山楂叶总黄酮的大孔吸附树脂纯化工艺
本人签名： 日期： 摘 要 山楂为蔷薇科山楂属(Rosaceaecrataegus. L)植物，分布于北温带，全世界有该属植物280余种，我国有17种。山楂入药在我国有悠久历史，《本草纲目》记载：此品酸甘味温，消食积，补脾。山楂叶中有丰富的黄酮类化合物，如牡荆素、牡荆素-4′-鼠李糖苷、牡荆素-4′，7-双葡萄糖苷、乙酰牡荆素-4′-鼠李糖苷、金丝桃苷和芦丁等，近年来发现山楂叶中的黄酮成分对心脑血管疾病有显著疗效的黄酮成分有治疗心血管疾病作用，特别是在降血压、降血脂、增大心脏血流量等方面疗效显著，采用传统的水醇法提取山楂叶总黄酮，在醇沉中造成部分黄酮损失，导致产品中总黄酮含量较低。本文利用大孔吸附树脂对山楂叶总黄酮进行纯化，收到了较好效果，对有效利用我国丰富的山楂资源做了有益的探索，符合国内外关于该论题的研究现状和发展趋势。目 录
1 综述研究
1.1 研究的目的与意义 1
1.1.1 研究目的 1
1.1.2 研究意义 2
1.2 山楂叶总黄酮药理作用的研究概述 2
1.2.1 对心血管系统的影响 2
1.2.2 对脑的影响 3
1.2.3 降血糖作用 3
1.2.4 抗自由基作用 3
1.2.5 抗炎镇痛抗过敏作用 4
1.2.6 肝保护作用 4
1.2.7 消化性溃疡的保护作用 4
1.2.8 抗病毒、抗肿瘤作用 4
1.3 山楂叶总黄酮的大孔吸附树脂纯化工艺研究实验 5
2 实验部分
2.1 主要仪器、试剂与材料 7
2.1.1 仪器 7
2.1.2 试剂 7
2.1.3 材料 7
2.2 方法与结果 7
2.2.1 大孔吸附树脂材料的选择 7
2.2.2 大孔树脂动态吸附量的测定 7
2.2.3 大孔树脂的动态吸附模型 8
2.2.4 洗脱液乙醇浓度的确定 9
2.2.5 蒸馏水除杂质效果的考察 9
2.2
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br /> 2.1.2 试剂 7
2.1.3 材料 7
2.2 方法与结果 7
2.2.1 大孔吸附树脂材料的选择 7
2.2.2 大孔树脂动态吸附量的测定 7
2.2.3 大孔树脂的动态吸附模型 8
2.2.4 洗脱液乙醇浓度的确定 9
2.2.5 蒸馏水除杂质效果的考察 9
2.2.6 洗脱剂用量的确定 9
2.2.7 纯化工艺的正交实验研究 10
2.2.8微波辅助提取与大孔树脂纯化联用的实验方法与结果 12
结论 14
参考文献 15
致谢 17
1 综述研究
中医药学是中华民族优秀文化的璀璨瑰宝，数千年来为民族的繁衍昌盛作出了不可磨灭的贡献，随着现代科学技术的迅猛发展，人们对中医药的研究越来越细致越来越精确。
例如山楂叶是蔷薇科植物山里红或野山楂的干燥的叶，多于夏季和秋季采收，我国的野生山楂叶非常资源丰富，多分布于东北、华北等地。山楂叶中含有芦丁、金丝桃苷、槲皮素、牡荆素等多种黄酮类化合物。具有广泛的药理作用，如山楂叶总黄酮可以使血管扩张，改善心肌供血能力，具有抗动脉粥样硬化、抗心肌缺血、抗血小板凝、清除自由基、增强免疫力的作用。对人体起到降压、保护心肌、降血脂、抗癌等作用。其中提升组织中抗氧化酶的活性，抗氧化、抑制自由基损伤的作用显得尤为突出和重要，占当前医学研究领域前三位的肿瘤、衰老和冠心病都与由自由基引起的脂质过氧化有关。这可以说明山楂叶总黄酮具有治疗冠心病以及降血脂、降血压的疗效。目前以山楂叶总黄酮为原料药，在国内被批准上市的中成药有以下几种：山玫胶囊、益心酮、心安胶囊、复心片。其中仅益心酮就有糖衣片、分散片、口服液、软胶囊、滴丸等多种剂型。但是采用传统的水醇法提取山楂叶总黄酮，在醇沉中造成部分黄酮损失，导致产品中总黄酮含量较低。本文利用大孔吸附树脂对山楂叶黄酮进行纯化，收到较好效果，对有效利用我国丰富的山楂资源做了有益的探索，让我们能更好的利用和开发该药材的药用价值。
1.1 研究的目的与意义
1.1.1 研究目的
高血压病、高血脂症等心脑血管疾病是人类头号杀手，严重影响人类健康年死于该类疾病的人数逐年增加，因此言之具有降脂功效的药物显得尤为重要。二黄酮类化合物由于其独特的自由基清除作用，具有良好的抗氧化作用，在降脂方面具有良好的疗效。同时还具有良好的抗肿瘤、抗炎等药理药效作用，因此对黄酮的研究对心脑血管疾病及人类的生存和生活质量的提高具有重要的研究意义，可以为未来相关疾病的治疗提供更好的路径；黄酮类化合物的来源比较广泛，一般主要提取自银杏叶、山楂叶、葛根等天然植物，但其含量较低，提取和纯化工艺比较复杂，提取效率受到严重限制。而山楂及其果实中含有较高浓度的黄酮类化合物和其它有机酸等多种生物活性物质，利用山楂叶提取黄酮和生理活性物质，并对剩余残渣综合利用，是提取黄酮的优良路径。通过对山楂叶总黄酮的大孔吸附树脂纯化工艺进行研究，来改善传统方法提取山楂叶总黄酮时，在醇沉中造成部分黄酮损失、导致产品中总黄酮含量较低的特点，从而增加总黄酮的单位提取量，使得药材的药用价值得到充分的利用。
1.1.2 研究意义
山楂为蔷薇科山楂属(Rosaceaecrataegus. L)植物，分布于北温带，全世界有该属植物280余种，我国有17种。山楂入药在我国有悠久历史，《本草纲目》记载：此品酸甘味温,消食积，补脾[1] 。山楂叶中有丰富的黄酮类化合物，如牡荆素、牡荆素4′鼠李糖苷、牡荆素4′， 7双葡萄糖苷、乙酰牡荆素4′鼠李糖苷、金丝桃苷和芦丁等, 近年来发现山楂叶中的黄酮成分对心脑血管疾病有显著疗效的黄酮成分有治疗心血管疾病作用，特别是在降血压、降血脂、增大心脏血流量等方面疗效显著[2]，采用传统的水醇法提取山楂叶总黄酮，在醇沉中造成部分黄酮损失，导致产品中总黄酮含量较低。本文利用大孔吸附树脂对山楂叶黄酮进行纯化，收到较好效果，对有效利用我国丰富的山楂资源做了有益的探索，符合国内外关于该论题的研究现状和发展趋势。
1.2 山楂叶总黄酮药理作用的研究概述
1.2.1 对心血管系统的影响
1.2.1.1 抗心肌缺血及再灌注损伤
有研究[3]显示山楂叶总黄酮可以降低心肌细胞内MDA的含量并且提升SOD的活力和NO 的含量，从而减弱心肌细胞缺血缺氧损伤后心率失常的程度，推迟心肌细胞的停搏时间，降低由缺血缺氧损伤引起的心肌细胞内酶LDH的释放量。而且山楂叶总黄酮具有增强内源性氧自由基清除系统的能力，可以减轻脂质过氧化反应及其产生的有害代谢物对心肌细胞的损伤，可以看出山楂叶总黄酮对心肌缺血再灌注的损伤有很好的保护作用。
1.2.1.2 抑制血小板聚集
杨宇杰[4]等的研究表明，山楂叶总黄酮对由二磷酸腺苷诱导的小鼠体外血小板聚集的影响。实验结果显示，山楂叶总黄酮能够抑制二磷酸腺苷诱导的血小板聚集，而且与阳性对照组相比较，所用的
1 综述研究
1.1 研究的目的与意义 1
1.1.1 研究目的 1
1.1.2 研究意义 2
1.2 山楂叶总黄酮药理作用的研究概述 2
1.2.1 对心血管系统的影响 2
1.2.2 对脑的影响 3
1.2.3 降血糖作用 3
1.2.4 抗自由基作用 3
1.2.5 抗炎镇痛抗过敏作用 4
1.2.6 肝保护作用 4
1.2.7 消化性溃疡的保护作用 4
1.2.8 抗病毒、抗肿瘤作用 4
1.3 山楂叶总黄酮的大孔吸附树脂纯化工艺研究实验 5
2 实验部分
2.1 主要仪器、试剂与材料 7
2.1.1 仪器 7
2.1.2 试剂 7
2.1.3 材料 7
2.2 方法与结果 7
2.2.1 大孔吸附树脂材料的选择 7
2.2.2 大孔树脂动态吸附量的测定 7
2.2.3 大孔树脂的动态吸附模型 8
2.2.4 洗脱液乙醇浓度的确定 9
2.2.5 蒸馏水除杂质效果的考察 9
2.2
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072￥
br /> 2.1.2 试剂 7
2.1.3 材料 7
2.2 方法与结果 7
2.2.1 大孔吸附树脂材料的选择 7
2.2.2 大孔树脂动态吸附量的测定 7
2.2.3 大孔树脂的动态吸附模型 8
2.2.4 洗脱液乙醇浓度的确定 9
2.2.5 蒸馏水除杂质效果的考察 9
2.2.6 洗脱剂用量的确定 9
2.2.7 纯化工艺的正交实验研究 10
2.2.8微波辅助提取与大孔树脂纯化联用的实验方法与结果 12
结论 14
参考文献 15
致谢 17
1 综述研究
中医药学是中华民族优秀文化的璀璨瑰宝，数千年来为民族的繁衍昌盛作出了不可磨灭的贡献，随着现代科学技术的迅猛发展，人们对中医药的研究越来越细致越来越精确。
例如山楂叶是蔷薇科植物山里红或野山楂的干燥的叶，多于夏季和秋季采收，我国的野生山楂叶非常资源丰富，多分布于东北、华北等地。山楂叶中含有芦丁、金丝桃苷、槲皮素、牡荆素等多种黄酮类化合物。具有广泛的药理作用，如山楂叶总黄酮可以使血管扩张，改善心肌供血能力，具有抗动脉粥样硬化、抗心肌缺血、抗血小板凝、清除自由基、增强免疫力的作用。对人体起到降压、保护心肌、降血脂、抗癌等作用。其中提升组织中抗氧化酶的活性，抗氧化、抑制自由基损伤的作用显得尤为突出和重要，占当前医学研究领域前三位的肿瘤、衰老和冠心病都与由自由基引起的脂质过氧化有关。这可以说明山楂叶总黄酮具有治疗冠心病以及降血脂、降血压的疗效。目前以山楂叶总黄酮为原料药，在国内被批准上市的中成药有以下几种：山玫胶囊、益心酮、心安胶囊、复心片。其中仅益心酮就有糖衣片、分散片、口服液、软胶囊、滴丸等多种剂型。但是采用传统的水醇法提取山楂叶总黄酮，在醇沉中造成部分黄酮损失，导致产品中总黄酮含量较低。本文利用大孔吸附树脂对山楂叶黄酮进行纯化，收到较好效果，对有效利用我国丰富的山楂资源做了有益的探索，让我们能更好的利用和开发该药材的药用价值。
1.1 研究的目的与意义
1.1.1 研究目的
高血压病、高血脂症等心脑血管疾病是人类头号杀手，严重影响人类健康年死于该类疾病的人数逐年增加，因此言之具有降脂功效的药物显得尤为重要。二黄酮类化合物由于其独特的自由基清除作用，具有良好的抗氧化作用，在降脂方面具有良好的疗效。同时还具有良好的抗肿瘤、抗炎等药理药效作用，因此对黄酮的研究对心脑血管疾病及人类的生存和生活质量的提高具有重要的研究意义，可以为未来相关疾病的治疗提供更好的路径；黄酮类化合物的来源比较广泛，一般主要提取自银杏叶、山楂叶、葛根等天然植物，但其含量较低，提取和纯化工艺比较复杂，提取效率受到严重限制。而山楂及其果实中含有较高浓度的黄酮类化合物和其它有机酸等多种生物活性物质，利用山楂叶提取黄酮和生理活性物质，并对剩余残渣综合利用，是提取黄酮的优良路径。通过对山楂叶总黄酮的大孔吸附树脂纯化工艺进行研究，来改善传统方法提取山楂叶总黄酮时，在醇沉中造成部分黄酮损失、导致产品中总黄酮含量较低的特点，从而增加总黄酮的单位提取量，使得药材的药用价值得到充分的利用。
1.1.2 研究意义
山楂为蔷薇科山楂属(Rosaceaecrataegus. L)植物，分布于北温带，全世界有该属植物280余种，我国有17种。山楂入药在我国有悠久历史，《本草纲目》记载：此品酸甘味温,消食积，补脾[1] 。山楂叶中有丰富的黄酮类化合物，如牡荆素、牡荆素4′鼠李糖苷、牡荆素4′， 7双葡萄糖苷、乙酰牡荆素4′鼠李糖苷、金丝桃苷和芦丁等, 近年来发现山楂叶中的黄酮成分对心脑血管疾病有显著疗效的黄酮成分有治疗心血管疾病作用，特别是在降血压、降血脂、增大心脏血流量等方面疗效显著[2]，采用传统的水醇法提取山楂叶总黄酮，在醇沉中造成部分黄酮损失，导致产品中总黄酮含量较低。本文利用大孔吸附树脂对山楂叶黄酮进行纯化，收到较好效果，对有效利用我国丰富的山楂资源做了有益的探索，符合国内外关于该论题的研究现状和发展趋势。
1.2 山楂叶总黄酮药理作用的研究概述
1.2.1 对心血管系统的影响
1.2.1.1 抗心肌缺血及再灌注损伤
有研究[3]显示山楂叶总黄酮可以降低心肌细胞内MDA的含量并且提升SOD的活力和NO 的含量，从而减弱心肌细胞缺血缺氧损伤后心率失常的程度，推迟心肌细胞的停搏时间，降低由缺血缺氧损伤引起的心肌细胞内酶LDH的释放量。而且山楂叶总黄酮具有增强内源性氧自由基清除系统的能力，可以减轻脂质过氧化反应及其产生的有害代谢物对心肌细胞的损伤，可以看出山楂叶总黄酮对心肌缺血再灌注的损伤有很好的保护作用。
1.2.1.2 抑制血小板聚集
杨宇杰[4]等的研究表明，山楂叶总黄酮对由二磷酸腺苷诱导的小鼠体外血小板聚集的影响。实验结果显示，山楂叶总黄酮能够抑制二磷酸腺苷诱导的血小板聚集，而且与阳性对照组相比较，所用的
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