osglo1在水稻抗稻瘟病侵染中的作用的研究
本研究利用蛋白组学分析筛选出了在水稻被稻瘟菌侵染前后表达有显著差异的蛋白,其中OsGLO1引起了我们的兴趣。在光呼吸过程中,乙醇酸氧化酶(GLO)可以调控H2O2的生成。过去常认为这与非生物胁迫,如干旱和盐碱有关。本研究发现,OsGLO1在抵御生物胁迫过程中也起到了重要作用。当与水稻亲和互作的稻瘟菌(M. oryzae) Guy11侵染寄主时,OsGLO1的表达受到了抑制;但是与水稻非亲和互作的稻瘟菌(M. oryzae)2539侵染寄主时,OsGLO1的表达水平几乎不变。此外,OsGLO1的表达与H2O2的积累以及一些与抗病相关的报告基因(OsPBZ1,OsPAD4,OsAOS2)的表达水平呈正相关。以上的结果表明,OsGLO1在生物胁迫以及非生物胁迫中均起到了关键作用。
目录
摘要 3
关键词 3
Abstract 3
Key words 3
引言 3
1. 材料与方法 5
1.1 OsGLO1过表达载体构建 5
1.1.1 OsGLO1基因片段获得 5
1.1.2 过表达载体构建 5
1.1.3 沉默载体构建 6
1.2 水稻原生质体的提取及转化 7
1.3 稻瘟菌激发子的提取 8
1.4水稻原生质体活性氧含量测定 8
1.5 水稻原生质体转化后RNA的提取及反转录 9
1.5.1 水稻原生质体转化后RNA的提取 9
1.5.2 反转录 9
1.6 水稻抗病相关基因的定量检测 9
2. 结果与分析 9
2.1 水稻原生质体及稻瘟菌激发子互作系统简介及研究条件优化 9
2.2 OsGLO1过表达及沉默载体的验证 10
2.3 OsGLO1过表达及沉默后活性氧积累量检测 11
2.4 OsGLO1过表达及沉默后水稻抗病相关基因表达量检测 12
3.讨论 14
致谢 16
参考文献 17
附录 18
OsGLO1在水稻抗稻瘟病侵染中的作用的研究
目录
摘要 3
关键词 3
Abstract 3
Key words 3
引言 3
1. 材料与方法 5
1.1 OsGLO1过表达载体构建 5
1.1.1 OsGLO1基因片段获得 5
1.1.2 过表达载体构建 5
1.1.3 沉默载体构建 6
1.2 水稻原生质体的提取及转化 7
1.3 稻瘟菌激发子的提取 8
1.4水稻原生质体活性氧含量测定 8
1.5 水稻原生质体转化后RNA的提取及反转录 9
1.5.1 水稻原生质体转化后RNA的提取 9
1.5.2 反转录 9
1.6 水稻抗病相关基因的定量检测 9
2. 结果与分析 9
2.1 水稻原生质体及稻瘟菌激发子互作系统简介及研究条件优化 9
2.2 OsGLO1过表达及沉默载体的验证 10
2.3 OsGLO1过表达及沉默后活性氧积累量检测 11
2.4 OsGLO1过表达及沉默后水稻抗病相关基因表达量检测 12
3.讨论 14
致谢 16
参考文献 17
附录 18
OsGLO1在水稻抗稻瘟病侵染中的作用的研究
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