徐长卿中多糖的提取工艺研究(附件)
摘 要徐长卿属于传统的中药药材，在全国大部地方区均有分布，随着医学、化学等学科的不断发展使其对徐长卿药材的化学成分的研究也不断深入。徐长卿化学成分复杂多样，而且药用价值也很可观，所以对于徐长卿各成分的提取分离和作用机制的研究有着巨大的潜力。中药药材的提取方法有很多，本实验通过温浸法对徐长卿中多糖进行提取，以响应曲面法进行优化组合，最终得出最佳提取工艺时间为3h、温度为90℃、料液比为1:20。为我们以后的研究发展提供了一个参考依据。 目 录
1 绪论
1.1 立项背景及研究意义 1
1.2 徐长卿药材的介绍 1
1.2.1植物形态及药材性状 1
1.2.2化学成分研究 2
1.3 植物多糖研究进展 4
1.3.1多糖的药理作用研究 4
1.3.2多糖的提取工艺研究 4
1.4 响应曲面法 6
2 实验部分
2.1 徐长卿多糖的提取工艺 7
2.1.1材料与仪器 7
2.1.2标准溶液的配置 7
2.1.3标准曲线的绘制 7
2.1.4实验方法 7
2.1.5方法学考查 7
2.1.6徐长卿多糖的提取 9
2.1.7 单因素实验 9
2.1.8响应曲面法 9
2.1.9含量测定与得率计算 9
3 实验的结果与分析
3.1 单因素考察 11
3.1.1料液比对多糖得率的影响 11
3.1.2提取温度对多糖得率的影响 11
3.1.3提取时间对多糖提取率的的影响 12
3.1.4单因素实验分析总结 13
3.2 响应曲面法设计 13
3.2.1回归模型方程的建立 13
3.2.2模型方程的显著性检验 14
3.2.3响应曲面法分析 15
3.3 验证性实验 16
3.4 小结 16
结 论 17
参考文献 18
致谢 20
1 绪论
1.1立项背景及研究意义
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: %3^5`1^9`1^6^0`7^2#
3.2 响应曲面法设计 13
3.2.1回归模型方程的建立 13
3.2.2模型方程的显著性检验 14
3.2.3响应曲面法分析 15
3.3 验证性实验 16
3.4 小结 16
结 论 17
参考文献 18
致谢 20
1 绪论
1.1立项背景及研究意义
多糖又叫做多聚糖，由1020个及以上单糖缩合而成而成的链状结构[1]，大多以结合态存在，也有一部分以游离态的形式存在。从20世纪50年代对真菌多糖的抗癌效果的发现以来，人们开始对多糖的化学、物理、生物方面的研究不断深入。近年来随着分子生物学的发展，人们逐渐认识到多糖及其复合物分子具有及其重要的生物学功能，它不仅是生物机体组成的重要的物质，也常作为储存能量的物质参与到机体的新陈代谢中。多糖在食品工业、发酵工业及石油工业上也有着广泛的应用。因此，在开展多糖资源的开发、多糖结构的分析、多糖药理作用等的研究方面,人们做了大量的工作。目前,多糖的研究以日本、美国、德国、俄罗斯等国处于领先地位。
由于植物多糖具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老，降血糖、抗氧化等多种生物活性毒副作用小、不易造成残留等优点[2，3]，近年来对植物多糖的研究呈现出一个增长的趋势。对于多糖提取方法方面的研究在我们实验中最常见的是通过纯化水加热的方法进行提取，但是随着物理理论与实践的相互结合，溶剂提取法、超声辅助提取法、微波法、酶法、超临界流体萃取法等也在多糖提取过程应用越来越普遍。
徐长卿属于萝藦科牛皮消暑类植物Cynanchum paniculatum （Bge.）Kitag干燥的根及其根茎。味辛、温，归肝、胃经。具有祛风、化湿、止痛、止痒之功效能，临床常用于治疗风湿痹痛，胃痛胀满，牙痛腰痛，跌扑伤痛，风疹，湿疹[4]。徐长卿药的临床应用及其广泛，在临床上还有多种剂型，可以制成针剂、胶囊、软膏、喷雾剂等多种剂型，而且具有疗效确切、价格低廉、来源广泛等优点。本课题通过徐长卿多糖提取工艺的研究，为以后的开发利用提供一个便利的条件。
1.2徐长卿药材的介绍
1.2.1植物形态及药材性状[5]
1.2.1.1植物形态
多年生直立草本，高约1米；根须状，多至50余条；茎不分枝，稀从根部发生几条，无毛或被微生。叶对生，纸质，披针形至线形，长513厘米，宽515毫米（最大达13×1.5厘米），两端锐尖，两面无毛或叶面具疏柔毛，叶缘有边毛；侧脉不明显；叶柄长约3毫米，圆锥状聚伞花序生于顶端的叶腋内，长达7厘米，着花10余朵；花萼内的腺体或有或无；花冠黄绿色，近辐状，裂片长达4毫米，宽3毫米；副花冠裂片5，基部增厚，顶端钝；花粉块每室1个，下垂；子房椭圆形；柱头5角形，顶端略为突起。蓇葖单生，披针形，长6厘米，直径6毫米，向端部长渐尖；种子长圆形，长3毫米；种毛白色绢质，长1厘米。花期57月，果期912月。如图1.1：
图1.1徐长卿植物图
1.2.1.2药材性状
表面淡黄白色至淡棕黄色，或棕色；具微细的纵皱纹，并有纤细的须根。质脆，易折断，断面粉性，皮部类白色或黄白色，形成层环淡棕色，木部细小。气香，味微辛凉。如下图1.2：
图1.2徐长卿药材图
1.2.2化学成分研究
主要化学成分全草含牡丹酚约1%之后又找出有与肉珊瑚甙元、去酚牛皮消甙元、茸毛牛 奶藤甙元和去酰萝甙元极为相似的物质以及醋酸 、桂皮酸等。除此之外除丹皮酚外根还含有黄酮、糖类、氨基酸、牡丹酚、异丹皮酚、硬脂酸癸酯、蜂花烷、十六烯、β谷甾醇、D赤丝草醇、异丹皮酚、乌药醇和C21甾类化合物[6]。
1.2.3药理作用研究[5]
1.2.3.1镇痛作用
热板法证明，徐长卿对小鼠有镇痛作用，腹腔注射 5或10g/kg后10分钟出现镇痛，l小时后仍未消失。牡丹酚也可使小鼠痛阈提高。但有人证明，应用去牡丹酚的徐长卿药液也能延长疼痛反应时间，提高痛阈和镇痛率。由此证明徐长卿的镇痛作用除牡丹酚外尚有其它成分。
1.2.3.2镇静作用
牡丹酚有镇静作用。光电管法与抖笼法试验证明，去牡丹酚徐长卿注射液5g/kg小鼠 腹腔注射能显着减少自发活动，但不能延长巴比妥类催眠药的睡眠时间。兔静脉注射，可出现惊厥，这是否与给药方法，动物种属差异有关，尚待进一步研究。
1.2.3.3对心血管系统的作用
兔腹腔注射徐长卿3g/kg连续7天，不能 消除该兔静滴脑垂体后叶素引起的心肌急性缺血性心电图T波抬高的变化。但徐长卿煎剂1015g/kg小鼠腹腔注射，可使其心肌对86铷的摄取明显增加，因而认为能增加冠状动脉血流量，改善心肌代谢，从而缓解心肌缺血。牡丹酚具有降低动物血压作用。去牡丹酚的徐长卿制剂，仍可降低犬，兔和大鼠的血压、减慢心率，故认为徐长卿的降低作用除所含牡丹酚外，可能还有其它降压成分。
1.2.3.4对实验性高血脂症及动脉粥样硬化病变的影响
对喂饲胆固醇的高血脂症兔每日给徐长卿3g/kg
1 绪论
1.1 立项背景及研究意义 1
1.2 徐长卿药材的介绍 1
1.2.1植物形态及药材性状 1
1.2.2化学成分研究 2
1.3 植物多糖研究进展 4
1.3.1多糖的药理作用研究 4
1.3.2多糖的提取工艺研究 4
1.4 响应曲面法 6
2 实验部分
2.1 徐长卿多糖的提取工艺 7
2.1.1材料与仪器 7
2.1.2标准溶液的配置 7
2.1.3标准曲线的绘制 7
2.1.4实验方法 7
2.1.5方法学考查 7
2.1.6徐长卿多糖的提取 9
2.1.7 单因素实验 9
2.1.8响应曲面法 9
2.1.9含量测定与得率计算 9
3 实验的结果与分析
3.1 单因素考察 11
3.1.1料液比对多糖得率的影响 11
3.1.2提取温度对多糖得率的影响 11
3.1.3提取时间对多糖提取率的的影响 12
3.1.4单因素实验分析总结 13
3.2 响应曲面法设计 13
3.2.1回归模型方程的建立 13
3.2.2模型方程的显著性检验 14
3.2.3响应曲面法分析 15
3.3 验证性实验 16
3.4 小结 16
结 论 17
参考文献 18
致谢 20
1 绪论
1.1立项背景及研究意义
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: %3^5`1^9`1^6^0`7^2#
3.2 响应曲面法设计 13
3.2.1回归模型方程的建立 13
3.2.2模型方程的显著性检验 14
3.2.3响应曲面法分析 15
3.3 验证性实验 16
3.4 小结 16
结 论 17
参考文献 18
致谢 20
1 绪论
1.1立项背景及研究意义
多糖又叫做多聚糖，由1020个及以上单糖缩合而成而成的链状结构[1]，大多以结合态存在，也有一部分以游离态的形式存在。从20世纪50年代对真菌多糖的抗癌效果的发现以来，人们开始对多糖的化学、物理、生物方面的研究不断深入。近年来随着分子生物学的发展，人们逐渐认识到多糖及其复合物分子具有及其重要的生物学功能，它不仅是生物机体组成的重要的物质，也常作为储存能量的物质参与到机体的新陈代谢中。多糖在食品工业、发酵工业及石油工业上也有着广泛的应用。因此，在开展多糖资源的开发、多糖结构的分析、多糖药理作用等的研究方面,人们做了大量的工作。目前,多糖的研究以日本、美国、德国、俄罗斯等国处于领先地位。
由于植物多糖具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老，降血糖、抗氧化等多种生物活性毒副作用小、不易造成残留等优点[2，3]，近年来对植物多糖的研究呈现出一个增长的趋势。对于多糖提取方法方面的研究在我们实验中最常见的是通过纯化水加热的方法进行提取，但是随着物理理论与实践的相互结合，溶剂提取法、超声辅助提取法、微波法、酶法、超临界流体萃取法等也在多糖提取过程应用越来越普遍。
徐长卿属于萝藦科牛皮消暑类植物Cynanchum paniculatum （Bge.）Kitag干燥的根及其根茎。味辛、温，归肝、胃经。具有祛风、化湿、止痛、止痒之功效能，临床常用于治疗风湿痹痛，胃痛胀满，牙痛腰痛，跌扑伤痛，风疹，湿疹[4]。徐长卿药的临床应用及其广泛，在临床上还有多种剂型，可以制成针剂、胶囊、软膏、喷雾剂等多种剂型，而且具有疗效确切、价格低廉、来源广泛等优点。本课题通过徐长卿多糖提取工艺的研究，为以后的开发利用提供一个便利的条件。
1.2徐长卿药材的介绍
1.2.1植物形态及药材性状[5]
1.2.1.1植物形态
多年生直立草本，高约1米；根须状，多至50余条；茎不分枝，稀从根部发生几条，无毛或被微生。叶对生，纸质，披针形至线形，长513厘米，宽515毫米（最大达13×1.5厘米），两端锐尖，两面无毛或叶面具疏柔毛，叶缘有边毛；侧脉不明显；叶柄长约3毫米，圆锥状聚伞花序生于顶端的叶腋内，长达7厘米，着花10余朵；花萼内的腺体或有或无；花冠黄绿色，近辐状，裂片长达4毫米，宽3毫米；副花冠裂片5，基部增厚，顶端钝；花粉块每室1个，下垂；子房椭圆形；柱头5角形，顶端略为突起。蓇葖单生，披针形，长6厘米，直径6毫米，向端部长渐尖；种子长圆形，长3毫米；种毛白色绢质，长1厘米。花期57月，果期912月。如图1.1：
图1.1徐长卿植物图
1.2.1.2药材性状
表面淡黄白色至淡棕黄色，或棕色；具微细的纵皱纹，并有纤细的须根。质脆，易折断，断面粉性，皮部类白色或黄白色，形成层环淡棕色，木部细小。气香，味微辛凉。如下图1.2：
图1.2徐长卿药材图
1.2.2化学成分研究
主要化学成分全草含牡丹酚约1%之后又找出有与肉珊瑚甙元、去酚牛皮消甙元、茸毛牛 奶藤甙元和去酰萝甙元极为相似的物质以及醋酸 、桂皮酸等。除此之外除丹皮酚外根还含有黄酮、糖类、氨基酸、牡丹酚、异丹皮酚、硬脂酸癸酯、蜂花烷、十六烯、β谷甾醇、D赤丝草醇、异丹皮酚、乌药醇和C21甾类化合物[6]。
1.2.3药理作用研究[5]
1.2.3.1镇痛作用
热板法证明，徐长卿对小鼠有镇痛作用，腹腔注射 5或10g/kg后10分钟出现镇痛，l小时后仍未消失。牡丹酚也可使小鼠痛阈提高。但有人证明，应用去牡丹酚的徐长卿药液也能延长疼痛反应时间，提高痛阈和镇痛率。由此证明徐长卿的镇痛作用除牡丹酚外尚有其它成分。
1.2.3.2镇静作用
牡丹酚有镇静作用。光电管法与抖笼法试验证明，去牡丹酚徐长卿注射液5g/kg小鼠 腹腔注射能显着减少自发活动，但不能延长巴比妥类催眠药的睡眠时间。兔静脉注射，可出现惊厥，这是否与给药方法，动物种属差异有关，尚待进一步研究。
1.2.3.3对心血管系统的作用
兔腹腔注射徐长卿3g/kg连续7天，不能 消除该兔静滴脑垂体后叶素引起的心肌急性缺血性心电图T波抬高的变化。但徐长卿煎剂1015g/kg小鼠腹腔注射，可使其心肌对86铷的摄取明显增加，因而认为能增加冠状动脉血流量，改善心肌代谢，从而缓解心肌缺血。牡丹酚具有降低动物血压作用。去牡丹酚的徐长卿制剂，仍可降低犬，兔和大鼠的血压、减慢心率，故认为徐长卿的降低作用除所含牡丹酚外，可能还有其它降压成分。
1.2.3.4对实验性高血脂症及动脉粥样硬化病变的影响
对喂饲胆固醇的高血脂症兔每日给徐长卿3g/kg
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