贯叶连翘乙酸乙酯提取部位的抗氧化活性研究(附件)
摘 要本文以传统中药贯叶连翘资源为研究对象，对乙酸乙酯提取部位-多酚类物质进行提取和抗氧化活性研究：采用微波辅助提取法对贯叶连翘中总多酚进行提取，在单因素的基础上结合正交实验对影响总多酚提取率的因素进行考察，获取最优的提取条件为：乙醇浓度70%，料液比1:8，微波时间15min，微波功率210W。抗氧化活性实验结果显示，贯叶连翘乙酸乙酯提取部位对DPPH自由基及超氧阴离子自由基有明显的清除能力，表明乙酸乙酯提取部位具有一定的抗氧化活性，该研究为开发贯叶连翘资源提供理论参考。 目 录
1 绪论
1.1 贯叶连翘简介 1
1.2 贯叶连翘的研究现状 1
1.3 贯叶连翘的化学成分 1
1.3.1 黄酮化合物 2
1.3.2 苯并二蒽酮类化合物 2
1.3.3 间二苯酚类化合物 2
1.4 贯叶连翘的药理作用 2
1.4.1 抗肿瘤作用 3
1.4.2 抗病毒作用 3
1.4.3 抗抑郁作用 3
1.4.4 抗氧化作用 4
1.5 自由基及抗氧化作用研究进展 4
1.6课题研究意义 4
2 贯叶连翘乙酸乙酯提取部位总多酚的工艺研究
2.1 仪器与材料 6
2.2.1 实验仪器 6
2.2.2 实验材料 6
2.2 实验方法 6
2.2.1提取工艺 6
2.2.2标准曲线的绘制 6
2.2.3总多酚提取率的测定 7
2.3单因素试验 7
2.3.1 乙醇浓度 7
2.3.2 料液比 7
2.3.3 微波时间 7
2.3.4 微波功率 8
2.4 正交实验设计 8
2.5 结果分析 8
2.5.1 乙醇浓度 8
2.5.2 料液比 9
2.5.3 微波时间 9
2.5.4 微波功率 10
2.5.5 正交实验结果 10
2.6 验证实验结果 11
2.7 小结 12
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
/> 2.3.4 微波功率 8
2.4 正交实验设计 8
2.5 结果分析 8
2.5.1 乙醇浓度 8
2.5.2 料液比 9
2.5.3 微波时间 9
2.5.4 微波功率 10
2.5.5 正交实验结果 10
2.6 验证实验结果 11
2.7 小结 12
3 贯叶连翘乙酸乙酯提取部位的抗氧化实验
3.1 实验材料 13
3.1.1 实验试剂 13
3.1.2 实验器材 13
3.2 实验方法 13
3.2.1 清除DPPH自由基能力 13
3.2.2 清除超氧阴离子自由基能力 14
结论 16
参考文献.......................................................................................................................17
致谢 19
1 绪论
1.1 贯叶连翘简介
贯叶连翘( Hypericum perforatum L)又称作欢心草、小旱莲、小对叶草、女儿茶、叶金丝桃，欧洲名为St.johnswort，圣约翰草。属于藤黄科金丝桃属多年生的草本植物，在我国的河北、四川、陕西、山东、江苏等地分布较广[1]。常以植物入药的部位是全草，贯叶连翘味苦、辛、性平，用于清热解毒, 止血生肌、利湿。在欧洲等其他国家用于治疗抑郁症、甲型和乙型肝炎及爱滋病等，近年来也有研究发现，其对恶性神经胶质瘤有抑制作用[2]。贯叶连翘中的金丝桃素、金丝桃苷、总黄酮、贯叶金丝桃素、挥发性成分等都具有较强的生物活性，各化学成分之间相互协调作用，使得贯叶连翘的运用越来越广泛。但目前关于贯叶连翘的成分研究主要集中在黄酮和多糖方面，有关多酚的研究报道不多。
植物多酚具有较强的清除自由基的能力和抗氧化性。现代药理研究发现，植物多酚具有良好的抑菌、抗癌、抗氧化等生物活性[34]。王金梅等人在连翘花中检测出两种多酚类物质，这两种物质均具有较强的抗氧化活性。本实验对贯叶连翘乙酸乙酯提取部位的总多酚提取率为指标，研究其抗氧化活性。
1.2 贯叶连翘的研究现状
贯叶连翘是一种传统草药，具有特别的药用价值和很长的药用历史。近年来，贯叶连翘的研究主要集中于贯叶连翘提取物在药理作用的方面和化学成分的分析方面。有研究发现[5]，对果蝇的寿命进行实验分析，贯叶连翘的提取物当中的一种化合物对果蝇平均寿命有明显的延长。在对小鼠进行体外的抗氧化实验发现，小鼠体内抗氧化能力也显著增强，小鼠的脂质过氧化水平也有一定的下降。其贯叶连翘抗衰老的活性成分和作用机制还需要进一步研究。贯叶连翘有很多提取物，这些提取物中有很多有效成分，它们具有很多药理作用，其成为当前科学工作者研究与开发的潮流，主要是由于它在抑郁症、爱滋病等难以克服的医学疾病方面具有广泛的用途。我国的贯叶连翘资源十分丰富, 但研究和利用尚在起步阶段[6]。
因此,本文就贯叶连翘乙酸乙酯提取部位进行抗氧化活性研究。为贯叶连翘的进一步研究和开发提供理论基础。
1.3 贯叶连翘的化学成分
贯叶连翘的化学成分有多种黄酮类(Flavonoids)化合物如芦丁、槲皮素和金丝桃苷；苯并二蒽酮类化合物金丝桃素(hypericin)和伪金丝桃素(pesudohy pericin)；间二苯酚类化合物如加贯叶金丝桃(adhuperforin)、贯叶金丝桃( hyperforin) 、鞣质(tannin)、原花青素(proanthocyanidin)等成分[7]。贯叶连翘的不同化学成分具有其不同的药理作用、药用价值和生物活性。
1.3.1 黄酮化合物
黄酮化合物的主要成分有芦丁、金丝桃苷、槲皮苷、芸香苷、槲皮素等。其中的槲皮素会对多种导致癌细胞产生或者是促进癌细胞生长的化学制剂产生拮抗作用[7]，还可以抑制多种恶性肿瘤细胞的生长和转移[9]，贯叶连翘中贯叶金丝桃素和黄酮类物质在抗肿瘤中互相协调、疗效佳，它在体内毒素较低、天然资源含量丰富，这让贯叶连翘有望开发成一种新型的抗肿瘤药物[10]。
1.3.2 苯并二蒽酮类化合物
二蒽酮化合物中，含有金丝桃素和贯叶金丝桃素，它们在疾病预防与控制方面有着显著的临床药理作用。目前的研究认为贯叶连翘中的金丝桃素和贯叶金丝桃素是抗抑郁的关键成分[11]，实验表明它可以通过抑制单胺氧化酶的摄取来发挥抗抑郁作用，并且还可以通过抑制单胺类神经递质的摄取来发挥抗
1 绪论
1.1 贯叶连翘简介 1
1.2 贯叶连翘的研究现状 1
1.3 贯叶连翘的化学成分 1
1.3.1 黄酮化合物 2
1.3.2 苯并二蒽酮类化合物 2
1.3.3 间二苯酚类化合物 2
1.4 贯叶连翘的药理作用 2
1.4.1 抗肿瘤作用 3
1.4.2 抗病毒作用 3
1.4.3 抗抑郁作用 3
1.4.4 抗氧化作用 4
1.5 自由基及抗氧化作用研究进展 4
1.6课题研究意义 4
2 贯叶连翘乙酸乙酯提取部位总多酚的工艺研究
2.1 仪器与材料 6
2.2.1 实验仪器 6
2.2.2 实验材料 6
2.2 实验方法 6
2.2.1提取工艺 6
2.2.2标准曲线的绘制 6
2.2.3总多酚提取率的测定 7
2.3单因素试验 7
2.3.1 乙醇浓度 7
2.3.2 料液比 7
2.3.3 微波时间 7
2.3.4 微波功率 8
2.4 正交实验设计 8
2.5 结果分析 8
2.5.1 乙醇浓度 8
2.5.2 料液比 9
2.5.3 微波时间 9
2.5.4 微波功率 10
2.5.5 正交实验结果 10
2.6 验证实验结果 11
2.7 小结 12
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
/> 2.3.4 微波功率 8
2.4 正交实验设计 8
2.5 结果分析 8
2.5.1 乙醇浓度 8
2.5.2 料液比 9
2.5.3 微波时间 9
2.5.4 微波功率 10
2.5.5 正交实验结果 10
2.6 验证实验结果 11
2.7 小结 12
3 贯叶连翘乙酸乙酯提取部位的抗氧化实验
3.1 实验材料 13
3.1.1 实验试剂 13
3.1.2 实验器材 13
3.2 实验方法 13
3.2.1 清除DPPH自由基能力 13
3.2.2 清除超氧阴离子自由基能力 14
结论 16
参考文献.......................................................................................................................17
致谢 19
1 绪论
1.1 贯叶连翘简介
贯叶连翘( Hypericum perforatum L)又称作欢心草、小旱莲、小对叶草、女儿茶、叶金丝桃，欧洲名为St.johnswort，圣约翰草。属于藤黄科金丝桃属多年生的草本植物，在我国的河北、四川、陕西、山东、江苏等地分布较广[1]。常以植物入药的部位是全草，贯叶连翘味苦、辛、性平，用于清热解毒, 止血生肌、利湿。在欧洲等其他国家用于治疗抑郁症、甲型和乙型肝炎及爱滋病等，近年来也有研究发现，其对恶性神经胶质瘤有抑制作用[2]。贯叶连翘中的金丝桃素、金丝桃苷、总黄酮、贯叶金丝桃素、挥发性成分等都具有较强的生物活性，各化学成分之间相互协调作用，使得贯叶连翘的运用越来越广泛。但目前关于贯叶连翘的成分研究主要集中在黄酮和多糖方面，有关多酚的研究报道不多。
植物多酚具有较强的清除自由基的能力和抗氧化性。现代药理研究发现，植物多酚具有良好的抑菌、抗癌、抗氧化等生物活性[34]。王金梅等人在连翘花中检测出两种多酚类物质，这两种物质均具有较强的抗氧化活性。本实验对贯叶连翘乙酸乙酯提取部位的总多酚提取率为指标，研究其抗氧化活性。
1.2 贯叶连翘的研究现状
贯叶连翘是一种传统草药，具有特别的药用价值和很长的药用历史。近年来，贯叶连翘的研究主要集中于贯叶连翘提取物在药理作用的方面和化学成分的分析方面。有研究发现[5]，对果蝇的寿命进行实验分析，贯叶连翘的提取物当中的一种化合物对果蝇平均寿命有明显的延长。在对小鼠进行体外的抗氧化实验发现，小鼠体内抗氧化能力也显著增强，小鼠的脂质过氧化水平也有一定的下降。其贯叶连翘抗衰老的活性成分和作用机制还需要进一步研究。贯叶连翘有很多提取物，这些提取物中有很多有效成分，它们具有很多药理作用，其成为当前科学工作者研究与开发的潮流，主要是由于它在抑郁症、爱滋病等难以克服的医学疾病方面具有广泛的用途。我国的贯叶连翘资源十分丰富, 但研究和利用尚在起步阶段[6]。
因此,本文就贯叶连翘乙酸乙酯提取部位进行抗氧化活性研究。为贯叶连翘的进一步研究和开发提供理论基础。
1.3 贯叶连翘的化学成分
贯叶连翘的化学成分有多种黄酮类(Flavonoids)化合物如芦丁、槲皮素和金丝桃苷；苯并二蒽酮类化合物金丝桃素(hypericin)和伪金丝桃素(pesudohy pericin)；间二苯酚类化合物如加贯叶金丝桃(adhuperforin)、贯叶金丝桃( hyperforin) 、鞣质(tannin)、原花青素(proanthocyanidin)等成分[7]。贯叶连翘的不同化学成分具有其不同的药理作用、药用价值和生物活性。
1.3.1 黄酮化合物
黄酮化合物的主要成分有芦丁、金丝桃苷、槲皮苷、芸香苷、槲皮素等。其中的槲皮素会对多种导致癌细胞产生或者是促进癌细胞生长的化学制剂产生拮抗作用[7]，还可以抑制多种恶性肿瘤细胞的生长和转移[9]，贯叶连翘中贯叶金丝桃素和黄酮类物质在抗肿瘤中互相协调、疗效佳，它在体内毒素较低、天然资源含量丰富，这让贯叶连翘有望开发成一种新型的抗肿瘤药物[10]。
1.3.2 苯并二蒽酮类化合物
二蒽酮化合物中，含有金丝桃素和贯叶金丝桃素，它们在疾病预防与控制方面有着显著的临床药理作用。目前的研究认为贯叶连翘中的金丝桃素和贯叶金丝桃素是抗抑郁的关键成分[11]，实验表明它可以通过抑制单胺氧化酶的摄取来发挥抗抑郁作用，并且还可以通过抑制单胺类神经递质的摄取来发挥抗
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