细辛根茎叶中马兜铃酸含量测定
本人签名 日期 摘 要 药材细辛（Asari Redix et Rhizoma）是马兜铃科植物的一种，入药的部位是干燥后的根及根茎。细辛味辛,具有消暑祛寒、祛风祛湿、调节血压的作用。通窍等疗效。本文选用高效液相色谱法分别测定并比较陕西秦岭、河南信阳、甘肃岷县三个产地的细辛根、茎、叶马兜铃酸含量，结果显示陕西秦岭生长的细辛无论根、茎、叶各部分马兜铃酸含量都比其它两个产地的含量高，其根茎叶中马兜铃酸含量分别为根中含量为5.26%，茎中含量为1.62%，叶中含量为45.21%；而甘肃岷县的细辛根和叶子中马兜铃酸含量高于河南信阳细辛根和叶，其中根中含量为3.87%，茎中含量为1.38%，叶中含量为39.2%；而河南信阳所产的细辛茎中马兜铃酸含量高于甘肃岷县细辛茎中的含量根中马兜铃酸含量为2.87%，茎中马兜铃酸含量为1.68%，叶中马兜铃酸含量为37.22%；。整体分析可发现，细辛叶中马兜铃酸的含量要远远高于根和茎中马兜铃酸的含量。
Keywords: Asarum; different parts; aristolochic acid; content determination 目 录
1 概述 1
1.1 细辛简介 1
1.2 细辛的化学成分研究 1
1.3 细辛的药理作用研究 1
1.3.1 解热、抗炎和抗变态反应 1
1.3.2 镇静及镇痛作用 1
1.3.3 强心及抗心肌缺血 2
1.3.4 调节血压作用 2
1.3.5 对血小板的作用 2
1.3.6 平喘及祛痰作用 3
1.3.7 抑菌及抗病毒作用 3
1.3.8 对肝脏的作用 4
1.3.9 其他 4
1.4 马兜铃酸概述 5
1.5 选题目的与意义 7
2 实验内容 8
2.1 实验材料收集与处理 8
2.2 实验仪器与试剂 8
2.2.1 实验仪器 8
2.2.2 实验试剂 9
2.3 实验方法 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: &351916072&
9
2.3.1 供试品溶液配制 9
2.3.2 对照品溶液配制 9
2.3.3 仪器设备工作条件 9
2.3.4 标准溶液与标准曲线绘制 10
2.3.5 供试品溶液马兜铃酸含量测定 10
2.3.6 方法学考察 10
3 实验结果 12
3.1 标准曲线绘制 12
3.2 方法学考察结果 12
3.2.1 精密度试验 12
3.2.2 稳定性试验 13
3.2.3 加样回收率试验 13
3.3 供试品马兜铃酸含量测定结果 14
结果与分析 16
参考文献 19
致 谢 21
1 概述
1.1 细辛简介
药材细辛(Asari Redix et Rhizoma)是马兜铃科植物的一种,选择入药部位为干燥后的根及根茎。细辛又名叶草、细草、小辛、单叶草,也可称为“金草”和“山参”。细辛在治疗疾病方面有着悠久的历史，是我国的传统珍贵药材[1]。
1.2 细辛的化学成分研究
细辛的主要成分有马兜铃酸、甲基丁香油酚和α蒎烯、β蒎烯、月桂烯、细辛醚、柠檬油精、黄樟醚、α水芹烯、3蒈烯以及伞花烃等，另外还有钾、钠、镁、钙、铁、锰、铜、锌等微量元素[2]。
1.3 细辛的药理作用研究
1.3.1 解热、抗炎和抗变态反应
谢伟和陆满文等通过研究后得出：细辛挥发油通过灌服可以使对温刺法、伤寒和副伤寒的混合疫苗所导致的发烧实验兔体温降低，还可以对蛋清、甲醛等所导致的大鼠关节肿胀进行消肿。对啤酒酵母所导致的实验鼠发烧有明显的退烧作用，还可以使正常实验鼠体温变低[3] 。速效变态反应的总过敏介质释放可通过细辛或醇提取物减少一半以上，这表明细辛具有抗过敏作用。细辛的抗变态反应及其抗炎反应的作用机理是：可以使肾上腺皮质功能增强，并可以阻止炎症介质释放、毛细血管的通透性增加及渗出、还可使结缔组织增生促成等，作用与促肾上腺皮质激素类似[45]。细辛挥发油具有明显的中枢抑制作用,小剂量可使动物安静、处于半昏迷状态,大剂量会直接导致动物昏迷,?表现出明显的抗惊厥作用[6]。
1.3.2 镇静及镇痛作用
細辛的提取物在实验鼠温浴法、实验鼠热板法、实验鼠甩尾法及实验鼠扭体法等一系列止痛实验里，会体现出很强的镇痛作用。和吗啡的止痛作用相比，细辛虽然起效时间比较慢，但是其优点是作用维持的时间长[7]。细辛在镇痛方面的作用机制可能是产生自由基，从而会抵制缓激肽等这些致痛化合物[8]。细辛炮制后，比如煎细辛，就可以让蟾蜍的坐骨神经停止传导，降低坐骨神经的疼痛感，表明细辛可以通过干扰神经的传递达到止痛效果。
1.3.3 强心及抗心肌缺血
对心脏有问题的实验狗，通过使用乙醇提取的细辛后，可改善症状并修复心脏问题。具体表现为：平均动脉压（MAP）的升高以及左心室内压（LVP）的升高以及心输出量加强，心跳和等容期心肌最大收缩速度加快等作用，表现出和多巴胺相像的作用强度。细辛也可以对急性心肌缺血产生作用：可以对患有心肌缺血的实验兔子产生作用，从而改善症状[9]。研究表明了用乙醇提取细辛后，作用于心脏时还会使心脏兴奋，加强心脏的收缩力，很明显的改善心脏功能[10]。熬制后的细辛水溶液会让体外培养乳鼠心跳变快，对心肌细胞的搏动幅度没有变化，这就说明了细辛对心肌细胞的作用主要就是使心跳加快，心率增加。
细辛在对抗冠心病时的作用机制：PNS左心室的开拓功能，钙可以让肌肉细胞膜泵活性心肌细胞内CAT过载和左心室心肌的能量变得更多，也会让PNS心肌细胞膜钙泵工程的活性使心肌细胞也变少很多[10]。PNS会让左室游离壁心肌变轻，这就表明了PNS对非特异性工程膜钙泵具有兴奋作用。宋莉娜等人研究了PNS和心脏病患者增加SOD活性下降，LPO溶化功能纤维含量等[11]。
1.3.4 调节血压作用
细辛在治疗血压类疾病时也有很好的作用疗效，可以直接对血压进行调节，并且调节效果可逆，可以降低血压，也可以把血压变高。实验说明其挥发油也可以作用于血管，可以将实验动物的内脏里面的血管，进行扩张。将细辛的醇溶液采用静脉注射，用量达到0.1250.25g/kg，就能让实验动物的血压很快的降下来，这就说明了它的作用与去甲肾上腺素一样。细辛中不同物质的作用各不相同，水溶性物质可以使血压增高，挥发油可以使血压降低[11]。
1.3.5 对血小板的作用
血小板活化可以直接导致脑血栓的形成，血小板对脑缺血的形成和发展起关键作用，血小板的活化在增强状态的时候会形成脑缺血，因此可以通过抑制血小板的活化从而减少脑血栓的发生率。细辛中所含成分β细辛醚可以降低血小板的活性，抑制血小板的聚集和黏附，所以细辛在用于治疗脑血栓时表现出一定的预防和治疗作用[12]。
细辛里面还有一些物质，比如β细辛醚，对患有高血脂的患者使用时，可以使其脑组织里面的各种化学物质降低，并提高脑的降钙素，让降钙素基因相关肽(CGRP)浓度变高，还能起到舒张血管和改善脑组织血液供应的作用[13]。
Keywords: Asarum; different parts; aristolochic acid; content determination 目 录
1 概述 1
1.1 细辛简介 1
1.2 细辛的化学成分研究 1
1.3 细辛的药理作用研究 1
1.3.1 解热、抗炎和抗变态反应 1
1.3.2 镇静及镇痛作用 1
1.3.3 强心及抗心肌缺血 2
1.3.4 调节血压作用 2
1.3.5 对血小板的作用 2
1.3.6 平喘及祛痰作用 3
1.3.7 抑菌及抗病毒作用 3
1.3.8 对肝脏的作用 4
1.3.9 其他 4
1.4 马兜铃酸概述 5
1.5 选题目的与意义 7
2 实验内容 8
2.1 实验材料收集与处理 8
2.2 实验仪器与试剂 8
2.2.1 实验仪器 8
2.2.2 实验试剂 9
2.3 实验方法 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: &351916072&
9
2.3.1 供试品溶液配制 9
2.3.2 对照品溶液配制 9
2.3.3 仪器设备工作条件 9
2.3.4 标准溶液与标准曲线绘制 10
2.3.5 供试品溶液马兜铃酸含量测定 10
2.3.6 方法学考察 10
3 实验结果 12
3.1 标准曲线绘制 12
3.2 方法学考察结果 12
3.2.1 精密度试验 12
3.2.2 稳定性试验 13
3.2.3 加样回收率试验 13
3.3 供试品马兜铃酸含量测定结果 14
结果与分析 16
参考文献 19
致 谢 21
1 概述
1.1 细辛简介
药材细辛(Asari Redix et Rhizoma)是马兜铃科植物的一种,选择入药部位为干燥后的根及根茎。细辛又名叶草、细草、小辛、单叶草,也可称为“金草”和“山参”。细辛在治疗疾病方面有着悠久的历史，是我国的传统珍贵药材[1]。
1.2 细辛的化学成分研究
细辛的主要成分有马兜铃酸、甲基丁香油酚和α蒎烯、β蒎烯、月桂烯、细辛醚、柠檬油精、黄樟醚、α水芹烯、3蒈烯以及伞花烃等，另外还有钾、钠、镁、钙、铁、锰、铜、锌等微量元素[2]。
1.3 细辛的药理作用研究
1.3.1 解热、抗炎和抗变态反应
谢伟和陆满文等通过研究后得出：细辛挥发油通过灌服可以使对温刺法、伤寒和副伤寒的混合疫苗所导致的发烧实验兔体温降低，还可以对蛋清、甲醛等所导致的大鼠关节肿胀进行消肿。对啤酒酵母所导致的实验鼠发烧有明显的退烧作用，还可以使正常实验鼠体温变低[3] 。速效变态反应的总过敏介质释放可通过细辛或醇提取物减少一半以上，这表明细辛具有抗过敏作用。细辛的抗变态反应及其抗炎反应的作用机理是：可以使肾上腺皮质功能增强，并可以阻止炎症介质释放、毛细血管的通透性增加及渗出、还可使结缔组织增生促成等，作用与促肾上腺皮质激素类似[45]。细辛挥发油具有明显的中枢抑制作用,小剂量可使动物安静、处于半昏迷状态,大剂量会直接导致动物昏迷,?表现出明显的抗惊厥作用[6]。
1.3.2 镇静及镇痛作用
細辛的提取物在实验鼠温浴法、实验鼠热板法、实验鼠甩尾法及实验鼠扭体法等一系列止痛实验里，会体现出很强的镇痛作用。和吗啡的止痛作用相比，细辛虽然起效时间比较慢，但是其优点是作用维持的时间长[7]。细辛在镇痛方面的作用机制可能是产生自由基，从而会抵制缓激肽等这些致痛化合物[8]。细辛炮制后，比如煎细辛，就可以让蟾蜍的坐骨神经停止传导，降低坐骨神经的疼痛感，表明细辛可以通过干扰神经的传递达到止痛效果。
1.3.3 强心及抗心肌缺血
对心脏有问题的实验狗，通过使用乙醇提取的细辛后，可改善症状并修复心脏问题。具体表现为：平均动脉压（MAP）的升高以及左心室内压（LVP）的升高以及心输出量加强，心跳和等容期心肌最大收缩速度加快等作用，表现出和多巴胺相像的作用强度。细辛也可以对急性心肌缺血产生作用：可以对患有心肌缺血的实验兔子产生作用，从而改善症状[9]。研究表明了用乙醇提取细辛后，作用于心脏时还会使心脏兴奋，加强心脏的收缩力，很明显的改善心脏功能[10]。熬制后的细辛水溶液会让体外培养乳鼠心跳变快，对心肌细胞的搏动幅度没有变化，这就说明了细辛对心肌细胞的作用主要就是使心跳加快，心率增加。
细辛在对抗冠心病时的作用机制：PNS左心室的开拓功能，钙可以让肌肉细胞膜泵活性心肌细胞内CAT过载和左心室心肌的能量变得更多，也会让PNS心肌细胞膜钙泵工程的活性使心肌细胞也变少很多[10]。PNS会让左室游离壁心肌变轻，这就表明了PNS对非特异性工程膜钙泵具有兴奋作用。宋莉娜等人研究了PNS和心脏病患者增加SOD活性下降，LPO溶化功能纤维含量等[11]。
1.3.4 调节血压作用
细辛在治疗血压类疾病时也有很好的作用疗效，可以直接对血压进行调节，并且调节效果可逆，可以降低血压，也可以把血压变高。实验说明其挥发油也可以作用于血管，可以将实验动物的内脏里面的血管，进行扩张。将细辛的醇溶液采用静脉注射，用量达到0.1250.25g/kg，就能让实验动物的血压很快的降下来，这就说明了它的作用与去甲肾上腺素一样。细辛中不同物质的作用各不相同，水溶性物质可以使血压增高，挥发油可以使血压降低[11]。
1.3.5 对血小板的作用
血小板活化可以直接导致脑血栓的形成，血小板对脑缺血的形成和发展起关键作用，血小板的活化在增强状态的时候会形成脑缺血，因此可以通过抑制血小板的活化从而减少脑血栓的发生率。细辛中所含成分β细辛醚可以降低血小板的活性，抑制血小板的聚集和黏附，所以细辛在用于治疗脑血栓时表现出一定的预防和治疗作用[12]。
细辛里面还有一些物质，比如β细辛醚，对患有高血脂的患者使用时，可以使其脑组织里面的各种化学物质降低，并提高脑的降钙素，让降钙素基因相关肽(CGRP)浓度变高，还能起到舒张血管和改善脑组织血液供应的作用[13]。
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