银杏内生真菌抗菌活性的研究(附件)
摘 要植物内生真菌是指全部或者部分的生活寄居在健康植物细胞内或各组织中的真菌。内生真菌是一种重要的生物资源，近年来逐渐引起人们的关注，它可以使植物的抗逆性加强，可产生促植物生长的激素；并且可以产生具有明显抗癌抗菌、抗氧化的药用活性成分。因此，从内生真菌中找寻活性化合物便成学者们研究的热点。而珍贵的药用植物银杏是我国的特产植物，为研究内生真菌提供了一定的有利条件。本实验以从银杏中分离得到的内生真菌为材料，研究内生真菌活菌及其次生代谢产物的抗菌活性，为开发利用银杏内生真菌资源提供基础。 目 录
1 前言
1.1 银杏 1
1.1.1 银杏的简介 1
1.1.2 银杏的药理作用 1
1.1.3 银杏的临床应用 2
1.2 内生真菌 3
1.2.1 植物内生真菌的概念 3
1.2.2 内生真菌的历史 3
1.2.3 内生真菌与宿主植物 4
1.2.4 内生真菌的一般特征 5
1.2.5 内生真菌的多样性 5
1.2.6 关于内生真菌的研究 6
1.2.7 内生真菌的应用 7
2 实验内容
2.1 材料与方法 9
2.1.1 实验内生真菌 9
2.1.2 测试菌株 9
2.1.3 主要试剂 9
2.1.4 主要培养基 9
2.1.5 主要仪器及设备 9
2.1.6 实验方法 10
2.2 结果与分析 12
2.2.1 银杏内生真菌活菌的抗菌活性 12
2.2.2 银杏内生真菌次生代谢产物的抗菌活性 14
3 讨论
3.1 内生真菌菌株的培养 17
3.2 内生真菌的活性筛选 17
3.3 内生真菌的展望 18
参考文献 20
致 谢 23
附 录 24
1 前言
1.1 银杏
1.1.1 银杏的简介
银杏(Ginkgo biloba L.)是国家二级保护的稀罕植被，最早是出现于大约3.
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
内生真菌菌株的培养 17
3.2 内生真菌的活性筛选 17
3.3 内生真菌的展望 18
参考文献 20
致 谢 23
附 录 24
1 前言
1.1 银杏
1.1.1 银杏的简介
银杏(Ginkgo biloba L.)是国家二级保护的稀罕植被，最早是出现于大约3.45亿年前的石炭纪。根据有关的记叙，银杏都有3000多年的栽培历史。现今银杏在欧、亚、美诸多国家和地区都有种植[1]。银杏喜温暖向阳的生态环境，耐寒、耐干旱，分布于我国的中部至西部，不但是一种多功能的经济树，可以观赏绿化，也是我国的特有树种，它的资源量是全世界的70%左右。目前，在我国浙江省的天目山，四川湖北两省交界处的神农架，河南安徽邻接的大别山等地方还有少量的野生及半野生状态的银杏，其余大多数地区的银杏为人工栽培[2]。
银杏别名白果、公孙树，银杏科银杏属的裸子植被，是多年生落叶乔木，是世界上最古老的孑遗植物之一。它由肉质外种皮、骨质中种皮以及膜质内种皮和种仁而组成。银杏树叶、种子、木材、树皮、根等可以被开发成药品、食品、保健品、化妆品、生物农药、原料药的替代品等，故银杏被称为“全身都是宝的活化石”[3]。
1.1.2 银杏的药理作用
银杏自身就有抗真菌和抗氧化活性，而产生活性的原因除由本身产生的化合物以外，或许还是银杏内生真菌协同作用的结果。因此从银杏内生真菌当中寻找抗菌和抗氧化活性物质具有重要研究意义和研究价值。
银杏叶中含有的黄酮醇对血管有扩张作用，可以使血清胆甾醇水平降低，对高血压患者具有一定的降压作用。银杏的种仁也是一种营养价值丰富的食物，具有敛肺气、喘咳等功能，主要对哮喘、痰咳等疾病有一定的治疗作用。因此，被认为是“活化石”的银杏具有很高的药用研究价值。银杏主要有以下药理作用：
（1）扩张血管改善脑循环，保护大脑。
银杏内酯可抑制血小板聚集，使血液粘度有所减低，降低血栓形成的机率，又可以使缺血病人微循环有所改善，同时还能使得细胞膜具有一定的稳定性，减少血管紧张素的渗透，具备抗炎、抗休克、抗过敏功能，对缺血损伤、器官移植发生的排斥反应也有一定的保护作用[4] 。
（2）对自由基的清除作用。
银杏叶提取物中黄酮与自由基反应，降低因自由基诱发膜脂过氧化[5]。
（3）对平滑肌的作用和抗过敏功能。
银杏叶中有一种重要的提取物，是黄酮类，特别是银杏叶双黄酮类，对豚鼠离体肠管有解痉挛作用；银杏叶的乙醇提取物能拮抗组织胺和乙酰胆碱的致痉挛作用。
（4）抗菌功能。
银杏中含有几种抗菌成分，对多种革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌均有抑制作用，对结核杆菌的抑制作用不受加热影响，对常见的致病性皮肤真菌也有不同程度上的抑制作用。
（5）抗氧化作用[6]。
（6）抗动脉粥样硬化作用[7]。
（7）其他的作用。
银杏叶提取物对心脑血管疾病、抗过敏、抗血小板聚集、增强机体免疫功能有防治功效，对防治疾病和抗衰老有重要作用。
1.1.3 银杏的临床应用
明朝李时珍的《本草纲目》中记述的白果的功能是：入肺经、益脾气、定咳喘、缩小便，还可治疗“疮疥疽瘤、乳痈溃烂、牙齿虫龋、小儿腹泻、赤白带下、慢性淋浊、遗精遗尿”等症[8]。
上世纪七八十年代，因为研究发现了银杏叶的提取物(EGb)及其制剂可以治疗心脑血管方面的疾病及老年痴呆症等的独特疗效，从而在世界范围内引起了对银杏药用价值的研究热潮。
银杏叶中含有一种能扩张血管的物质，就是黄酮醇，能使血清胆甾醇水平降低，对高血压患者也有一定的降压功效。银杏的种仁也是一种食物，它的营养价值很丰富，可以润肺定喘、止带、涩精、寒热皆宜。
相关的报道指出，仅从银杏叶中发现的化合物就超过了100种[9]。银杏内酯是血小板活化因子(PAF) 强有力的拮抗物，它是从银杏的叶和根皮中发掘的。具有多种药理作用：可以改善血液流变状态、保护心脑缺血缺氧不受损害，防治冠心病和脑血栓等[10]。20世纪60年代以来，国内外众多学者对银杏做了大量的研究工作，发现它具有抗衰老、抗菌、抗PAF心血管等作用，同时对中枢神经系统和心血管系统也具有很好的作用[11,12]。
研究学者对银杏叶的临床应用研究已有相当长的一段时间，已经充分肯定了对心脑血管，外周血管循环障碍性疾病，哮喘等方面的疗效。其临床应用的方法有片剂、胶囊剂、冲剂、口服液、袋泡剂、酒剂、浸膏剂。
临床应用主要有：
（1）降血脂，治疗冠心病心绞痛[13]。
（2）高血压[14]。
（3）糖尿病肾病。
银杏叶中的黄酮、内酯等的抗血小板激
1 前言
1.1 银杏 1
1.1.1 银杏的简介 1
1.1.2 银杏的药理作用 1
1.1.3 银杏的临床应用 2
1.2 内生真菌 3
1.2.1 植物内生真菌的概念 3
1.2.2 内生真菌的历史 3
1.2.3 内生真菌与宿主植物 4
1.2.4 内生真菌的一般特征 5
1.2.5 内生真菌的多样性 5
1.2.6 关于内生真菌的研究 6
1.2.7 内生真菌的应用 7
2 实验内容
2.1 材料与方法 9
2.1.1 实验内生真菌 9
2.1.2 测试菌株 9
2.1.3 主要试剂 9
2.1.4 主要培养基 9
2.1.5 主要仪器及设备 9
2.1.6 实验方法 10
2.2 结果与分析 12
2.2.1 银杏内生真菌活菌的抗菌活性 12
2.2.2 银杏内生真菌次生代谢产物的抗菌活性 14
3 讨论
3.1 内生真菌菌株的培养 17
3.2 内生真菌的活性筛选 17
3.3 内生真菌的展望 18
参考文献 20
致 谢 23
附 录 24
1 前言
1.1 银杏
1.1.1 银杏的简介
银杏(Ginkgo biloba L.)是国家二级保护的稀罕植被，最早是出现于大约3.
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
内生真菌菌株的培养 17
3.2 内生真菌的活性筛选 17
3.3 内生真菌的展望 18
参考文献 20
致 谢 23
附 录 24
1 前言
1.1 银杏
1.1.1 银杏的简介
银杏(Ginkgo biloba L.)是国家二级保护的稀罕植被，最早是出现于大约3.45亿年前的石炭纪。根据有关的记叙，银杏都有3000多年的栽培历史。现今银杏在欧、亚、美诸多国家和地区都有种植[1]。银杏喜温暖向阳的生态环境，耐寒、耐干旱，分布于我国的中部至西部，不但是一种多功能的经济树，可以观赏绿化，也是我国的特有树种，它的资源量是全世界的70%左右。目前，在我国浙江省的天目山，四川湖北两省交界处的神农架，河南安徽邻接的大别山等地方还有少量的野生及半野生状态的银杏，其余大多数地区的银杏为人工栽培[2]。
银杏别名白果、公孙树，银杏科银杏属的裸子植被，是多年生落叶乔木，是世界上最古老的孑遗植物之一。它由肉质外种皮、骨质中种皮以及膜质内种皮和种仁而组成。银杏树叶、种子、木材、树皮、根等可以被开发成药品、食品、保健品、化妆品、生物农药、原料药的替代品等，故银杏被称为“全身都是宝的活化石”[3]。
1.1.2 银杏的药理作用
银杏自身就有抗真菌和抗氧化活性，而产生活性的原因除由本身产生的化合物以外，或许还是银杏内生真菌协同作用的结果。因此从银杏内生真菌当中寻找抗菌和抗氧化活性物质具有重要研究意义和研究价值。
银杏叶中含有的黄酮醇对血管有扩张作用，可以使血清胆甾醇水平降低，对高血压患者具有一定的降压作用。银杏的种仁也是一种营养价值丰富的食物，具有敛肺气、喘咳等功能，主要对哮喘、痰咳等疾病有一定的治疗作用。因此，被认为是“活化石”的银杏具有很高的药用研究价值。银杏主要有以下药理作用：
（1）扩张血管改善脑循环，保护大脑。
银杏内酯可抑制血小板聚集，使血液粘度有所减低，降低血栓形成的机率，又可以使缺血病人微循环有所改善，同时还能使得细胞膜具有一定的稳定性，减少血管紧张素的渗透，具备抗炎、抗休克、抗过敏功能，对缺血损伤、器官移植发生的排斥反应也有一定的保护作用[4] 。
（2）对自由基的清除作用。
银杏叶提取物中黄酮与自由基反应，降低因自由基诱发膜脂过氧化[5]。
（3）对平滑肌的作用和抗过敏功能。
银杏叶中有一种重要的提取物，是黄酮类，特别是银杏叶双黄酮类，对豚鼠离体肠管有解痉挛作用；银杏叶的乙醇提取物能拮抗组织胺和乙酰胆碱的致痉挛作用。
（4）抗菌功能。
银杏中含有几种抗菌成分，对多种革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌均有抑制作用，对结核杆菌的抑制作用不受加热影响，对常见的致病性皮肤真菌也有不同程度上的抑制作用。
（5）抗氧化作用[6]。
（6）抗动脉粥样硬化作用[7]。
（7）其他的作用。
银杏叶提取物对心脑血管疾病、抗过敏、抗血小板聚集、增强机体免疫功能有防治功效，对防治疾病和抗衰老有重要作用。
1.1.3 银杏的临床应用
明朝李时珍的《本草纲目》中记述的白果的功能是：入肺经、益脾气、定咳喘、缩小便，还可治疗“疮疥疽瘤、乳痈溃烂、牙齿虫龋、小儿腹泻、赤白带下、慢性淋浊、遗精遗尿”等症[8]。
上世纪七八十年代，因为研究发现了银杏叶的提取物(EGb)及其制剂可以治疗心脑血管方面的疾病及老年痴呆症等的独特疗效，从而在世界范围内引起了对银杏药用价值的研究热潮。
银杏叶中含有一种能扩张血管的物质，就是黄酮醇，能使血清胆甾醇水平降低，对高血压患者也有一定的降压功效。银杏的种仁也是一种食物，它的营养价值很丰富，可以润肺定喘、止带、涩精、寒热皆宜。
相关的报道指出，仅从银杏叶中发现的化合物就超过了100种[9]。银杏内酯是血小板活化因子(PAF) 强有力的拮抗物，它是从银杏的叶和根皮中发掘的。具有多种药理作用：可以改善血液流变状态、保护心脑缺血缺氧不受损害，防治冠心病和脑血栓等[10]。20世纪60年代以来，国内外众多学者对银杏做了大量的研究工作，发现它具有抗衰老、抗菌、抗PAF心血管等作用，同时对中枢神经系统和心血管系统也具有很好的作用[11,12]。
研究学者对银杏叶的临床应用研究已有相当长的一段时间，已经充分肯定了对心脑血管，外周血管循环障碍性疾病，哮喘等方面的疗效。其临床应用的方法有片剂、胶囊剂、冲剂、口服液、袋泡剂、酒剂、浸膏剂。
临床应用主要有：
（1）降血脂，治疗冠心病心绞痛[13]。
（2）高血压[14]。
（3）糖尿病肾病。
银杏叶中的黄酮、内酯等的抗血小板激
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