tms5相互作用蛋白的酵母双杂交筛选
植物对外界温度的变化十分敏感，受到多种调控网络的调控，但其响应温度变化的机制目前还不清楚。株1S是一类温度敏感型两用核不育水稻，育性临界温度在22-23?C，23?C 以上表现为雄性不育。实验室前期研究定位到的基因与已报到的tms5位点重合，TMS5编码一个短版本的RNase Z同源蛋白，命名为RNase ZS1，测序发现株1S的RNase ZS1第71位碱基发生C到A的突变，导致蛋白翻译提前终止。RNase ZS1通过对UbL40的切割调控细胞质中UbL40 mRNA积累，过量的UbL40 可能导致水稻花粉不育，进一步暗示UbL40家族成员对水稻育性有重要调控作用。然而RNase Z S1调控水稻育性的温敏机理还不是很清楚。本研究采用酵母双杂交技术，筛选与RNase Z S1蛋白相互作用的蛋白，试图从与其相互作用的蛋白入手，阐明RNase Z S1蛋白的生物学功能。
目录
摘要 3
关键词 3
Abstract 3
Key words 3
引言 3
1 材料与方法 5
1.1 实验材料 5
1.1.1 载体及菌株 5
1.1.2 试剂及试剂盒 5
1.2 仪器 7
1.3 实验方法 8
1.3.1 TMS5pGBKT7载体构建 8
1.3.2 TMS5pGBKT7自激活检测 9
1.3.3 水稻cDNA文库构建 11
1.3.4 cDNA文库筛选 13
2 结果与分析 13
2.1 TMS5pGBKT7载体构建结果 13
2.2 水稻cDNA文库构建 14
2.3 TMS5蛋白各项检测 15
2.4 TMS5相互作用蛋白文库筛选结果 16
3 讨论 18
3.1 酵母双杂交阳性克隆检测分析 18
3.2 TMS5控制株1S温敏核不育的机理研究 18
致谢 18
参考文献 19
TMS5相互作用蛋白的酵母双杂交筛选
金善宝实验班（植物生产类）学生 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
李吉
目录
摘要 3
关键词 3
Abstract 3
Key words 3
引言 3
1 材料与方法 5
1.1 实验材料 5
1.1.1 载体及菌株 5
1.1.2 试剂及试剂盒 5
1.2 仪器 7
1.3 实验方法 8
1.3.1 TMS5pGBKT7载体构建 8
1.3.2 TMS5pGBKT7自激活检测 9
1.3.3 水稻cDNA文库构建 11
1.3.4 cDNA文库筛选 13
2 结果与分析 13
2.1 TMS5pGBKT7载体构建结果 13
2.2 水稻cDNA文库构建 14
2.3 TMS5蛋白各项检测 15
2.4 TMS5相互作用蛋白文库筛选结果 16
3 讨论 18
3.1 酵母双杂交阳性克隆检测分析 18
3.2 TMS5控制株1S温敏核不育的机理研究 18
致谢 18
参考文献 19
TMS5相互作用蛋白的酵母双杂交筛选
金善宝实验班（植物生产类）学生 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
李吉
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