贯叶连翘花中挥发油的提取及成分分析(附件)
摘 要本文以传统中药贯叶连翘花为研究对象，采用水蒸气蒸馏法对其中挥发油进行提取研究，在单因素的试验方法基础上，采用响应曲面法对影响提取率的因素进行评价，通过对各工艺参数与响应值之间的关系研究，优选出最佳提取工艺条件为浸泡时间21h，提取时间11h，液固比5ml/g。经气相色谱-质谱联用技术对贯叶连翘花中挥发油化学成分进行分析，共测定了20种物质，为进一步研究开发贯叶连翘资源提供参考。 目 录
1 前言
1.1 贯叶连翘研究现状 1
1.2 贯叶连翘化学成分研究 1
1.2.1 苯并二蒽酮化合物( Naphthodianthrones) 1
1.2.2 间苯三酚化合物( Phloro glucinols) 1
1.2.3 黄酮类化合物( Flavonoids) 1
1.2.4 挥发油 2
1.2.5 其他成分 2
1.3 主要生物活性成分的药理作用 2
1.3.1 抗抑郁作用 2
1.3.2 抗病毒作用 3
1.3.3 对鼠巨噬细胞病毒的作用 3
1.3.4 抗肿瘤、抗癌症作用 3
1.3.5 促进学习记忆 4
1.3.6 抗菌作用 4
1.4 前景与展望 4
1.4.1 贯叶连翘抗老化和抗肿瘤机制明确 4
1.4.2 探讨贯叶连翘有效成分和治疗偏头痛的机制 5
1.4.3 加强贯叶连翘与其它药物联用副作用 5
1.4.4 改变药物剂型来提高疗效减少副作用 5
1.4.5 结合中医理论发掘验方经方进行研究 5
1.5 挥发油的研究进展 5
1.6 挥发油的提取方法 6
1.7 挥发油的药理作用 6
1.8本课题的研究意 6
2 实验部分
2.1 材料与试剂 7
2.2 实验方法 7
2.2.1 提取方法 7
2.2.2 单因素实验 7
2.2.3 响应曲面实验设计 7
2.2.4 GC/MS分析 8
2.3实验
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
提取方法 6
1.7 挥发油的药理作用 6
1.8本课题的研究意 6
2 实验部分
2.1 材料与试剂 7
2.2 实验方法 7
2.2.1 提取方法 7
2.2.2 单因素实验 7
2.2.3 响应曲面实验设计 7
2.2.4 GC/MS分析 8
2.3实验结果与分析 8
2.3.1 单因素实验结果 8
2.3.2 响应曲面实验结果 10
2.3.3 回归模型方程的建立及其显著性检验 11
2.3.4 因素水平的优化 12
2.3.5 验证实验 14
2.3.6 GC/MS 结果 14
结 论 16
参考文献 17
致 谢 20
1 前言
1.1 贯叶连翘研究现状
贯叶连翘又称贯叶金丝，为藤黄科金丝桃属多年生草本植物，是世界上分布最广的天然植物，药用历史达两千年之久，富含多种活性物质，具有清热利湿、疏肝解郁、抑菌止血等功效[1,2]。传统中医药学研究认为，贯叶连翘性平，味辛苦涩，具有清心明目、抗炎、利湿等功效[3,4]，在欧洲等国家主要用于治疗抑郁症、肝炎、疼痛、抑制神经胶质瘤等效果[5]。
据报道，贯叶连翘的研究主要集中在金丝桃素、伪金丝桃素、黄酮类等，关于其挥发油的研究，均建立在对其化学成分初步认证上[6]。目前已有关于贯叶连翘全草和地上部分挥发油的化学成分和药理作用研究，且不同方法和不同药源挥发油的提取效率、化学组成、含量和药效等有所差异[7]。贯叶连翘花中含有丰富的挥发油，关于其花中挥发油的提取工艺及成分分析还未见报道过。
1.2 贯叶连翘化学成分研究
贯叶连翘的活效成分主要包含以下几种。
1.2.1 苯并二蒽酮化合物( Naphthodianthrones)
苯并二蒽酮化合物包含金丝桃素( Hyperein) 、伪金丝桃素( Pseudohyp
Ericin)、异金丝桃素( Isohypericin)、原金丝桃素( Protohypericin)、原伪 金 丝 桃 素( Protopseudohypreicin )、环伪金丝桃 ( Cyclopseudohypericin)、大黄素蒽酮( Emodin anthrone)等。其主要包含成份以金丝桃素、伪金丝桃素为主。
1.2.2 间苯三酚化合物( Phloro glucinols)
间苯三酚化合物的主要成分以贯叶金丝桃素 ( Hyperforin)、加贯叶金丝桃素( Adhyperforin) 为主。贯叶金丝桃素含量占比约为2.0%～4.5%，加贯叶金丝桃素含量占比约为0.2 %～1.9%。
1.2.3 黄酮类化合物( Flavonoids)
黄酮类化合物已鉴定成分包含有: 斛皮素( Quecetin)、木樨草素( Luteo!lin)、山奈黄素( Kampferol)、杨梅树皮素( Myricetin)、金丝桃苷( Hyperin)、斛皮苷( Quecitrin) 、异斛皮素( Isoquercitrin)、芦丁( Rutin)、穗花杉双黄酮( Amentoflavone)、白矢车菊苷元( Leucocyanidian) 等成分。贯叶连翘中所含黄酮所占比例较多，全草达9.25%左右，其中鉴定的有槲皮素(Quercetin)、芦丁(Rutin)等，分别具有抗炎、止泻抗病毒收敛止血、等的治疗效果。
1.2.4 挥发油
挥发油在金丝桃科属植物中含量一般为约0.06 %～0.35 %左右，主要结构分为单萜和倍半萜， 例如: α 蒎烯、β 蒎烯、月桂烯、丁香烯等, 均具抗真菌作用。曾经王小芳等人采用水蒸气蒸馏法并提取出中草药贯叶连翘( 全草) 挥发油[8]。并且通过GCMS技术测定挥发油的化学成分，从中鉴定出75种化合物，其中酚类物质：百里香酚、桉油精、丁香油酚等为首次检出。
1.2.5 其他成分
1 前言
1.1 贯叶连翘研究现状 1
1.2 贯叶连翘化学成分研究 1
1.2.1 苯并二蒽酮化合物( Naphthodianthrones) 1
1.2.2 间苯三酚化合物( Phloro glucinols) 1
1.2.3 黄酮类化合物( Flavonoids) 1
1.2.4 挥发油 2
1.2.5 其他成分 2
1.3 主要生物活性成分的药理作用 2
1.3.1 抗抑郁作用 2
1.3.2 抗病毒作用 3
1.3.3 对鼠巨噬细胞病毒的作用 3
1.3.4 抗肿瘤、抗癌症作用 3
1.3.5 促进学习记忆 4
1.3.6 抗菌作用 4
1.4 前景与展望 4
1.4.1 贯叶连翘抗老化和抗肿瘤机制明确 4
1.4.2 探讨贯叶连翘有效成分和治疗偏头痛的机制 5
1.4.3 加强贯叶连翘与其它药物联用副作用 5
1.4.4 改变药物剂型来提高疗效减少副作用 5
1.4.5 结合中医理论发掘验方经方进行研究 5
1.5 挥发油的研究进展 5
1.6 挥发油的提取方法 6
1.7 挥发油的药理作用 6
1.8本课题的研究意 6
2 实验部分
2.1 材料与试剂 7
2.2 实验方法 7
2.2.1 提取方法 7
2.2.2 单因素实验 7
2.2.3 响应曲面实验设计 7
2.2.4 GC/MS分析 8
2.3实验
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
提取方法 6
1.7 挥发油的药理作用 6
1.8本课题的研究意 6
2 实验部分
2.1 材料与试剂 7
2.2 实验方法 7
2.2.1 提取方法 7
2.2.2 单因素实验 7
2.2.3 响应曲面实验设计 7
2.2.4 GC/MS分析 8
2.3实验结果与分析 8
2.3.1 单因素实验结果 8
2.3.2 响应曲面实验结果 10
2.3.3 回归模型方程的建立及其显著性检验 11
2.3.4 因素水平的优化 12
2.3.5 验证实验 14
2.3.6 GC/MS 结果 14
结 论 16
参考文献 17
致 谢 20
1 前言
1.1 贯叶连翘研究现状
贯叶连翘又称贯叶金丝，为藤黄科金丝桃属多年生草本植物，是世界上分布最广的天然植物，药用历史达两千年之久，富含多种活性物质，具有清热利湿、疏肝解郁、抑菌止血等功效[1,2]。传统中医药学研究认为，贯叶连翘性平，味辛苦涩，具有清心明目、抗炎、利湿等功效[3,4]，在欧洲等国家主要用于治疗抑郁症、肝炎、疼痛、抑制神经胶质瘤等效果[5]。
据报道，贯叶连翘的研究主要集中在金丝桃素、伪金丝桃素、黄酮类等，关于其挥发油的研究，均建立在对其化学成分初步认证上[6]。目前已有关于贯叶连翘全草和地上部分挥发油的化学成分和药理作用研究，且不同方法和不同药源挥发油的提取效率、化学组成、含量和药效等有所差异[7]。贯叶连翘花中含有丰富的挥发油，关于其花中挥发油的提取工艺及成分分析还未见报道过。
1.2 贯叶连翘化学成分研究
贯叶连翘的活效成分主要包含以下几种。
1.2.1 苯并二蒽酮化合物( Naphthodianthrones)
苯并二蒽酮化合物包含金丝桃素( Hyperein) 、伪金丝桃素( Pseudohyp
Ericin)、异金丝桃素( Isohypericin)、原金丝桃素( Protohypericin)、原伪 金 丝 桃 素( Protopseudohypreicin )、环伪金丝桃 ( Cyclopseudohypericin)、大黄素蒽酮( Emodin anthrone)等。其主要包含成份以金丝桃素、伪金丝桃素为主。
1.2.2 间苯三酚化合物( Phloro glucinols)
间苯三酚化合物的主要成分以贯叶金丝桃素 ( Hyperforin)、加贯叶金丝桃素( Adhyperforin) 为主。贯叶金丝桃素含量占比约为2.0%～4.5%，加贯叶金丝桃素含量占比约为0.2 %～1.9%。
1.2.3 黄酮类化合物( Flavonoids)
黄酮类化合物已鉴定成分包含有: 斛皮素( Quecetin)、木樨草素( Luteo!lin)、山奈黄素( Kampferol)、杨梅树皮素( Myricetin)、金丝桃苷( Hyperin)、斛皮苷( Quecitrin) 、异斛皮素( Isoquercitrin)、芦丁( Rutin)、穗花杉双黄酮( Amentoflavone)、白矢车菊苷元( Leucocyanidian) 等成分。贯叶连翘中所含黄酮所占比例较多，全草达9.25%左右，其中鉴定的有槲皮素(Quercetin)、芦丁(Rutin)等，分别具有抗炎、止泻抗病毒收敛止血、等的治疗效果。
1.2.4 挥发油
挥发油在金丝桃科属植物中含量一般为约0.06 %～0.35 %左右，主要结构分为单萜和倍半萜， 例如: α 蒎烯、β 蒎烯、月桂烯、丁香烯等, 均具抗真菌作用。曾经王小芳等人采用水蒸气蒸馏法并提取出中草药贯叶连翘( 全草) 挥发油[8]。并且通过GCMS技术测定挥发油的化学成分，从中鉴定出75种化合物，其中酚类物质：百里香酚、桉油精、丁香油酚等为首次检出。
1.2.5 其他成分
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