微波法优选鸡血藤多糖的提取工艺研究(附件)
摘 要 鸡血藤为豆科密花豆属植物，性温，味苦、甘，归肝、肾经，具有活血补血，调经止痛，舒筋活络之功效。主要用于月经不调，痛经，经闭，风湿痹痛，麻木瘫痪，血虚萎黄等症。 本论文利用单因素实验结合响应曲面法优化鸡血藤中多糖的提取工艺。通过响应曲面法来分析单因素，研究料液比,提取时间及提取功率对鸡血藤多糖的提取率的影响。并确定最优工艺参数为料液比1:20、提取时间6min、提取功率300W，微波提取法具有降低实验时间，稳定、简单、高效率等优点为鸡血藤多糖提取工艺的优化提供了参考。并为中药制剂大工艺生产提供了一个良好的理论依据。 目 录
1 绪论
1.1 研究的背景和意义 3
1.1.1研究背景 3
1.1.2研究意义 4
1.2鸡血藤研究进展 4
1.2.1植物形态及药材性状 4
1.2.1.1植物形态 4
1.2.1.2药材性状 5
1.2.2主要化学成分 5
1.2.3药理作用 6
1.3多糖的研究进展 7
1.3.1多糖的活性研究 8
1.3.2多糖常用的提取方法 9
1.4响应曲面法介绍 11
2 实验部分
2.1实验试药与仪器 12
2.1.1仪器 12
2.1.2试药 12
2.2实验方法 12
2.2.1药材前处理 12
2.2.2鸡血藤提取工艺步骤 12
2.2.3最大波长的选择 12
2.2.4工作曲线的绘制 12
2.3 实验内容 12
2.3.1单因素实验 13
2.3.2响应面设计 13
2.4实验结果分析 13
2.4.1最大吸收波长 13
2.4.2工作曲线 13
2.4.3 单因素实验结果 14
2.5响应面法设计 15
2.5.1响应曲面法分析 17
2.6验证性实验 19
2.7小结 19
结论 21
参考文献 22
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
3
2.4实验结果分析 13
2.4.1最大吸收波长 13
2.4.2工作曲线 13
2.4.3 单因素实验结果 14
2.5响应面法设计 15
2.5.1响应曲面法分析 17
2.6验证性实验 19
2.7小结 19
结论 21
参考文献 22
致谢 25
1 绪论
鸡血藤，最早记载于《本草备要》，是一种具有活血化瘀作用的中药[1]。鸡血藤为豆科(Leguminosae)密花豆属植物密花豆(Spatholobussuberectus Dunn)的干燥藤茎，其性温，味苦、甘，归肝、肾经，具有活血补血，调经止痛，舒筋活络之功效[2]。用于月经不调，痛经，经闭，风湿痹痛，麻木瘫痪，血虚萎黄等症。鸡血藤的基源植物主要有25个种和变种，分属豆科和五味子科的6个属，其中在商品中出现有密花豆、香花崖豆藤、大血藤及常春油麻藤[3]。本研究所选鸡血藤为密花豆的藤茎，产于广东。
1.1 研究的背景和意义
1.1.1研究背景
从七十年代到现在，伴随着现代医学、细胞分子学、生物学、病毒学等研究的深入，科研人员发现在生物体中存在的多糖具有很大的研究意义和研究价值，并且多糖在一些生物体中比较复杂 [4]。生物体细胞表面的抗原多是一些糖链残基；生物体中大多数的功能蛋白也是或多或少地结合有糖链的糖蛋白；并且细胞表面的糖链含有非常丰富的生物学信息，糖链分子量的变化、糖链所含残基的变化及糖链三维空间结构的变化预示了细胞的各种生理状态，如分裂、转化、病变等。可以说糖类化合物决定了细胞表面各种作用的特异性，同时多糖类物质还参与了细胞各种生理活动的调节[5]。因而经过近三十年的研究，多糖类化合物己经发展为一种免疫疗法，通过激活免疫细胞来提高机体的免疫功能，同时对于正常的细胞没有毒副作用，在这一点上它对肿瘤的治疗比手术、化疗和放疗都要优越的多[6]。关于多糖的结构以及生物功能的研究已经成为蛋白质和核酸后的第3个探索生命奥秘的重要里程。多糖因其广泛和无毒，在抗氧化衰老、抗病毒、抗肿瘤、免疫调节和调节血糖等方面的药理作用显著，表现出了良好的发展应用前景，对多糖的分离提取、药理作用和结构成分的研究已成为一大热点。
本文主要以鸡血藤为例，分析鸡血藤当中的多糖的提取。本次研究采用单因素结合BoxBehnken试验法对提取工艺进行优化，选取最佳工艺参数，从单因素方面来考察，提高了其生产效率，从而提高鸡血藤多糖的提取率，鸡血藤多糖为后续人们继续研究提供了良好的参数。也为其他中药材的提取工艺优化提供了参考。
1.1.2 研究意义
鸡血藤为豆科植物密花豆的干燥藤茎，其性温、味苦、具有补血、活血、通络的功效，用于治疗月经不调、血虚萎黄、风湿痹痛等症状。大量的药理实验研究表明，鸡血藤还具有改善造血系统、抗血栓、抗病毒等多种药理作用。而鸡血藤中又含有丰富的多糖，多糖又称多聚糖,是生物有机体内普遍存在的一类生物大分子物质，由10个以上的单糖分子聚合而成(通常由几百甚至几千个单糖分子组成)，它不仅参与细胞骨架的构成而且是多种内源性生物活性分子的重要组成部分[78]。研究发现，多糖能控制细胞分裂和分化，调节细胞的生长与衰老，尤其在抗肿瘤、抗病毒、降血脂、增强免疫功能等方面作用更为明显[910]，如香菇多糖、猪苓多糖和灵芝多糖等的抗肿瘤活性，黄芪多糖、人参多糖的免疫增强活性等。到目前为止，已有 300 多种多糖类化合物从天然产物中被提取出来，其中从中药中提取的水溶性多糖更是引起中医药和食品工业研究人员的重视[11]。
1.2 鸡血藤研究进展
鸡血藤(subereet Spatholobus Stem)，又名过江龙、血枫(风)藤、猪血藤、大血藤，为豆科植物密花豆SpatholobuS Suberectus Dunn的干燥藤茎。其来源复杂，常见的主要有：红藤Sargentodaxa Cuneata(01iv). Rdhd.et.Wils、鸡血藤SpatholobuS SubereetuS Dunn、香花崖豆藤Millettia Dielsiana Harms和常春油麻藤Mueuna Semperviren SHemsl。其性味苦、甘；味温，补血，活血，通络，舒筋；主治腰膝酸痛，麻木瘫痪，月经不调，血虚萎黄，风湿痹痛等症；是一味沿用千年的活血化淤中药，古代多篇本草论著中记载鸡血藤“去淤血，生新血”的功效，称之为“血分之圣药”；现代临床常用鸡血藤(单用或以鸡血藤为主组方)治疗各种原因(如放化疗,血液系统疾病)引起的白细胞、血小板及红细胞等全血象减少的疾病[12]。
1.2.1植物形态及药材性状
1.2.1.1 植物形态
木质藤本。三出复叶，小叶宽椭圆形，长1020cm，宽715cm，先端短尾状，基部圆形，上面有疏柔毛，下面脉腋间有黄色髯毛，侧生小叶基部偏斜；叶柄及小叶柄无毛；小托叶针状；圆锥花序腋生，大型，花多而密；花序轴及总花梗被黄色短柔毛；花冠蝶形，白色，肉质
1 绪论
1.1 研究的背景和意义 3
1.1.1研究背景 3
1.1.2研究意义 4
1.2鸡血藤研究进展 4
1.2.1植物形态及药材性状 4
1.2.1.1植物形态 4
1.2.1.2药材性状 5
1.2.2主要化学成分 5
1.2.3药理作用 6
1.3多糖的研究进展 7
1.3.1多糖的活性研究 8
1.3.2多糖常用的提取方法 9
1.4响应曲面法介绍 11
2 实验部分
2.1实验试药与仪器 12
2.1.1仪器 12
2.1.2试药 12
2.2实验方法 12
2.2.1药材前处理 12
2.2.2鸡血藤提取工艺步骤 12
2.2.3最大波长的选择 12
2.2.4工作曲线的绘制 12
2.3 实验内容 12
2.3.1单因素实验 13
2.3.2响应面设计 13
2.4实验结果分析 13
2.4.1最大吸收波长 13
2.4.2工作曲线 13
2.4.3 单因素实验结果 14
2.5响应面法设计 15
2.5.1响应曲面法分析 17
2.6验证性实验 19
2.7小结 19
结论 21
参考文献 22
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
3
2.4实验结果分析 13
2.4.1最大吸收波长 13
2.4.2工作曲线 13
2.4.3 单因素实验结果 14
2.5响应面法设计 15
2.5.1响应曲面法分析 17
2.6验证性实验 19
2.7小结 19
结论 21
参考文献 22
致谢 25
1 绪论
鸡血藤，最早记载于《本草备要》，是一种具有活血化瘀作用的中药[1]。鸡血藤为豆科(Leguminosae)密花豆属植物密花豆(Spatholobussuberectus Dunn)的干燥藤茎，其性温，味苦、甘，归肝、肾经，具有活血补血，调经止痛，舒筋活络之功效[2]。用于月经不调，痛经，经闭，风湿痹痛，麻木瘫痪，血虚萎黄等症。鸡血藤的基源植物主要有25个种和变种，分属豆科和五味子科的6个属，其中在商品中出现有密花豆、香花崖豆藤、大血藤及常春油麻藤[3]。本研究所选鸡血藤为密花豆的藤茎，产于广东。
1.1 研究的背景和意义
1.1.1研究背景
从七十年代到现在，伴随着现代医学、细胞分子学、生物学、病毒学等研究的深入，科研人员发现在生物体中存在的多糖具有很大的研究意义和研究价值，并且多糖在一些生物体中比较复杂 [4]。生物体细胞表面的抗原多是一些糖链残基；生物体中大多数的功能蛋白也是或多或少地结合有糖链的糖蛋白；并且细胞表面的糖链含有非常丰富的生物学信息，糖链分子量的变化、糖链所含残基的变化及糖链三维空间结构的变化预示了细胞的各种生理状态，如分裂、转化、病变等。可以说糖类化合物决定了细胞表面各种作用的特异性，同时多糖类物质还参与了细胞各种生理活动的调节[5]。因而经过近三十年的研究，多糖类化合物己经发展为一种免疫疗法，通过激活免疫细胞来提高机体的免疫功能，同时对于正常的细胞没有毒副作用，在这一点上它对肿瘤的治疗比手术、化疗和放疗都要优越的多[6]。关于多糖的结构以及生物功能的研究已经成为蛋白质和核酸后的第3个探索生命奥秘的重要里程。多糖因其广泛和无毒，在抗氧化衰老、抗病毒、抗肿瘤、免疫调节和调节血糖等方面的药理作用显著，表现出了良好的发展应用前景，对多糖的分离提取、药理作用和结构成分的研究已成为一大热点。
本文主要以鸡血藤为例，分析鸡血藤当中的多糖的提取。本次研究采用单因素结合BoxBehnken试验法对提取工艺进行优化，选取最佳工艺参数，从单因素方面来考察，提高了其生产效率，从而提高鸡血藤多糖的提取率，鸡血藤多糖为后续人们继续研究提供了良好的参数。也为其他中药材的提取工艺优化提供了参考。
1.1.2 研究意义
鸡血藤为豆科植物密花豆的干燥藤茎，其性温、味苦、具有补血、活血、通络的功效，用于治疗月经不调、血虚萎黄、风湿痹痛等症状。大量的药理实验研究表明，鸡血藤还具有改善造血系统、抗血栓、抗病毒等多种药理作用。而鸡血藤中又含有丰富的多糖，多糖又称多聚糖,是生物有机体内普遍存在的一类生物大分子物质，由10个以上的单糖分子聚合而成(通常由几百甚至几千个单糖分子组成)，它不仅参与细胞骨架的构成而且是多种内源性生物活性分子的重要组成部分[78]。研究发现，多糖能控制细胞分裂和分化，调节细胞的生长与衰老，尤其在抗肿瘤、抗病毒、降血脂、增强免疫功能等方面作用更为明显[910]，如香菇多糖、猪苓多糖和灵芝多糖等的抗肿瘤活性，黄芪多糖、人参多糖的免疫增强活性等。到目前为止，已有 300 多种多糖类化合物从天然产物中被提取出来，其中从中药中提取的水溶性多糖更是引起中医药和食品工业研究人员的重视[11]。
1.2 鸡血藤研究进展
鸡血藤(subereet Spatholobus Stem)，又名过江龙、血枫(风)藤、猪血藤、大血藤，为豆科植物密花豆SpatholobuS Suberectus Dunn的干燥藤茎。其来源复杂，常见的主要有：红藤Sargentodaxa Cuneata(01iv). Rdhd.et.Wils、鸡血藤SpatholobuS SubereetuS Dunn、香花崖豆藤Millettia Dielsiana Harms和常春油麻藤Mueuna Semperviren SHemsl。其性味苦、甘；味温，补血，活血，通络，舒筋；主治腰膝酸痛，麻木瘫痪，月经不调，血虚萎黄，风湿痹痛等症；是一味沿用千年的活血化淤中药，古代多篇本草论著中记载鸡血藤“去淤血，生新血”的功效，称之为“血分之圣药”；现代临床常用鸡血藤(单用或以鸡血藤为主组方)治疗各种原因(如放化疗,血液系统疾病)引起的白细胞、血小板及红细胞等全血象减少的疾病[12]。
1.2.1植物形态及药材性状
1.2.1.1 植物形态
木质藤本。三出复叶，小叶宽椭圆形，长1020cm，宽715cm，先端短尾状，基部圆形，上面有疏柔毛，下面脉腋间有黄色髯毛，侧生小叶基部偏斜；叶柄及小叶柄无毛；小托叶针状；圆锥花序腋生，大型，花多而密；花序轴及总花梗被黄色短柔毛；花冠蝶形，白色，肉质
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