秦岭龙胆开花前后多糖的比较研究
摘 要本论文对秦岭龙胆药材中开花的龙胆药材与未开花的龙胆药材中多糖提取工艺进行了设计优化，使用的煎煮法利用四个影响因素实验结合响应曲面法（RSM）优龙胆药材中开花的龙胆药材与未开花的龙胆药材中多糖的提取工艺。在以单因素为基础，设计以提取时间，料液比，醇沉比，离心转速四个为考察因素，以秦岭龙胆多糖的提取率为信号因子，应用BOX-Behnken实验进行了四因素三水平设计，采用响应面法来优化龙胆药材中开花的龙胆药材与未开花的龙胆药材中多糖的提取工艺研究，以料液比、提取时间、醇沉比和离心转速四个影响因素得出龙胆多糖提取率。最终结果表明，在分析各个因素的显著性和交互作用后，得到秦岭龙胆药材中开花的龙胆药材与未开花的龙胆药材中多糖的最佳提取工艺在时间为3（h），料液比1:16（g/ml），醇沉比为1:10（ml/ml），离心转速为3250（r/min），未开花龙胆药材多糖的提取率为4.99%，开花龙胆药材多糖的提取率为5.42%。响应面法优化龙胆药材开花前后多糖的醇沉不仅降低了实验时间和材料，而且其稳定、简单、高效率的特点为今后龙胆多糖提取工艺的优化提供了参考。
目 录
1绪论 1
1.1研究的内容及意义 1
1.1.1论文选题的目的及意义 1
1.1.2秦岭龙胆药材简介 1
1.2秦岭龙胆的化学成分 2
1.2.1环烯醚萜类 2
1.2.2黄酮类 2
1.2.3三萜类 2
1.2.4有机酸类 2
1.2.5多糖 2
1.2.6生物碱 3
1.2.7其他 3
1.3龙胆属药物的药理活性及临床应用 3
1.3.1对肝脏的作用 3
1.3.2对免疫系统的作用 3
1.3.3对消化系统的作用 4
1.3.4其他药理作用与临床应用 4
1.4中药材龙胆中龙胆多糖的提取方法 4
1.4.1煎煮法 4
1.4.2超声波提取法 4
1.4.3微波提取法 4
1.4.4酶解法 5
1.4.5水提醇沉 5
2实验部分 6
2.1实验药材与 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072￥
试剂 6
2.1.1材料 6
2.1.2试剂 6
2.2实验仪器 6
2.3实验内容 6
2.3.1秦岭龙胆未开花药材和秦岭龙胆开花药材的处理 6
2.3.2秦岭龙胆未开花药材和秦岭龙胆开花药材多糖的提取 7
2.3.3标准曲线制备 7
2.3.4秦岭龙胆未开花药材和秦岭龙胆开花药材多糖得率计算 8
2.3.5各因素对秦岭龙胆未开花药材和秦岭龙胆开花药材多糖提取率单因素分析 8
2.3.6因素水平表 11
2.3.7响应曲面实验结果及分析 12
2.4小结 20
结 论 22
参考文献 23
致 谢 25
1绪论
1.1研究的内容及意义
1.1.1论文选题的目的及意义
随着科技、经济、医疗卫生等不断的提高，人们的疾病也在不断衍生，中医讲究治未病，然而治未病也需要天然药物作为辅助，所以人们对天然药物的研究也就加以重视。我国拥有丰富的中医药理论知识和悠久的历史资源，人们不断地从中药中研发新药来寻找先导化合物，天然药物也就成为当今我国乃至世界研究的重点和热点。
陕西秦岭为分割陕西南北的重要分界线，其植物种类繁多且分布广泛，所以在沿秦岭周边产生了特别多的中医药名人。古语有“秦地无闲草，遍地都是宝。”和“秦地无闲草，是菜也是药”。可以表明秦岭之中的草木类皆具有较高的药用价值和食用价值，从而造就了许多医家，药农的产生。龙胆为秦岭“七药”之一，其具有龙胆为我国由古至今最为常用中药，人们对龙胆的化学成分和药理作用研究也在不断深入，挖掘开发龙胆的潜在价值及医疗应用。
龙胆在无论是方药还是独立使用中都是常用中药,使用历史久远,龙胆草具有性味苦、寒的特性,无毒,归肝、胆、膀胱经
其具有清热燥湿、泻肝胆火等功效。经研究得到其具有保肝护胆、增强脾胃消化、治疗心脑血管疾病以及抗肿瘤、抗抑郁、保护神经系统等作用[12]。
多糖是动植物的细胞膜和高等植物中的天然化合物，多糖是生命体的重要组成部分，参与着生命中的多种生理活动。龙胆多糖具有抗炎、抗病毒、抗衰老、降血脂等多种生物活性[3]。为了经济、更高效等多方面因素考虑能够更好地提高龙胆多糖的提取率，本次实验采用单因素结合BoxBehnken实验法对秦岭龙胆开花前后多糖采用煎煮法对水提醇沉工艺进行了优化，分析在四个影响因素对提取率的影响，进行参数综合分析得到最佳工艺，提高其生产效率。
1.1.2秦岭龙胆药材简介
杨明利在秦岭龙胆化学成分研究Ⅲ中对秦岭龙胆进行了系统研究[4]。龙胆科植物分布广泛，约有80个属,1000多种。我国龙胆科植物作为药用植物有12个属70多种的。民间以条叶龙胆、龙胆为常用的中药[5]，中国药典77版至15版都有收录,它们有相同治疗功效,用于治疗肝脏,胆囊,关节等疾病,龙胆药材也是探寻抗炎、镇痛等方面的重要研究对象。龙胆属植物秦岭龙胆（Gentiana apiata N.E.Br）属为陕西特有种属[6]。
1.2秦岭龙胆的化学成分
秦岭龙胆为秦岭山脉的特有药材，也归属于龙胆科属，它的化学成分与龙胆属龙胆药材化学成分相近，迄今为止对秦岭龙胆的有机成分研究不为常见。许海燕在秦岭龙胆化学成分的研究进展中表明其含有主要成分糖及其苷类、酚性成分、生物碱等成分[7]。
1.2.1环烯醚萜类
环烯醚萜类是数龙胆属植物中含有，根据化学结构可以划分为裂环烯醚萜类和聚合环烯醚萜类等。将裂环烯醚萜类进行细分又可以分为龙胆苦苷类和獐牙菜苷类等[8]
在中药龙胆药理学研究文献中得到龙胆苦苷、当药苦苷和苦当药酯苷等[9] 。
1.2.2黄酮类
黄酮类化合物具有良好的抗氧化性，龙胆属植物中大多都含有黄酮类化合物,近年来,中药龙胆中黄酮类化合物的研究报道也在不断地出现。
中药材龙胆草提取物中含有芦丁、槲皮素、木犀草素、山奈酚、异鼠李素[10]等黄酮类化学成分。黄铜类化合物是一类天然产物，经研究发现，表明黄酮类化合物具着抗菌等药理作用。
目 录
1绪论 1
1.1研究的内容及意义 1
1.1.1论文选题的目的及意义 1
1.1.2秦岭龙胆药材简介 1
1.2秦岭龙胆的化学成分 2
1.2.1环烯醚萜类 2
1.2.2黄酮类 2
1.2.3三萜类 2
1.2.4有机酸类 2
1.2.5多糖 2
1.2.6生物碱 3
1.2.7其他 3
1.3龙胆属药物的药理活性及临床应用 3
1.3.1对肝脏的作用 3
1.3.2对免疫系统的作用 3
1.3.3对消化系统的作用 4
1.3.4其他药理作用与临床应用 4
1.4中药材龙胆中龙胆多糖的提取方法 4
1.4.1煎煮法 4
1.4.2超声波提取法 4
1.4.3微波提取法 4
1.4.4酶解法 5
1.4.5水提醇沉 5
2实验部分 6
2.1实验药材与 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072￥
试剂 6
2.1.1材料 6
2.1.2试剂 6
2.2实验仪器 6
2.3实验内容 6
2.3.1秦岭龙胆未开花药材和秦岭龙胆开花药材的处理 6
2.3.2秦岭龙胆未开花药材和秦岭龙胆开花药材多糖的提取 7
2.3.3标准曲线制备 7
2.3.4秦岭龙胆未开花药材和秦岭龙胆开花药材多糖得率计算 8
2.3.5各因素对秦岭龙胆未开花药材和秦岭龙胆开花药材多糖提取率单因素分析 8
2.3.6因素水平表 11
2.3.7响应曲面实验结果及分析 12
2.4小结 20
结 论 22
参考文献 23
致 谢 25
1绪论
1.1研究的内容及意义
1.1.1论文选题的目的及意义
随着科技、经济、医疗卫生等不断的提高，人们的疾病也在不断衍生，中医讲究治未病，然而治未病也需要天然药物作为辅助，所以人们对天然药物的研究也就加以重视。我国拥有丰富的中医药理论知识和悠久的历史资源，人们不断地从中药中研发新药来寻找先导化合物，天然药物也就成为当今我国乃至世界研究的重点和热点。
陕西秦岭为分割陕西南北的重要分界线，其植物种类繁多且分布广泛，所以在沿秦岭周边产生了特别多的中医药名人。古语有“秦地无闲草，遍地都是宝。”和“秦地无闲草，是菜也是药”。可以表明秦岭之中的草木类皆具有较高的药用价值和食用价值，从而造就了许多医家，药农的产生。龙胆为秦岭“七药”之一，其具有龙胆为我国由古至今最为常用中药，人们对龙胆的化学成分和药理作用研究也在不断深入，挖掘开发龙胆的潜在价值及医疗应用。
龙胆在无论是方药还是独立使用中都是常用中药,使用历史久远,龙胆草具有性味苦、寒的特性,无毒,归肝、胆、膀胱经
其具有清热燥湿、泻肝胆火等功效。经研究得到其具有保肝护胆、增强脾胃消化、治疗心脑血管疾病以及抗肿瘤、抗抑郁、保护神经系统等作用[12]。
多糖是动植物的细胞膜和高等植物中的天然化合物，多糖是生命体的重要组成部分，参与着生命中的多种生理活动。龙胆多糖具有抗炎、抗病毒、抗衰老、降血脂等多种生物活性[3]。为了经济、更高效等多方面因素考虑能够更好地提高龙胆多糖的提取率，本次实验采用单因素结合BoxBehnken实验法对秦岭龙胆开花前后多糖采用煎煮法对水提醇沉工艺进行了优化，分析在四个影响因素对提取率的影响，进行参数综合分析得到最佳工艺，提高其生产效率。
1.1.2秦岭龙胆药材简介
杨明利在秦岭龙胆化学成分研究Ⅲ中对秦岭龙胆进行了系统研究[4]。龙胆科植物分布广泛，约有80个属,1000多种。我国龙胆科植物作为药用植物有12个属70多种的。民间以条叶龙胆、龙胆为常用的中药[5]，中国药典77版至15版都有收录,它们有相同治疗功效,用于治疗肝脏,胆囊,关节等疾病,龙胆药材也是探寻抗炎、镇痛等方面的重要研究对象。龙胆属植物秦岭龙胆（Gentiana apiata N.E.Br）属为陕西特有种属[6]。
1.2秦岭龙胆的化学成分
秦岭龙胆为秦岭山脉的特有药材，也归属于龙胆科属，它的化学成分与龙胆属龙胆药材化学成分相近，迄今为止对秦岭龙胆的有机成分研究不为常见。许海燕在秦岭龙胆化学成分的研究进展中表明其含有主要成分糖及其苷类、酚性成分、生物碱等成分[7]。
1.2.1环烯醚萜类
环烯醚萜类是数龙胆属植物中含有，根据化学结构可以划分为裂环烯醚萜类和聚合环烯醚萜类等。将裂环烯醚萜类进行细分又可以分为龙胆苦苷类和獐牙菜苷类等[8]
在中药龙胆药理学研究文献中得到龙胆苦苷、当药苦苷和苦当药酯苷等[9] 。
1.2.2黄酮类
黄酮类化合物具有良好的抗氧化性，龙胆属植物中大多都含有黄酮类化合物,近年来,中药龙胆中黄酮类化合物的研究报道也在不断地出现。
中药材龙胆草提取物中含有芦丁、槲皮素、木犀草素、山奈酚、异鼠李素[10]等黄酮类化学成分。黄铜类化合物是一类天然产物，经研究发现，表明黄酮类化合物具着抗菌等药理作用。
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