑制HMGCOA还原酶 5
1.4.2 与胆汁酸结合抑制胆汁酸重吸收 5
1.4.3 抑制NPC1L1转运蛋白活性 5
1.4.4 降低VLDL 6
1.4.5 阻断脂质过氧化 6
1.5研究柿叶多糖降血脂活性的意义 6
2牛黄胆酸钠含量测定和柿叶多糖含量测定方法学的建立 8
2.1 仪器与试剂 8
2.1.1 仪器 8
2.1.2 试剂 8
2.2 牛黄胆酸钠含量测定方法学的建立 8
2.2.1 牛黄 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
胆酸钠溶液的配制 8
2.2.2 最大吸收波长的确定 9
2.2.3 牛黄胆酸钠的标注曲线 9
2.2.4稳定性试验 10
2.2.5 精密度试验 10
2.3 柿叶总多糖含量测定的方法学建立 11
2.3.1溶液的配置 11
2.3.2测定方法 11
2.3.3紫外吸收波长的选择 11
2.3.4标准曲线的绘制 12
2.3.5稳定性试验 13
2.3.6精密度 13
2.3.7 回收率试验 13
3柿叶多糖的体外降血脂活性研究 15
3.1 仪器与试剂 15
3.1.1 仪器 15
3.1.2 试剂 15
3.2 试验方法 15
3.2.1 试验流程 15
3.2.2 柿叶总多糖的提取制备 15
3.2.3 柿叶总多糖与牛黄胆酸钠结合 16
3.3 结果与分析 16
3.4 小结与讨论 17
结 论 16
参考文献 17
致 谢 19 1概述
柿叶为柿树科柿树的新鲜或干燥的叶片。味苦，性寒，其为药载于明代的药籍《滇南本草》[1]。柿叶具有生津止渴，抗菌消炎，镇咳止血，抗癌防癌，润肺强心，清热解毒等多种药理作用[2]。柿叶中含有多种对人体健康有益的成分，例如胡萝卜素、多种氨基酸及铁、锌、钙、芦丁、多糖苷、Vc、胆碱等多种化学成分[3]。
1.1 柿叶中化学成分的研究
现代研究表明，柿叶中含有多种生物活性物质：包括多糖类化合物(Flavonoids)、三萜类化合物（Triterpenoids）、有机酸类化合物(Organic acid compounds)以及多酚类化合物(Polyphenols)等多种物质。这些生物活性物质具有广泛的药理作用。
1.1.1 多糖类化合物
多糖是由10个以上的单糖的糖苷键连接组成高分子碳水化合物。多糖具有抗衰老、抗肿瘤、调节免疫等功效，因此被广泛地用于医疗和保健行业。傅建敏提取柿叶果胶多糖，得到它的结构组成包括半乳糖，木糖，鼠李糖，阿拉伯糖等[4]。
1.1.2 有机酸类化合物
柿叶中含有多种机酸，主要有VC及其他有机酸。VC又称为L抗坏血酸，是人类和其他高等灵长类动物必须但又不能在体内合成的营养素，是植物维生素类营养的评价标志。柿叶中维生素的含量几乎是所有植物叶片中最高的。其他的有机酸包括对羟基苯甲酸、苯甲酸、苹果酸、原儿茶酚酸、丁香酸、糠酸、琥珀酸、水杨酸和吲哚基醋酸等。
1.1.3 三萜类化合物
三萜类化合物是由多个异戊二烯单位首尾相连构成的化合物。柿叶中含有齐墩果酸﹑熊果苷、桦木酸、乌苏酸、乌苏醇﹑19α羟基乌苏酸、19α,24二羟基乌苏酸等多种三萜类化合物。
1.1.4 黄酮类化合物
黄酮类化合物是一类广泛存在于自然界的﹑具有2苯基色原酮基本结构的化 合物。黄酮类化合物在植物体中通常与糖结合成苷类，小部分以苷元的形式存在。绝大多数植物体内都含有黄酮类化合物，它在植物的生长、发育、开花、结果以及抗菌防病等方面起着重要的作用。
1.1.5 多酚类化合物
柿叶中含有多种酚类化合物，导致柿叶充满涩味的丹宁属于多酚类化合物。有人研究表明柿叶中含有没食子酸﹑肉桂酸﹑咖啡酸﹑香豆酸﹑绿原酸﹑原儿茶酸﹑阿魏酸﹑丁香酸等多种多酚类化合物。
1.2 柿叶多糖药理作用研究
1.2.1 降血脂作用
新鲜柿叶汁对高脂饮食诱导的高脂血症大鼠，可以明显抑制其体重增加，说明柿叶有降血脂作用。有研究表明将新鲜的柿叶制成柿叶汁，对高脂大鼠喂食6周后，大鼠的低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量均有明显下降，高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)含量明显增高[5]。
1.2.2 抗氧化作用
体内自由基产生过多能够诱发体内的抗氧化体系不足，导致氧化物和抗氧化物平衡失调，从而引发衰老或者其他疾病。有人研究发现柿叶中的多糖成分能够有效的清除体内自由基，能够抑制红细胞膜、肝、脾等器官生物膜的氧化破坏[6]。表明柿叶多糖具有抗氧化作用。
1.2.3 抗癌作用
有研究表明，多糖类化合具有抗癌作用，柿叶中多糖类化合物主要是能够通过阻止亚硝胺类所导致的癌变而达到抗癌作用。
1.2.4 保护心脑血管作用
柿叶能增加心脏冠状动脉血流量，增强血液循环，对急性心肌缺血具有保护作用。由此证明，柿叶对心脑血管疾病有较好的治疗作用[7]。
1.2.5 降血压作用
根据覃斐章采用聚酰胺树脂分离提纯富集柿叶多糖成分做动物实验。该研究表明柿叶多糖具有降血压作用[8]。
1.2.6 止血作用
柿叶多糖具有活血止血的作用，其中用水煎服并烘干的柿子叶可在一定程度上治疗血小板减少过敏性紫癜和胃出血。
目 录
1概述 1
1.1 柿叶中化学成分的研究 1
1.1.1 多糖类化合物 1
1.1.2 有机酸类化合物 1
1.1.3 三萜类化合物 1
1.1.4 黄酮类化合物 1
1.1.5 多酚类化合物 2
1.2 柿叶多糖药理作用研究 2
1.2.1 降血脂作用 2
1.2.2 抗氧化作用 2
1.2.3 抗癌作用 2
1.2.4 保护心脑血管作用 2
1.2.5 降血压作用 2
1.2.6 止血作用 3
1.2.7 抗菌作用 3
1.3 高脂血症的研究概况 3
1.3.1高血脂症的发病率及趋势 3
1.3.2 高血脂症的分类 3
1.3.3 高血脂症的常用药物及其分类 4
1.4 降血脂药物的作用机制 4
1.4.1 抑制HMGCOA还原酶 5
1.4.2 与胆汁酸结合抑制胆汁酸重吸收 5
1.4.3 抑制NPC1L1转运蛋白活性 5
1.4.4 降低VLDL 6
1.4.5 阻断脂质过氧化 6
1.5研究柿叶多糖降血脂活性的意义 6
2牛黄胆酸钠含量测定和柿叶多糖含量测定方法学的建立 8
2.1 仪器与试剂 8
2.1.1 仪器 8
2.1.2 试剂 8
2.2 牛黄胆酸钠含量测定方法学的建立 8
2.2.1 牛黄 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
胆酸钠溶液的配制 8
2.2.2 最大吸收波长的确定 9
2.2.3 牛黄胆酸钠的标注曲线 9
2.2.4稳定性试验 10
2.2.5 精密度试验 10
2.3 柿叶总多糖含量测定的方法学建立 11
2.3.1溶液的配置 11
2.3.2测定方法 11
2.3.3紫外吸收波长的选择 11
2.3.4标准曲线的绘制 12
2.3.5稳定性试验 13
2.3.6精密度 13
2.3.7 回收率试验 13
3柿叶多糖的体外降血脂活性研究 15
3.1 仪器与试剂 15
3.1.1 仪器 15
3.1.2 试剂 15
3.2 试验方法 15
3.2.1 试验流程 15
3.2.2 柿叶总多糖的提取制备 15
3.2.3 柿叶总多糖与牛黄胆酸钠结合 16
3.3 结果与分析 16
3.4 小结与讨论 17
结 论 16
参考文献 17
致 谢 19 1概述
柿叶为柿树科柿树的新鲜或干燥的叶片。味苦，性寒，其为药载于明代的药籍《滇南本草》[1]。柿叶具有生津止渴，抗菌消炎，镇咳止血，抗癌防癌，润肺强心，清热解毒等多种药理作用[2]。柿叶中含有多种对人体健康有益的成分，例如胡萝卜素、多种氨基酸及铁、锌、钙、芦丁、多糖苷、Vc、胆碱等多种化学成分[3]。
1.1 柿叶中化学成分的研究
现代研究表明，柿叶中含有多种生物活性物质：包括多糖类化合物(Flavonoids)、三萜类化合物（Triterpenoids）、有机酸类化合物(Organic acid compounds)以及多酚类化合物(Polyphenols)等多种物质。这些生物活性物质具有广泛的药理作用。
1.1.1 多糖类化合物
多糖是由10个以上的单糖的糖苷键连接组成高分子碳水化合物。多糖具有抗衰老、抗肿瘤、调节免疫等功效，因此被广泛地用于医疗和保健行业。傅建敏提取柿叶果胶多糖，得到它的结构组成包括半乳糖，木糖，鼠李糖，阿拉伯糖等[4]。
1.1.2 有机酸类化合物
柿叶中含有多种机酸，主要有VC及其他有机酸。VC又称为L抗坏血酸，是人类和其他高等灵长类动物必须但又不能在体内合成的营养素，是植物维生素类营养的评价标志。柿叶中维生素的含量几乎是所有植物叶片中最高的。其他的有机酸包括对羟基苯甲酸、苯甲酸、苹果酸、原儿茶酚酸、丁香酸、糠酸、琥珀酸、水杨酸和吲哚基醋酸等。
1.1.3 三萜类化合物
三萜类化合物是由多个异戊二烯单位首尾相连构成的化合物。柿叶中含有齐墩果酸﹑熊果苷、桦木酸、乌苏酸、乌苏醇﹑19α羟基乌苏酸、19α,24二羟基乌苏酸等多种三萜类化合物。
1.1.4 黄酮类化合物
黄酮类化合物是一类广泛存在于自然界的﹑具有2苯基色原酮基本结构的化 合物。黄酮类化合物在植物体中通常与糖结合成苷类，小部分以苷元的形式存在。绝大多数植物体内都含有黄酮类化合物，它在植物的生长、发育、开花、结果以及抗菌防病等方面起着重要的作用。
1.1.5 多酚类化合物
柿叶中含有多种酚类化合物，导致柿叶充满涩味的丹宁属于多酚类化合物。有人研究表明柿叶中含有没食子酸﹑肉桂酸﹑咖啡酸﹑香豆酸﹑绿原酸﹑原儿茶酸﹑阿魏酸﹑丁香酸等多种多酚类化合物。
1.2 柿叶多糖药理作用研究
1.2.1 降血脂作用
新鲜柿叶汁对高脂饮食诱导的高脂血症大鼠，可以明显抑制其体重增加，说明柿叶有降血脂作用。有研究表明将新鲜的柿叶制成柿叶汁，对高脂大鼠喂食6周后，大鼠的低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量均有明显下降，高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)含量明显增高[5]。
1.2.2 抗氧化作用
体内自由基产生过多能够诱发体内的抗氧化体系不足，导致氧化物和抗氧化物平衡失调，从而引发衰老或者其他疾病。有人研究发现柿叶中的多糖成分能够有效的清除体内自由基，能够抑制红细胞膜、肝、脾等器官生物膜的氧化破坏[6]。表明柿叶多糖具有抗氧化作用。
1.2.3 抗癌作用
有研究表明，多糖类化合具有抗癌作用，柿叶中多糖类化合物主要是能够通过阻止亚硝胺类所导致的癌变而达到抗癌作用。
1.2.4 保护心脑血管作用
柿叶能增加心脏冠状动脉血流量，增强血液循环，对急性心肌缺血具有保护作用。由此证明，柿叶对心脑血管疾病有较好的治疗作用[7]。
1.2.5 降血压作用
根据覃斐章采用聚酰胺树脂分离提纯富集柿叶多糖成分做动物实验。该研究表明柿叶多糖具有降血压作用[8]。
1.2.6 止血作用
柿叶多糖具有活血止血的作用，其中用水煎服并烘干的柿子叶可在一定程度上治疗血小板减少过敏性紫癜和胃出血。
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